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NEB/NEB® Golden Gate Assembly Mix/E1600S/15 reactions
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Description:
TheNEBGoldenGateAssemblyMixcontainsanoptimizedmixofBsaIandT4DNALigase.Togethertheseenzymes,alongwithahighlyoptimizedbuffer,candirecttheassemblyofmultipleinserts/modulesusingtheGoldenGateapproach.AlsoprovidedisthepGGAdestinationplasmid,whichprovidesabackboneforyourassembly,andfeaturesconvenientrestrictionenzymesitesforsubcloning,andhasT7/SP6promotersequencestoenableinvitrotranscription.TheefficientandseamlessassemblyofDNAfragments,commonlyreferredtoasGoldenGateassembly(1,2),hasitsoriginsin1996,whenforthefirsttimeitwasshownthatmultipleinsertscouldbeassembledintoavectorbackboneusingonlythesequential(3)orsimultaneous(4)activitiesofasingletypeIISrestrictionenzymeandT4DNAligase.
TypeIISrestrictionenzymesbindtotheirrecognitionsitesbutcuttheDNAdownstreamfromthatsiteatapositional,notsequence-specific,cutsite.Thus,asingleTypeIISrestrictionenzymecanbeusedtogenerateDNAfragmentswithuniqueoverhangs.Asanexample,BsaIhasarecognitionsiteofGGTCTC(N1/N5),wheretheGGTCTCrepresentstherecognition/bindingsite,andtheN1/N5indicatesthecutsiteisonebasedownstreamonthetopstrand,andfivebasesdownstreamonthebottomstrand.Assemblyofdigestedfragmentsproceedsthroughannealingofcomplementaryfourbaseoverhangsonadjacentfragments.ThedigestedfragmentsandthefinalassemblynolongercontainType IISrestrictionenzymerecognitionsites,sonofurthercuttingispossIBLe.Theassemblyproductaccumulateswithtime.
Whileparticularlyusefulformulti-fragmentassembliessuchasTranscriptionActivatorLikeEffectors(TALEs)(5)andTALEsfusedtoaFokInucleasecatalyticdomain(TALENs)(6),theGoldenGatemethodcanalsobeusedforcloningofsingleinserts. TolearnmoreabouttheGoldenGateAssemblyworkflow,watchthisvideotutorial.
TohelpselectthebestDNAassemblymethodforyourneeds,pleaseuseourSyntheticBIOLOGy/DNAAssemblySelectionChart.
AssemblyreactionsweresetupusingeitherpreclonedinsertsorPCRampliconsdirectly.Reactionconditionsweresetupaccordingtomanufacturer,andareshownabove.Twoseparateexperimentsareshownforeachreactiontype.
KitComponents
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration | |
| NEB®GoldenGateBuffer | -20 | 10X |
| NEB®GoldenGateAssemblyMix | -20 | |
| pGGADestinationPlasmid | -20 |
蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
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2019-07-12
北京拜尔迪生物技术有限公司在发布的pUC18克隆载体供应信息，浏览与pUC18克隆载体相关的产品或在搜索更多与pUC18克隆载体相关的内容。 查看更多
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2021-09-20
dianova公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2019-05-16
服务名称：Subclon Vector Construction Services 查看更多
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2018-12-26
纯合克隆筛选1．融化杂合突变ES细胞，ES/LIF培养液培养，每2～3天传代，实验开始把细胞接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中，每皿接种1～2×106细胞。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系，因不同细胞系的转化效率不全相同，另外对检测细胞表型也需如此。2．每皿细胞分别加入1.0～2.0mg/ml的G4178（终浓 查看更多
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2021-08-01
FastaTM一步法克隆试剂盒; FastaTM多片段一步法克隆试剂盒如果您无法正常浏览邮件，请点击此处观看内容！若您不希望收到此类邮件，请点击退订。 FastaTM一步法克隆试剂盒 产品名称规格货号 价格（元） FastaTM One Step Cloning Kit50 rxnFOSC-50 800 非连接依赖型的快速克隆技术 • 简单、快速、高效，... 查看更多
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2019-01-08
北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)在发布的人 TOB2基因 ORF cDNA clone (克隆载体)供应信息，浏览与人 TOB2基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的产品或在搜索更多与人 TOB2基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的内容。 查看更多
