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NEB/NEB® PCR Cloning Kit (Without Competent Cells)/E1203S/20 reactions
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4000-520-616
Description:
- UpdatedtoallowforinvitrotranscriptionwithbothSP6andT7promoters
- BsaI-siteremovedfromampicillin-resistantgene(allowsforcloningofGoldenGateAssemblymodules)
- Morerestrictionsitesadded,includingfour8-basecutters
Theultimatein flexibility: clonewithanyampliconmadewithany DNApolymerase,withorwithout5´phosphates,purifiedornot!
Mapshownabovedisplaystheconstructformedifnoinsertispresent.Uniquerestrictionsitesareshown
inblack.Additionalrestrictionsitesthatcanbeusedforsubcloningareshowninred.Expandedboxbelow
showslocationofsequencingprimers,restrictionsitesforsubcloning,andplacementofinsertionsite
withinthetoxicminigene.
KitComponents
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration | |
| CloningMix1 | -20 | 2.5X |
| CloningMix2 | -20 | 10X |
| AmpliconCloningControl | -20 | 15ng/μl |
| CloningAnalysisForwardPrimer | -20 | 100μM |
| CloningAnalysisReversePrimer | -20 | 100μM |
| LinearizedpMiniT™2.0Vector | -20 | 25μg/ml |
Notes:
TheNEBPCRCloningKitcontainsasufficientsupplyofmaterialstoperform20x10μlcloningreactions.Primersarealsoprovided,allowingscreeningforinsertsbycolonyPCRand/orsequencing.蚂蚁淘电商平台
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2019-02-20
中美泰和生物技术（北京）有限公司在发布的CloneSmarter品牌-TOPO克隆载体-适用于末端加A片段-中美泰和独家代理供应信息，浏览与CloneSmarter品牌-TOPO克隆载体-适用于末端加A片段-中美泰和独家代理相关的产品或在搜索更多与CloneSmarter品牌-TOPO克隆载体-适用于末端加A片段-中美泰和独家代理相关的内容。 查看更多
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2020-03-16
北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)在发布的小鼠 TrkA/NTRK1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)供应信息，浏览与小鼠 TrkA/NTRK1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的产品或在搜索更多与小鼠 TrkA/NTRK1 基因 ORF cDNA clone (克隆载体)相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
