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Boston Biochem/Recombinant Human His6-UBE2R1/CDC34 Protein, CF/E2-610-100
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SummaryProduct DatasheetsCarrier FreeReconstitution CalculatorBackgroundRelated Research Areas
Recombinant Human His6-UBE2R1/CDC34 Protein, CF Summary
Purity
>95%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by Colloidal Coomassie® Blue stain
Activity
Recombinant Human His6-UbcH3/Cdc34 is a member of the Ubiquitin-conjugating (E2) enzyme family that receives Ubiquitin from a Ubiquitin-activating (E1) enzyme and subsequently interacts with a Ubiquitin ligase (E3) to conjugate Ubiquitin to substrate proteins. Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. We recommend an initial Recombinant Human His6-UbcH3/Cdc34 concentration of 0.1-1 μM.
Source
E. coli-derived human UbcH3 proteinContains an N-terminal Met and 6-His tag
Accession #
P49427
Predicted Molecular Mass
28 kDa
Product Datasheets
Product Datasheet
COA
SDS
Carrier Free
What does CF mean?
CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.
What formulation is right for me?
In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.
E2-610
| Formulation | X mg/ml (μM) in 50 mM HEPES pH 7.5, 200 mM NaCl, 1 mMTCEP, 10% Glycerol (v/v) |
| Shipping | The product is shipped with dry ice or equivalent. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below. |
| Stability & Storage: | Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
|
Reconstitution Calculator
Reconstitution Calculator
Background: UBE2R1/CDC34
Ubiquitin-conjugating Enzyme H3 (UbcH3), also known as Cell Division Cycle 34 (Cdc34), is a member of the Ubiquitin-conjugating (E2) enzyme family (1). UbcH3 has a predicted molecular weight of 26 kDa. The human protein shares 98% amino acid (aa) sequence identity with the mouse and rat orthologs. In addition to an E2 catalytic core domain, UbcH3 has two Ubiquitin binding sites, UBS1, from aa 205-215, and UBS2, from aa 216-225, and a C-terminal acidic tail domain (2,3). UbcH3 is required for efficient cell cycle progression in human cells (4). UbcH3 interacts with the SCF(Fbw7) and SCF(Skp2) Ubiquitin ligases (E3s) to target the key cell cycle proteins Myc and p27/Kip1, respectively, for ubiquitination and degradation (4,5). Furthermore, CK2 has been shown to phosphorylate human UbcH3 on Ser203, Ser222, and Ser231 in cycling cells (6). The proliferation of cancer cell lines is inhibited following treatment with a human UbcH3 inhibitor, suggesting that UbcH3 also plays a significant role in cancer (7). This protein has an N-terminal His6-tag.
References
- Plon, S.E. et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:10484.
- Choi, Y.S. et al. (2010) J. Biol. Chem. 285:17754.
- Block, K. et al. (2005) Cell Cycle 4:1421.
- Butz, N. et al. (2005) Exp. Cell Res. 303:482.
- Popov, N. et al. (2010) Nat. Cell Biol. 12:973.
- Sadowski, M. et al. (2007) Biochem. J. 405:569.
- Ceccarelli, D.F. et al. (2011) Cell 145:1075.
Entrez Gene IDs
997 (Human); 216150 (Mouse)
Alternate Names
Cdc34; cell division cycle 34 homolog (S. cerevisiae); cell division cycle 34; E2-CDC34; EC 6.3.2.19; UBC3; UBE2R1; UBE2R1UBCH3; ubiquitin carrier protein; ubiquitin-conjugating enzyme E2 R1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2-32 kDa complementing; Ubiquitin-conjugating enzyme E2-CDC34; Ubiquitin-protein ligase R1
Citations for Recombinant Human His6-UBE2R1/CDC34 Protein, CF
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- Prp19/Pso4 Is an Autoinhibited Ubiquitin Ligase Activated by Stepwise Assembly of Three Splicing FactorsAuthors: TR de Moura, S Mozaffari-, CZK Szabó, J Schmitzová, O Dybkov, C Cretu, M Kachala, D Svergun, H Urlaub, R Lührmann, V PenaMol. Cell, 2018;69(6):979-992.e6.Species: BacteriaSample Types: Cell LysatesApplications: Bioassay
- BAP1 regulates IP3R3-mediated Ca(2+) flux to mitochondria suppressing cell transformationAuthors: A Bononi, C Giorgi, S Patergnani, D Larson, K Verbruggen, M Tanji, L Pellegrini, V Signorato, F Olivetto, S Pastorino, M Nasu, A Napolitano, G Gaudino, P Morris, G Sakamoto, LK Ferris, A Danese, A Raimondi, C Tacchetti, S Kuchay, HI Pass, EB Affar, H Yang, P Pinton, M CarboneNature, 2017;546(7659):549-553.Species: N/ASample Types: ProteinApplications: Bioassay
- SAG/RBX2 E3 ligase complexes with UBCH10 and UBE2S E2s to ubiquitylate ?-TrCP1 via K11-linkage for degradationSci Rep, 2016;6(0):37441.Species: HumanSample Types: Whole CellsApplications: Bioassay
