
Eachkitcontains20individual10-merprimers(suppliedataminimumamountof50nmoleperprimer).TheseprimersaresuitableforuseingeneticmappingandDNAfingerprinting.IntheRAPDtechnique,asingle10merofarbitrarysequenceisusedasaprimerinPCRtoamplifygenomicDNAwherethesequenceoftheDNAiscompletelyunknown.GenomicDNAfromdifferentindividualsgivesdifferentPCRproducts,allowingtheidentificationofDNApolymorphismsthatcanbeusedtoidentifydifferentindividualsorasgeneticMarkers.|ThenumberofPCRproductsgeneratedfromeachgenomicDNAsampledependsontheprimersequence,thegenomicDNAsequence,andthegenomesize.Assumingthattheprimingsitesofa10merRAPDprimerarerandomlydistributedthroughoutagenome,thetheoreticalnumberofPCRproductsisapproximately2.5x10e9xG,whereGisthesizeofthehaploidgenomeinbasepairs.Usingthiscalculation,ahaploidgenomeof2x10e9bp,forexample,isexpectedtogiveabout5PCRproducts.Thispredictionisincloseagreementwithexperimentalresults.
References
1.Grundmann,Towner,Dijkshoorn,Gerner-Smidt,Maher,Seifert,Vaneechoutte.MulticenterstudyusingstandardizedprotocolsandreagentsforevaluationofreproducibilityafPCR-basedfingerprintingofAcinetobacterspp.J.Clin.MicroBIOLOGy35(12):3071-3077(1997).2.Berg,D.,etal.,MethodsinMolecularandCellularBiology5:13-24(1994).3.Welsh,J.,McClelland,M.,FingerprintinggenomesusingPCRwitharbitraryprimers.NucleicAcidsRes.18(24):7213-7218(1990).4.Williams,J.G.,Kubelik,A.R.,Livak,K.J.,Rafalski,J.A.,Tingey,S.V.,DNApolymorphismsamplifiedbyarbitraryprimersareusefulasgeneticmarkers.NucleicAcidsResearch18:6531-6535(1990).5.Micheli,M.,etal.(1997).InFingerprintingMethodsBasedonArbitrarilyPrimedPCR,pp.55-63.Springer-VerlagPress,NY.6.Graves,L.,Swaminathan,B.(1993).InDiagnosticMolecularMicrobiologyPrinciplesandApplications,pp.617-621.ASMPress,Washington,DC.USBIo全称United States BIOLOGical,位于麻省斯万普斯科特(Swampscott, MA)。全美**的抗原抗体和生化试剂供应商,目前向全球六十余个国家的科研工作者提供约50,000种抗体、抗原和生化试剂,以质量**闻名。主要产品种类包括:抗体、生化试剂、基因克隆相关产品、培养基、生长因子等细胞因子、分子生物学试剂。美国US Biological公司是生物化学和生物学试剂的专业生产商,产品服务于免疫学,分子生物学,分子遗传学,体外诊断,组织培养等科研领域。产品精确度高,质量稳定,产品数量巨大,提供70,000多种抗体、抗原和生化试剂等。