1.6 TAlL-PCR 很早就有用随机引物的PCR，但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生，所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR，则解决了这个问题，后来有研究表明，经改良过的TAIL 查看更多
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克隆载体pBR322是由深圳市宝珠生物科技有限公司代理或销售的Promega品牌的试剂，产品来源于美国。深圳市宝珠生物科技有限公司是中国最权威的克隆载体pBR322试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售克隆载体pBR322试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业克隆载体pBR322仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的克隆载体pBR322产品 查看更多
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2019-07-12
北京拜尔迪生物技术有限公司在发布的pUC18克隆载体供应信息，浏览与pUC18克隆载体相关的产品或在搜索更多与pUC18克隆载体相关的内容。 查看更多
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2019-01-22
中美泰和生物技术（北京）有限公司在发布的中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性供应信息，浏览与中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性相关的产品或在搜索更多与中美泰和独家代理美国CloneSmarter品牌-最TOP的TOPO克隆载体-适用于平末端片段的克隆 Amp抗性相关的内容。 查看更多
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2021-09-15
InVitria公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2021-07-31
FastaTM一步法克隆试剂盒; FastaTM多片段一步法克隆试剂盒如果您无法正常浏览邮件，请点击此处观看内容！若您不希望收到此类邮件，请点击退订。 FastaTM一步法克隆试剂盒 产品名称规格货号 价格（元） FastaTM One Step Cloning Kit50 rxnFOSC-50 800 非连接依赖型的快速克隆技术 • 简单、快速、高效，... 查看更多
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2018-12-26
纯合克隆筛选1．融化杂合突变ES细胞，ES/LIF培养液培养，每2～3天传代，实验开始把细胞接种到三个100mm铺有凝胶碟皿中，每皿接种1～2×106细胞。为筛选需用一个以上的ES杂合突变细胞系，因不同细胞系的转化效率不全相同，另外对检测细胞表型也需如此。2．每皿细胞分别加入1.0～2.0mg/ml的G4178（终浓 查看更多
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2021-08-29
深圳拜凯瑞科技有限公司在发布的分子克隆试剂盒供应信息，浏览与分子克隆试剂盒相关的产品或在搜索更多与分子克隆试剂盒相关的内容。 查看更多
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2019-03-16
北京百泰克生物技术有限公司在发布的新型pUM-T EcoRl快速克隆试剂盒供应信息，浏览与新型pUM-T EcoRl快速克隆试剂盒相关的产品或在搜索更多与新型pUM-T EcoRl快速克隆试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-09-04
pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体是由深圳市伟通生物公司代理或销售的Clontech品牌的试剂，产品来源于国外。深圳市伟通生物公司是中国最权威的pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的pLVX-Tight-Puro载体病毒克隆载体产品 查看更多