- A subset of mixed lineage leukemia proteins has plant homeodomain (PHD)-mediated E3 ligase activity.Authors: Wang, Jingya, Muntean, Andrew G, Wu, Laura, Hess, Jay LJ Biol Chem, 2012;287(52):43410-6.Species: HumanSample Types: Recombinant ProteinApplications: Ubiquitination
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2021-07-23
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2021-08-29
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2019-09-04
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2019-01-22
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2021-09-01
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2021-07-29
诊断试剂盒是指能对人体体液、血液等反映人体健康状况的物质作出定性、定量的检测。... 查看更多
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2019-02-15
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2021-09-23
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2019-08-29
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2019-04-04
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2019-06-25
可被单一限制酶切割用作克隆载体的λ噬菌体DNA的制备实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。在某些情况下，制备好的 λ 噬菌体 DNA 经限制酶的简单消化即可用于克隆。但只有... 查看更多
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2019年全国职业院校技能大赛高职组“护理技能”赛项题库123
2021-07-24
现没高科技
没证实情况任何没依据推断都假想空想
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【求助】慢病毒pLenti7.3/V5TOPO表达系统的克隆 核酸基因技术...123
genomegao2021-08-12
大家好！请问哪位高人利用慢病毒载体做过克隆？我有一些问题请教,急需各位的帮助！我最近在做有关慢病毒表达系统的实验，购买的是Invitrogen 的TOPO克隆试剂盒，将目的基因600bp连在载体pLenti7.3/V5-TOPO载体上，转化后的第二天挑的单克隆，五个克隆中通过菌落PCR鉴定目的片段连上的只有一个克隆，提质粒后做了酶切鉴定，发现载体在LTR没有重组，但测序后发现是反向连接。两周后我重新挑克隆，菌落PCR 后发现目的片段均能扩增出来，但提质粒后酶切电泳后，发现所有我挑的十几个克隆载体的大小与原来不一样，原来是8.9Kb,现在小于4.5Kb，双酶切原来得到三条片段，现在只有一条.....难道全是重组的质粒吗？重组效率这么高吗？
请各位大侠帮忙分析一下原因！！万分感谢！！！
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【求助】最近用stratagene点突变试剂盒作定点突变,老是长不出克隆,...123
wangxiaoguang2021-08-24
【求助】求santa cruz公司NFκB p64鼠单克隆抗体SABC免疫组化...123
dianxing272822021-09-10
猪内源性逆转录病毒检测相关研究123
晓雾2005-04-13
相关疾病：白血病免疫缺陷综合征Characterizationofamonoclonalantibodyspecific...
cloneez pcr克隆试剂盒怎么样123
纯洁的小伤vn72021-09-06
我没用产品我直都用
ClonExpress II One Step Cloning Kit同源重组克隆试剂盒同原理重组效率高我实验室都用克隆试剂盒基本用重复实验功推荐使用产品
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武汉生物制品研究所 研究院 湖北省人民政府门户网站123
幽灵军团小姻2021-08-13
用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞) （2002）
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
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A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
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新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
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武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
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乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
单克隆抗体的制备(详细材料)123
晓风3942017-11-08
1.蛋白A-Sepharose置于Tris缓冲液（超50倍量v/v）充溶胀室温其灌入直径2.5 cm 玻璃层析柱用Tris缓冲液使其平衡
2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测
3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4
4.采用ELISA检测抗原特异性MAb
5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃
2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测
3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4
4.采用ELISA检测抗原特异性MAb
5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃
【求助】如何P全长cDNA123
jingjae2021-07-28
...的反转录buffer用完了,可以用其他反转录试剂盒里面的buffer吗...123
之玮4dX嶑2021-09-03
用克隆片段试剂叫缝克隆试剂盒楼提同科物操作简单快速效率高
什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长...123
浪人TA421002021-09-02
末端扩增技术包括5端扩增3端扩增般需要用含已知序列接通巢式PCR目产物克隆测序目基片段组装全通5端难度较3端
(2015专业论文)肠道病毒71型（ev71）感染性克隆的构建123
yukingboy2021-08-30
想做EV71的CDNA感染性克隆，在引物的5‘端引入启动子序列，然后利用用T7启动子进行体外转录，转染细胞，拯救活病毒，现在有几个问题不太明白，想请教一下各位：
1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子，3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段，回收纯化之后可以用来直接做体外转录么？为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面，扩增之后提取出来线性化之后，再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求？
2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK，在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列，这段序列也会被启动子转录，这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响？
3.有人在做反向遗传么，哪些载体可以用来进行体外转录？插入片段为7.5K。
1.如果在引物的5’引物引入了T7启动子，3‘引物也引入了polyT,PCR扩增出全长片段，回收纯化之后可以用来直接做体外转录么？为什么看到文献里都是先把这个PCR片段连接到载体里面，扩增之后提取出来线性化之后，再进行体外转录。是不是转录对模板的量有要求？
2.如果使用一些带有T7启动子序列的载体比如pBluescriptSK，在启动子序列和酶切位点之间还有多余的一段序列，这段序列也会被启动子转录，这一小段多余的序列是否会对接下来的转染以及病毒拯救带来影响？
3.有人在做反向遗传么，哪些载体可以用来进行体外转录？插入片段为7.5K。
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