Usbio的生物化学品,抗体,重组蛋白,细胞培养基和分子生物学试剂盒几乎用于所有科学应用和环境,包括基因组研究,生物技术,药物开发和疾病诊断。USBio产品从经济实惠的研究数量到更大的批量可用于工艺开发和生产。我们的客户包括位于美国和国外的大多数*的制药和生物技术公司。
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USBio(UnitedStatesBiological,或简称USBiological)位于麻省斯万普斯科特(Swampscott,MA)。作为全美最大的抗原抗体和生化试剂供应商,USBiological目前向全球六十余个国家的科研工作者提供约150,000种抗体、抗原和生化试剂,以质量卓越闻名。主要产品种类包括:抗体、生化试剂、基因克隆相关产品、培养基、生长因子等细胞因子、分子生物学试剂。美国USBiological的产品服务于免疫学,分子生物学,分子遗传学,体外诊断,组织培养等科研领域。USBiological一直恪守“为您的研究减少成本”原则,提供高纯度、高品质的产品,并在大多数生化试剂、生物与培养基产品线上保持最高的性价比。USBiological的产品被广泛用于各种科学研究领域,包括基因组研究、生物技术、药物研发和疾病诊断等。USBiological的产品从小型科研级到生物制品大规模级规格均有提供。众多全球顶ji的生物制药和生物技术公司都在使用USBiological的高品质产品。
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保存条件: 受态细胞要严格-70℃冰存SOC培养基置于2-8℃保存其余试剂于-20℃保存避免反复冻融
般基克隆物体直接取基包括面几步骤
提取植物或者物基组DNA(试剂盒)————做PCR需要基扩增(顺利2搞定)——扩增基做酶切——基连接想插入载体面(顺利1-2)——鉴定克隆基
步骤都商品化试剂或者试剂盒 要思路清晰做起快 1-2周能完
量水用精细般瓶装乙醚即
第十二条物制品产环境空气洁净度级别应与产品产操作相适应厂房与设施应原料、间体品造污染
第十三条产程涉及高危操作其空气净化系统等设施应符合特殊要求
第十四条物制品产操作应符合表规定相应级别洁净区内进行未列操作参照表适级别洁净区内进行:
洁净度级别
物制品产操作示例
B级背景局部A级
附录菌药品非终灭菌产品规定各工序
灌装前经除菌滤制品其配制、合并等
C级
体外免疫诊断试剂阳性血清装、抗原与抗体装
D级
原料血浆合并、组离、装前巴氏消毒
口服制剂其发酵培养密闭系统环境(暴露部需菌操作)
酶联免疫吸附试剂等体外免疫试剂配液、装、干燥、内包装
第十五条产程使用某些特定物体阶段应根据产品特性设备情况采取相应预防交叉污染措施使用专用厂房设备、阶段性产式、使用密闭系统等
第十六条灭疫苗(包括基重组疫苗)、类毒素细菌提取物等产品灭交替使用同灌装间灌装、冻干设施每装应采取充污染措施必要应进行灭菌清洗
第十七条卡介苗结核菌素产厂房必须与其制品产厂房严格产涉及物产设备应专用
第十八条致病性芽胞菌操作直至灭程完前应使用专用设施炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌破伤风梭状芽胞杆菌制品须相应专用设施内产
第十九条其种类芽孢菌产品某设施或套设施期轮换产芽胞菌制品任何间能产种产品
第二十条使用密闭系统进行物发酵同区域同产单克隆抗体重组DNA制品
第二十条菌制剂产加工区域应符合洁净度级别要求并保持相压;操作致病作用微物应专门区域内进行并保持相负压;采用菌工艺处理病原体负压区或物安全柜其周围环境应相压洁净区
第二十二条菌(毒)操作区应独立空气净化系统自病原体操作区空气循环使用;自危险度二类病原体操作区空气应通除菌滤器排放滤器性能应定期检查
第二十三条用于加工处理物体产操作区设备应便于清洁污染清洁污染效性应经验证
第二十四条用于物体培养设备应能够防止培养物受外源污染
第二十五条管道系统、阀门呼吸滤器应便于清洁灭菌宜采用线清洁、线灭菌系统密闭容器(发酵罐)阀门应能用蒸汽灭菌呼吸滤器应疏水性材质且使用效期应经验证
第二十六条应定期确认涉及菌毒种或产品直接暴露隔离、封闭系统泄漏风险
第二十七条产程病原体污染物品设备应与未使用灭菌物品设备并明显标志
第二十八条产程需要称量某些添加剂或(缓冲液)产区域存放少量物料
第二十九条洁净区内设置冷库恒温室应采取效隔离防止污染措施避免产区造污染
面GMP附录3要求关键看体外试剂哪类般没问题
1.相同房间产段产
2.同房间产且使用同空调系统
GenomeWalkerTM Universal Kit价格多少,哪里有卖的?