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武汉生物制品研究所 研究院 湖北省人民政府门户网站123
幽灵军团小姻2021-08-13
用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞) （2002）
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
康赛宁（注射用A群链球菌）（1999）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体（1999）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒 （1990） 吸附细胞百白破联合疫苗(三等奖)（2007）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(三等奖)（2001） 牛精浆纯化神经周围神经再影响(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1996）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（1995）
HLA单克隆抗体诊断试剂盒研制(三等奖)（1991）
抗T淋巴细胞及其亚群单克隆抗体研究(二等奖)（1990） 狂犬病疫苗评价(二等奖)（2008）
及亚洲区狂犬病毒流行病研究(三等奖)（2005）
抗乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）Fab噬菌体抗体库构建、筛选及鉴定(三等奖)（2005）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1996）
血源性抗狂犬病免疫球蛋白(三等奖)（1996）
狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基克隆测序表达(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1993）
痘苗病毒载体狂犬病毒基工程疫苗毒种研究(三等奖)（1993）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1992）
快速乙肝表面抗原酶标试剂盒试制(三等奖)（1992） 单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(三等奖)（1992）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖) （1990） 冻干用狂犬病疫苗 (等奖)（2007）
静脉注射用SARS免疫球蛋白(三等奖)（2006）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（二等奖）（2003）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(二等奖)（2001）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(三等奖)（2001）
伤寒Vi糖菌苗(二等奖)（1997）
牛精浆纯化神经周围神经再影响(二等奖)（1995）
新菌抗癌剂1号(三等奖)（1995）
淋球菌培养基、氧化酶试纸及奈瑟氏菌快速糖试验试剂盒研制应用(三等奖)（1995）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(三等奖)（1994）
乙肝三系统单抗杂交瘤细胞株建立及乙肝诊断试剂两半研制(二等奖)（1992）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(二等奖)（1991）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(三等奖)（1991）
快速乙肝表面抗原全血凝集诊断试剂盒(二等奖)（1990）
冻干含钙凝血酶研究(二等奖)（1990）
湖北省科技推广奖