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2019-01-14
北京百泰克生物技术有限公司在发布的新型pUM-T simple快速克隆试剂盒供应信息，浏览与新型pUM-T simple快速克隆试剂盒相关的产品或在搜索更多与新型pUM-T simple快速克隆试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-07-31
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2019-01-22
中美泰和生物技术（北京）有限公司在发布的中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性供应信息，浏览与中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性相关的产品或在搜索更多与中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性相关的内容。 查看更多
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近岸蛋白质科技有限公司在发布的NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装供应信息，浏览与NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装相关的产品或在搜索更多与NovoRec®PCR一步定向克隆试剂盒试用装相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
Peter Novick Lab, Department of Cell Biology Yale University School of Medicine HOW TO PERFORM AN INTERRUPT OF ANONGOING AUTOCOUNT1). This program interrupts t 查看更多
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2021-08-23
实验原理重组质粒的构建T质粒载体重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中，将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。... 查看更多
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常见问题
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RNA逆转录生成的是双链DNA吗?为什么?123
林羽熙Candice2017-12-02
1、先是合成与RNA互补的DNA单链，然后DNA单链在DNA聚合酶的作用下继续合成为DNA双链。2、逆转录（reverse transcription）是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的复制形式，需逆转录酶的催化。向左转|向右转3、过程：先是以RNA为模版，在逆转录酶的作用下合成与其碱基互补配对的DNA单链，然后再以DNA单链为模版在DNA聚合酶的作用下继续合成双链DNA。4、逆转录是RNA病毒的复制形式，需要逆转录酶的催化。5、艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
我们班要举行辩论比赛,主题是:克隆人的出现是利大于弊还是弊大于利...123
2021-08-08
我们班举行一个辩论赛、关于“克隆”这一标题来描述、我要的是“利大于弊”。。。请各位帮我找找克隆利大于弊的资料。。。谢谢了
cloudcloneELISA 试剂盒价格采购供应商信息123
笨笨的汉堡包2021-09-14
我非医学专业人士，但因工作需要了解这家公司和它的产品品质，希望用过或对比过的童鞋能帮我科普下专业知识，万分感谢~~具体问题可以私聊哈，如果能留下QQ、电话最佳~~~
请问,化学牛人,格式试剂乙醚溶液是如何配制的?不要拿网上那些复制...123
2021-07-22
配置制备
量水用精细般瓶装乙醚即
量水用精细般瓶装乙醚即
产品类别 SABC三步法试剂盒 | 博士德生物 BOSTER Biological...123
zhushuguang95212005-04-22
什么是RACE技术?采用RACE技术如何克隆得到基因的cDNA全长...123
浪人TA421002021-09-02
末端扩增技术包括5端扩增3端扩增般需要用含已知序列接通巢式PCR目产物克隆测序目基片段组装全通5端难度较3端
克隆对现代社会的影响及意义123
啊陌02182021-08-19
1) 克隆减少遗传变异,通克隆产体具同遗传基,同疾病敏性,种疾病毁灭整由克隆产群体. 设想,家牛群都同克隆产物,种并严重病毒能毁灭全畜牧业.
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,（或）受
2) 克隆技术使用使倾向于量繁殖现种群利用价值体,按自规律促进整种群优胜劣汰.意义说,克隆技术干扰自进化程.
3) 克隆技术种昂贵技术,需要量金钱物专业士参与,失败率非高.莉277实验唯.虽现发展更先进技术,功率能达2-3%.
4) 转基物提高疾病传染风险.例,产药物牛奶牛染病毒,种病毒能通牛奶染病
5) 克隆技术应用于体导致代遗传性状工控制.克隆技术引起争论核能否允许发育初期类胚胎进行遗传操作.伦理家所能接受.
6) 克隆技术用创造超,或拥健壮体格却智力低.且,克隆技术能够类效运用,男性失遗传意义.
7) 克隆技术家庭关系带影响巨.由父亲DNA克隆孩看作父亲双胞胎兄弟,延迟几十已.难设想,发现自另外完全复制品,（或）受
反转录得到的cdna是单链还是双链_123
2021-07-31
说PCR技术双链需要两种引物具体问题具体析取决于目
克隆启动子用哪种试剂盒好_问答详情_克隆试剂盒_克隆和表达_分子类...123
草帽仔IAjdh2021-09-17
克隆启用GenomeWalkerTM Universal Kit试剂盒错找代理商购买咯价格便宜折扣
G060501一步法快速克隆试剂盒中文说明书 123
叼炸天的ueo2017-11-07
单克隆抗体的制备(详细材料)123
晓风3942017-11-08
1.蛋白A-Sepharose置于Tris缓冲液（超50倍量v/v）充溶胀室温其灌入直径2.5 cm 玻璃层析柱用Tris缓冲液使其平衡
2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测
3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4
4.采用ELISA检测抗原特异性MAb
5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃
2.腹水浓稀释于3倍体积Tris缓冲液1~5 ml/min 速度于蛋白A-Sepharose柱用Tris缓冲液洗柱直至所未结合蛋白都洗脱采用A280监测
3.依用2~3倍柱床体积柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白洗脱蛋白直接接入装缓冲液管缓冲液体积应所收集蛋白体积1/4
4.采用ELISA检测抗原特异性MAb
5.超滤器浓缩所离单克隆抗体1~5mg/ml所用超滤膜XM50单克隆抗体存于-20℃
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