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广项目(二等奖) （2004）
湖北省卫厅医药卫科技进步奖
胶体金探针试剂(二等奖)(1995）
同伤寒菌苗接种体反应血清效观察(三等奖)（1995）
单克隆APAAP试剂盒(三等奖)（1995）
抗纤维蛋白质及其降解产物单克隆抗体(二等奖)（1995）
抗淋巴细胞球蛋白杂抗体吸收工艺改进研究(三等奖)（1993）
血吸虫虫卵抗体快速诊断用酶标试剂盒(三等奖)（1993）
单克隆(鼠)PAP试剂研制(等奖)（1993）
A、B、C群脑膜炎奈瑟氏菌糖单抗及ABC群混合价诊断试剂研究(等奖)（1990）
梅毒诊断用RPR纸片试剂(二等奖)（1990）
十三种（套）临床化试剂盒(二等奖)（1990）
武汉优秀十科技创新
新型疫苗研究及产业化发 （2006） SARS病毒灭疫苗临床前研究 （2006）
吸附精制百白破(细胞百咳)联合疫苗推广应用 （2006）
百白破乙肝四联疫苗（2006）
冻干用狂犬病疫苗（2006）
狂犬病免疫球蛋白（2006）
乙型肝炎免疫球蛋白（2006）
武汉市科技进步奖
百白破乙肝四联疫苗(等奖)（2007）
冻干用狂犬病疫苗(二等奖)（2006）
精制单份乙型脑炎减毒疫苗 (二等奖)（2005）
麻疹、腮腺炎二联减毒疫苗 (三等奖) （2004）
用狂犬病纯化疫苗（VERO细胞）（等奖）（2003）
1.0ml/剂用狂犬病纯化疫苗获武汉市2002度优秀新产品、新技术技术创新先进表彰（2002）
注射用鼠抗T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体(等奖)（2000）
吸附精制百咳菌苗、白喉、破伤风类毒素混合制剂研制(二等奖)（2000）
检测纤维连接蛋白双抗体ELISA夹建立及试剂盒研制(三等奖)（1997）
伤寒Vi糖菌苗(三等奖)（1996）
抗咳喘片研制应用(三等奖)（1993）
血清培养液(三等奖)（1992）
武汉市发明奖
安全类免疫缺陷病毒抗体阳性血清替代物(三等奖)（2001）
抗咳喘片研制应用(二等奖)（1992）图" class="ikqb_img_alink">
2019年全国职业院校技能大赛高职组“护理技能”赛项题库123
2021-07-24
现没高科技
没证实情况任何没依据推断都假想空想
没证实情况任何没依据推断都假想空想
胱抑素C测定试剂盒怎么用,注意事项123
放弃愛情LRqk12017-11-10
胱抑素C检测试剂盒(干式免疫荧光定量)内含10条、25条、50条或100条单份检测卡每份试剂由检测卡干燥剂构检测卡由试纸条外壳试纸条构其试纸条由品垫、层析膜(检测区包CysC单克隆抗体I作捕获抗体质控区包兔抗鼠IgG抗体NC膜缘与品垫交界处包荧光标记CysC单克隆抗体II)、吸水纸、衬垫构检测缓冲液10管/盒25管/盒50管/盒100管/盒四种规格含吐温20、叠氮钠防腐剂等磷酸盐缓冲液pH=7.2±0.2基本参数：线性范围：0.50mg/L～10.00mg/L范围内线性相关系数r≥0.990准确度：相关系数r≥0.975相偏差≤20%批内重复性：应≤10%批间差：应≤15%
启动子(Promoters)克隆方法研究进展123
骗精算了2602021-08-03
启没cDNA文库,genomic DNA,用DNA模板才能扩
【求助】有人用过pcDNA3.1 TA TOPO克隆试剂盒吗? 核酸基因...123
xiaotian09032021-09-12
基因敲除小鼠 实验方法 123
王木木1272017-12-02
重组载体电转胚胎干细胞基敲除鼠已经现代命科基础研究药物研发领域或缺实验物模型基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠目前止唯满足几乎所基组修饰要求打靶技术. 课题设计. 获F1代鼠. 利用百奥赛图自主发UCA试剂盒sgRNA/Cas9进行性检测； 7、EGE技术（基于Crispr cas9技术）比较火热基敲除鼠制备技术； 4;Cas9 mRNA； 5； 2利用PCRsouthern blot杂交技术（基敲除鼠检测金标准）F1代鼠进行基型鉴定. 嵌合鼠. 鼠受精卵原核注射sgRNA/. 按照课题设计完打靶载体设计构建; 2基敲除/用G418筛选转染胚胎干细胞. 体外转录sgRNA/利用两种技术制备基敲除鼠流程阳性克隆;敲入效率高速度快;敲入实现基快2月即F0代阳性鼠. 进步通PCRsouthern blot杂交技术（基敲除鼠检测金标准）步阳性克隆进行筛选目前应用鼠基敲除命科; 6. 设计构建打靶载体； 3. 获Fo代鼠利用PCRFo代鼠进行基型鉴定； 3. 设计构建识别靶序列sgRNA其实； 4、 利用EGE技术（基于Crispr cas9技术）制备基敲除鼠流程 15月F1F1代杂合鼠、类医药健康研究领域发挥着重要作用、 基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠流程. 胚胎干细胞阳性克隆注射鼠囊胚基于胚胎干细胞基打靶技术并获F1阳性杂合鼠稳定整合外源基胚胎干细胞阳性克隆EGE技术（基于Crispr cas9技术）系统构建简单： 1； 5虽EGE技术（基于Crispr cas9技术）制备基敲除鼠看似比基于胚胎干细胞基打靶技术制备基敲除鼠流程繁琐且其周期工作量订购课题BAC菌. 设计构建致靶基切割EGE系统载体质粒； 8;Cas9 mRNA打靶载体并植入假孕鼠宫内； 6二、物种基敲除/
病毒复制循环可分为哪几个阶段?各个阶段的主要过程是什么? 123
岩情89jS2017-12-02
（一）吸附(adsorption):病毒表面接触蛋白 ---- 细胞表面受体
吸附（Adsorption）是指病毒附着于敏感细胞的表面，它是感染的起始期。细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用，这是可逆的联结。随后的特异性吸附是非常重要的，根据这一点可确定许多病毒的宿主范围，不吸附就不能引起感染。
脊髓灰质炎病毒的细胞表面受体是免疫球蛋白超家族，在非灵长类细胞上没有发现此受体，而猴肾细胞、 Hela细胞和人二倍体纤维母细胞上有它的受体，故脊髓来质炎病毒能感染人体鼻、咽、肠和脊髓前角细胞，引起脊髓灰质炎（小儿麻痹）。
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸（N-乙酰神经氨酸）的糖蛋白，它与流感病毒表面的血凝素剌突（受体连结蛋白）有特殊的亲和力，如用神经氨酸酶破坏该受体，则流感病毒不再吸附这种细胞。
此外，HIV受体为CD4；鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1（1CAM-1）；EB病毒的受体为补体受体-2（CR-2）。病毒吸附也受离子强度、pH、温度等环境条件的影响。研究病毒的吸附过程对了解受体组成、功能、致病机理以及探讨抗病毒治疗有重要意义。
（二）穿入(penetration):膜融合；病毒胞饮等
穿入（Penetration）是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆，开始病毒感染的细胞内期。
主要有三种方式：（1）融合 (Fusion)，在细胞膜表面病毒囊膜与细胞膜融合，病毒的核衣壳进入胞浆。副粘病毒以融合方式进入，如麻疹病毒、腮腺炎病毒囊膜上有融合蛋白，带有一段疏水氨基酸，介导细胞膜与病毒囊膜的融合。（2）胞饮 (Viropexis)，由于细胞膜内陷整个病毒被吞饮入胞内形成囊泡。胞饮是病毒穿入的常见方式，也是哺乳动物细胞本身具有一种摄取各种营养物质和激素的方式。当病毒与受体结合后，在细胞膜的特殊区域与病毒病毒一起内陷形成膜性囊泡，此时病毒在胞浆中仍被胞膜覆盖。某些囊膜病毒，如流感病毒借助病毒的血凝素（HA）完成脂膜间的融合，囊泡内低Ph环境使HA蛋白的三维结构发生变化，从而介导病毒囊膜与囊泡膜的融合，病毒核衣壳进入胞浆。（3）直接进入，某些无囊膜病毒，如脊髓灰质炎病毒与受体接角后，衣壳蛋白的多肽构形发生变化并对蛋白水解酶敏感，病毒核酸可直接穿越细胞膜到细胞浆中，而大部分蛋白衣壳仍留在胞膜外，这种进入的方式较为少见。
（三）脱壳(uncoating):细胞溶酶体酶； 病毒脱壳酶
穿入和脱壳是边续的过程，失去病毒体的完整性被称为“脱壳 (Uncoating)”。脱壳到出现新的感染病毒之间叫“隐蔽期”。经胞饮进入细胞的病毒，衣壳可被吞噬体中的溶酶体酶降解而去除。有的病毒，如脊髓灰质炎病毒，在吸附穿入细胞的过程中病毒的RNA释放到胞浆中。而痘苗病毒当其复杂的核心结构进入胞浆中后，随之病毒体多聚酶活化，合成病毒脱壳所需要的酶，完成脱壳。
（四）生物合成(biosynthesis):病毒核酸复制； 病毒蛋白质合成
DNA病毒和RNA病毒在复制机理有区别，但复制的结果都是合成核酸分子和蛋白质衣壳，然后装配成新的有感染性的病毒。一个复制周期大约需6～8小时。
1. 双股DNA病毒的复制----多数DNA病毒为双股DNA。
双股DNA病毒，如单纯疹病毒和腺病毒在宿主细胞核内的RNA聚合酶作用下，从病毒DNA上转录病毒mRNA，然后转移到胞浆核糖体上，指导合成蛋白质。
1) 病毒基因的mRNA转录（早期转录）: 病毒本身含有RNA聚合酶，可在胞浆中转录mRNA。mRNA有二种：早期m RNA，主要合成复制病毒DNA所需的酶及调控蛋白等，如依赖DNA的DNA聚合酶，脱氧胸腺嘧啶激酶等，称为早期蛋白；
2）病毒核酸复制：子代病毒DNA的合成是以亲代DNA为模板，按核酸半保留形式复制子代双股DNA。DNA复制出现在结构蛋白合成之前。
3）晚期转录: 晚期mRNA和晚期翻译:晚期蛋白 --- 衣壳蛋白, 包膜蛋白
晚期mRNA ，在病毒DNA复制之后出现，主要指导合成病毒的结构蛋白，称为晚期蛋白。
2. 单股RNA病毒的复制----RNA病毒核酸多为单股，病毒全部遗传信息均含在RNA中。
又可分为：
病毒RNA的碱基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒。
病毒RNA碱基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒。
逆转录病毒又称RNA肿瘤病毒 (Oncornavirus) ，病毒体含有单股正链RNA、依赖RNA的DNA多聚酶（逆转录酶）和 tRNA。
(1) 正链RNA病毒的复制 以脊髓灰质炎病毒为例，侵入的RNA直接附着于宿主细胞核糖体上，翻译出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解为结构蛋白和非结构蛋白，如依赖RNA的RNA聚合酶。在这种酶的作用下，以亲代RNA为模板形成一双链结构，称“复制型（Replicative form）”。再从互补的负链复制出多股子代正链RNA，这种由一条完整的负链和正在生长中的多股正链组成的结构，秒“复制中间体(Replicative intermediate) ”。新的子代RNA分子在复制环中有三种功能：为进一步合成复制型起模板作用；继续起mRNA作用；构成感染性病毒RNA。
(2) 负链RNA病毒的复制 流感病毒、副流感病毒、狂犬病毒和腮腺炎病毒等有囊膜病毒属于这一范畴。病毒体中含有RNA的RNA聚合酶，从侵入链转录出mRNA，翻译出病毒结构蛋白和酶，同时又可做为模板，在依赖RNA的RNA聚合酶作用下合成子代负链RNA。
(3) 逆转录病毒（Retrovirus）复制过程 分二个阶段：第一阶段，病毒核时进入胞浆后，以RNA为模板，在依赖RNA的DNA多聚酶和tRNA引物的作用下，合成负链DNA（即RNA：DNA），正链RNA被降解，进而以负链DNA为模板形成双股DNA（即DNA：DNA），转入细胞核内，整合成宿主DNA中，成为前病毒。第二阶段，前病毒DNA转录出病毒mRNA，翻译出病毒蛋白质。同样从前病毒DNA转录出病毒RNA，在胞浆内装配，以出芽方式释放。被感染的细胞仍持续分裂将前病毒传递至子代细胞。
(五) 装配与释放:
DNA病毒 (多数核内装配)；RNA病毒(多数胞浆内装配)
包膜病毒 (出芽释放)；无包膜病毒(破胞释放)
新合成的病毒核酸和病毒结构蛋白在感染细胞内组合成病毒颗粒的过程称为装配（Assembly），而从细胞内转移到细胞外的过程为释放(Release)。大多数DNA病毒，在核内复制DNA，在胞浆内合成蛋白质，转入核内装配成熟。而痘苗病毒其全部成份及装配均在胞浆内完成。RNA病毒多在胞浆内复制核酸及合成蛋白。感染后6个小时，一个细胞可产生多达10，000个病毒颗粒。
病毒装配成熟后释放的方式有：（1）宿主细胞裂解，病毒释放到周围环境中，见于无囊膜病毒，如腺病毒、脊髓灰质炎病毒等；（2）以出芽的方式释放，见于有囊膜病毒，如疱疹病毒在核膜上获得囊膜，流感病毒在细胞膜上获得囊膜而成熟，然后以出芽方式释放出成熟病毒。也可通过细胞间桥或细胞融合邻近的细胞。
吸附（Adsorption）是指病毒附着于敏感细胞的表面，它是感染的起始期。细胞与病毒相互作用最初是偶然碰撞和静电作用，这是可逆的联结。随后的特异性吸附是非常重要的，根据这一点可确定许多病毒的宿主范围，不吸附就不能引起感染。
脊髓灰质炎病毒的细胞表面受体是免疫球蛋白超家族，在非灵长类细胞上没有发现此受体，而猴肾细胞、 Hela细胞和人二倍体纤维母细胞上有它的受体，故脊髓来质炎病毒能感染人体鼻、咽、肠和脊髓前角细胞，引起脊髓灰质炎（小儿麻痹）。
水磨石病毒的细胞表面受体是含唾液酸（N-乙酰神经氨酸）的糖蛋白，它与流感病毒表面的血凝素剌突（受体连结蛋白）有特殊的亲和力，如用神经氨酸酶破坏该受体，则流感病毒不再吸附这种细胞。
此外，HIV受体为CD4；鼻病毒的受体为细胞粘附分子-1（1CAM-1）；EB病毒的受体为补体受体-2（CR-2）。病毒吸附也受离子强度、pH、温度等环境条件的影响。研究病毒的吸附过程对了解受体组成、功能、致病机理以及探讨抗病毒治疗有重要意义。
（二）穿入(penetration):膜融合；病毒胞饮等
穿入（Penetration）是指病毒核酸或感染性核衣壳穿过细胞进入胞浆，开始病毒感染的细胞内期。
主要有三种方式：（1）融合 (Fusion)，在细胞膜表面病毒囊膜与细胞膜融合，病毒的核衣壳进入胞浆。副粘病毒以融合方式进入，如麻疹病毒、腮腺炎病毒囊膜上有融合蛋白，带有一段疏水氨基酸，介导细胞膜与病毒囊膜的融合。（2）胞饮 (Viropexis)，由于细胞膜内陷整个病毒被吞饮入胞内形成囊泡。胞饮是病毒穿入的常见方式，也是哺乳动物细胞本身具有一种摄取各种营养物质和激素的方式。当病毒与受体结合后，在细胞膜的特殊区域与病毒病毒一起内陷形成膜性囊泡，此时病毒在胞浆中仍被胞膜覆盖。某些囊膜病毒，如流感病毒借助病毒的血凝素（HA）完成脂膜间的融合，囊泡内低Ph环境使HA蛋白的三维结构发生变化，从而介导病毒囊膜与囊泡膜的融合，病毒核衣壳进入胞浆。（3）直接进入，某些无囊膜病毒，如脊髓灰质炎病毒与受体接角后，衣壳蛋白的多肽构形发生变化并对蛋白水解酶敏感，病毒核酸可直接穿越细胞膜到细胞浆中，而大部分蛋白衣壳仍留在胞膜外，这种进入的方式较为少见。
（三）脱壳(uncoating):细胞溶酶体酶； 病毒脱壳酶
穿入和脱壳是边续的过程，失去病毒体的完整性被称为“脱壳 (Uncoating)”。脱壳到出现新的感染病毒之间叫“隐蔽期”。经胞饮进入细胞的病毒，衣壳可被吞噬体中的溶酶体酶降解而去除。有的病毒，如脊髓灰质炎病毒，在吸附穿入细胞的过程中病毒的RNA释放到胞浆中。而痘苗病毒当其复杂的核心结构进入胞浆中后，随之病毒体多聚酶活化，合成病毒脱壳所需要的酶，完成脱壳。
（四）生物合成(biosynthesis):病毒核酸复制； 病毒蛋白质合成
DNA病毒和RNA病毒在复制机理有区别，但复制的结果都是合成核酸分子和蛋白质衣壳，然后装配成新的有感染性的病毒。一个复制周期大约需6～8小时。
1. 双股DNA病毒的复制----多数DNA病毒为双股DNA。
双股DNA病毒，如单纯疹病毒和腺病毒在宿主细胞核内的RNA聚合酶作用下，从病毒DNA上转录病毒mRNA，然后转移到胞浆核糖体上，指导合成蛋白质。
1) 病毒基因的mRNA转录（早期转录）: 病毒本身含有RNA聚合酶，可在胞浆中转录mRNA。mRNA有二种：早期m RNA，主要合成复制病毒DNA所需的酶及调控蛋白等，如依赖DNA的DNA聚合酶，脱氧胸腺嘧啶激酶等，称为早期蛋白；
2）病毒核酸复制：子代病毒DNA的合成是以亲代DNA为模板，按核酸半保留形式复制子代双股DNA。DNA复制出现在结构蛋白合成之前。
3）晚期转录: 晚期mRNA和晚期翻译:晚期蛋白 --- 衣壳蛋白, 包膜蛋白
晚期mRNA ，在病毒DNA复制之后出现，主要指导合成病毒的结构蛋白，称为晚期蛋白。
2. 单股RNA病毒的复制----RNA病毒核酸多为单股，病毒全部遗传信息均含在RNA中。
又可分为：
病毒RNA的碱基序列与mRNA完全相同者，称为正链RNA病毒。
病毒RNA碱基序列与mRNA互补者，称为负链RNA病毒。
逆转录病毒又称RNA肿瘤病毒 (Oncornavirus) ，病毒体含有单股正链RNA、依赖RNA的DNA多聚酶（逆转录酶）和 tRNA。
(1) 正链RNA病毒的复制 以脊髓灰质炎病毒为例，侵入的RNA直接附着于宿主细胞核糖体上，翻译出大分子蛋白，并迅速被蛋白水解酶降解为结构蛋白和非结构蛋白，如依赖RNA的RNA聚合酶。在这种酶的作用下，以亲代RNA为模板形成一双链结构，称“复制型（Replicative form）”。再从互补的负链复制出多股子代正链RNA，这种由一条完整的负链和正在生长中的多股正链组成的结构，秒“复制中间体(Replicative intermediate) ”。新的子代RNA分子在复制环中有三种功能：为进一步合成复制型起模板作用；继续起mRNA作用；构成感染性病毒RNA。
(2) 负链RNA病毒的复制 流感病毒、副流感病毒、狂犬病毒和腮腺炎病毒等有囊膜病毒属于这一范畴。病毒体中含有RNA的RNA聚合酶，从侵入链转录出mRNA，翻译出病毒结构蛋白和酶，同时又可做为模板，在依赖RNA的RNA聚合酶作用下合成子代负链RNA。
(3) 逆转录病毒（Retrovirus）复制过程 分二个阶段：第一阶段，病毒核时进入胞浆后，以RNA为模板，在依赖RNA的DNA多聚酶和tRNA引物的作用下，合成负链DNA（即RNA：DNA），正链RNA被降解，进而以负链DNA为模板形成双股DNA（即DNA：DNA），转入细胞核内，整合成宿主DNA中，成为前病毒。第二阶段，前病毒DNA转录出病毒mRNA，翻译出病毒蛋白质。同样从前病毒DNA转录出病毒RNA，在胞浆内装配，以出芽方式释放。被感染的细胞仍持续分裂将前病毒传递至子代细胞。
(五) 装配与释放:
DNA病毒 (多数核内装配)；RNA病毒(多数胞浆内装配)
包膜病毒 (出芽释放)；无包膜病毒(破胞释放)
新合成的病毒核酸和病毒结构蛋白在感染细胞内组合成病毒颗粒的过程称为装配（Assembly），而从细胞内转移到细胞外的过程为释放(Release)。大多数DNA病毒，在核内复制DNA，在胞浆内合成蛋白质，转入核内装配成熟。而痘苗病毒其全部成份及装配均在胞浆内完成。RNA病毒多在胞浆内复制核酸及合成蛋白。感染后6个小时，一个细胞可产生多达10，000个病毒颗粒。
病毒装配成熟后释放的方式有：（1）宿主细胞裂解，病毒释放到周围环境中，见于无囊膜病毒，如腺病毒、脊髓灰质炎病毒等；（2）以出芽的方式释放，见于有囊膜病毒，如疱疹病毒在核膜上获得囊膜，流感病毒在细胞膜上获得囊膜而成熟，然后以出芽方式释放出成熟病毒。也可通过细胞间桥或细胞融合邻近的细胞。
G060501一步法快速克隆试剂盒中文说明书 123
叼炸天的ueo2017-11-07
逆转录酶需要_完美作业网_www.wanmeila.com123
Shine_former2021-09-08
病毒DNA注入宿主细胞所需酶类都DNA指导利用宿主细胞原料合
丁香客/whsky:病毒蚀斑克隆出现问题求助 采用6孔板接毒后,铺上低...123
whsky2013-09-30
采用6孔板接毒后，铺上低溶解度琼脂糖，第二天就出来了这些病变，正常细胞没有出现这种现象。
按说空斑应该出现多个，但我的六孔板中一个空最多也就出现了2个空斑，也不像文献报道的那样规则，而且很大！
由于没有做梯度稀释，会不会是接毒量过大造成的啊？请大侠指点，万分感谢！
为什么HIV要逆转录成DNA再表达?123
小汐生日快乐帿2021-08-18
三类,使自身Rna注入体细胞、调控蛋白.T细胞浆细胞能细菌暴露或泌抗体使细菌形沉淀进吞噬细胞消化结构蛋白.2-9控制前病毒表达每条RNA约9LTR间序列编码至少9蛋白,通逆转录酶逆转录DNA. HIV特异性染效应T细胞、二道放线已经灭. 病毒基组两条相同链RNA,注入自身RNA才能激逆转录程含顺式调控序列, LTR）两端末端重复序列（long terminal repeats,复制再转录指导合蛋白质. HIV逆转录通侵入效应T细胞.8kb淋巴细胞能直接杀死细菌.细菌能第,直接杀死细菌吞噬细胞已证明LTR启增强并含负调控区. 效应T细胞通激染细胞内溶酶体释放水解酶使细胞裂解
筛选蛋白质结晶条件的试剂盒研发进展123
抗pH汕唬2017-11-10
才能判断试剂盒筛蛋白晶体
您线粒体蛋白提取试剂盒产品特点：1.离吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜柱与柱间吸附量差异极重复性克服产试剂盒膜质量稳定弊端
2.使用优质溶胶液含传统溶胶液碘化钠高氯酸盐抑制收酶切、连接克隆等游反应
3.独特溶胶液/结合液配溶胶结合两种功能统试剂盒运用于琼脂糖DNA收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化收等种情况节省需购买种试剂盒费用
4.溶胶液/结合液调制黄颜色便于观察溶胶效监测pH值变化达佳结合效提高收效率
5.改进溶胶液配,提高缓冲能力稳定性即使品变化能PH缓冲佳结合范围内
6.快速、便需要使用毒苯酚、氯仿等试剂需要乙醇沉淀.
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3.独特溶胶液/结合液配溶胶结合两种功能统试剂盒运用于琼脂糖DNA收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化收等种情况节省需购买种试剂盒费用
4.溶胶液/结合液调制黄颜色便于观察溶胶效监测pH值变化达佳结合效提高收效率
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