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ScyTek/MART-1; Clone M2-7C10 (Ready-To-Use)/25 ml/A00115-0025
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Species:MouseClone:M2-7C10Isotype:Mouse IgG2b, KappaSpecies Reactivity:Human.Clone M2-7C10 does not react with mouse or rat.Positive Control:Metastatic melanoma in lymph nodes.Specificity:The clone M2-7C10 MART-1 antibody labels melanomas and other tumors showing melanocyte differentiation.
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2021-09-03
PCR是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法。其特异性是由两个人工合成的引物序列决定的。所谓引物就是与待扩增DNA片段两翼互补的寡聚核苷酸，其本质是ssDNA片段。待扩增DNA模版加热变性后，两引物分别与两条DNA的两翼序列特异复性。此时，两引物的3'端相对，5'向背。在合适的条件下，由Taq DNA聚合酶催化引物引导的DNA合成，既引物的延伸。上述过程是由温度控制。这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环。PCR就是在合适条件下的这种循环的不断重复。理论上扩增产物量成指数上升，既n个循环后， 查看更多
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2021-08-17
对应于 mRNA 的 DNA 序列，可以被回收、克隆、测序，可以用作杂交或筛库的探针。 查看更多
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2018-12-26
Construction of homemade "T-vectors"This method is after Marchuk, D., et al., 1991, Nucl. Acids Res. 19(5), pp 1154. You will need: 10 x Taq buffer (Promega)Ta 查看更多
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2021-08-09
随着转基因农作物的大量种植，其安全性问题也日益受到人们的重视。2002年我国要求对转基因农作物实行标签管理。抗草甘膦（glyphosate）大豆 （商品名，roundup ready soybean）是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。它是目前使用最广的转基因作物之一，每年至少有 800万吨转基因大豆进入我国市场。因此，研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。目前采用PCR检测转基因大豆的方法大多是采用琼脂糖 查看更多
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2021-09-11
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-07-14
在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因，用体外重组方法将它们插入克隆载体，形成重组克隆载体，通过转化与转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩... 查看更多
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2021-07-25
重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR，简称SOE PCR）由于采用具有互补末端的引物，使PCR产物形成了重叠链，从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸，将不同来源的扩增片段重叠拼接起来。 查看更多
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2021-08-31
本方案基于一种 DNA 测序反应，该反应测定紧邻测序引物（在方案中称为 SNP 引物）3'端的一个碱基的性质。SNP 引物设计成可以紧邻于待分型 DNA 的多态位点上游夏性。当目的 DNA 和合适的经染料标记的终止分子（terminator) 以及 DNA 聚合酶温育时，在多态位点出现的等位碱基的互补碱基使 SNP 引物延伸。通过检测组装的终止分子类别，就能推知目的 DNA 上出现的等位碱基 查看更多
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2021-09-20
本方案设计为 24 个 PCR 反应，使用 3 种 cDNA 亚群（利用方案 3 中的 H-T11M 引物进行 RT 反应），引物为荧光染料标记的锚定引物（FH-T11M) 与 24 种上游任意引物 (HAP) 的组合。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2018-12-26
生化方法l 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞1. 转染前24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%～7% CO2的37℃温箱孵育20～24 h。转染前1 h换液。2. 按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀：于5 ml 查看更多
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2018-11-27
OZ Biosciences公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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对于高通量的筛选，推荐使用几个热循环仪厂家提供的 96 孔或 384 孔 PCR 板，或者使用单个的管子。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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知道一个基因的cDNA序列如何获得这个基因的基因组序列呢 分子...123
人生漫漫路遥长2021-08-03
本实乃菜鸟若问题问清楚请指点
克隆基因总克隆不出,为什么 123
鬼鬼令尊丶囧傤2017-11-01
高等物基组克隆完整基 真核物与原核物启同且真核物基通间隔基即外显内含相间排列真核物完整基直接转入肠杆菌没用相应启能启mRNA转录且内含能确剪切
基因克隆的流程 实验方法123
罪恶王冠4dN2017-11-07
选择目基,并设计相应引物；
用引物PCR扩增目基片段；
选择合适（抗性标记、酶切位点等）克隆载体（保真扩增）,并PCR片段连接入克隆载体；（般用Taq酶PCR产物末尾自带A,Solution 1作用与两端各带T线性T载体直接相连）
连接产物转化入受态肠杆菌,使含抗素培养基扩增；
肠杆菌提取质粒（即前面连接产物）,酶切鉴定测序鉴定均误目基片段切并与新表达载体连接,再转化入肠杆菌扩增,再提质粒,即想要目基片段克隆.
用引物PCR扩增目基片段；
选择合适（抗性标记、酶切位点等）克隆载体（保真扩增）,并PCR片段连接入克隆载体；（般用Taq酶PCR产物末尾自带A,Solution 1作用与两端各带T线性T载体直接相连）
连接产物转化入受态肠杆菌,使含抗素培养基扩增；
肠杆菌提取质粒（即前面连接产物）,酶切鉴定测序鉴定均误目基片段切并与新表达载体连接,再转化入肠杆菌扩增,再提质粒,即想要目基片段克隆.
第6章目的基因的分离克隆(植物基因工程)123
风音28082021-08-17
离目基
物芯片高密度固定固相支持介质物信息微列阵列阵每序列及位置都已知并按预先设定顺序点阵基芯片物芯片种其固定核算类物质主要用于DNA、RNA析DNA芯片微点阵两种
离目基指基组发现或找某目（标）基目前通①比较同物种间或同物种同体间；或同体同发育期或同环境条件基差异表达（基表达平行析）实现采用基芯片技术进行基差异表达研究通杂交直接检测细胞mRNA种类及丰度与传统差异显示相比具品用量自化程度高检测目标DNA密度及并行种类等优点②利用同源探针cDNA或EST微列阵筛选离目基目前DNA 芯片、cDNA芯片两种其基本步骤包括：基芯片制备、靶品制备、杂交与检测、目基离并获全
2 基文库技术离目基
基文库指某物类型全部基集合种集合重组体形式现某物DNA片段群体与载体重组重组转化宿主细胞转化细胞选择培养基单菌落（或噬菌斑或细胞）即DNA片段克隆全部DNA片段克隆集合体即该物基文库其类型基组文库与cDNA文库、克隆文库与表达文库按载体智力文库、噬菌体文库、黏粒载体文库、工染色体文库等基文库构建文库筛选基主要几种：核算杂交、免疫检测、DNA同胞选择、PCR筛选等基文库构建目前基工程核工作离目进用
3 功能蛋白组离目基
蛋白组指细胞内全部蛋白存及式即基组表达产总蛋白质统称功能蛋白质组指些能涉及特定功能机理蛋白质群体主要研究蛋白质双向电泳通高效液相色谱、质普蛋白质序列进行析借用物手段则进行目基离：应用PCR进行离目基：通蛋白质序列析通密码简并性设计简并引物利用RT-PCR 目基全；应用核算杂交筛选离目基：即利用简并寡核苷酸探针筛选cDNA或基组文库；免疫雪筛选离目基：通蛋白特异抗体与目蛋白专结合表达文库离目基蛋白基
4 PCR技术基克隆应用
PCR技术已经渗透物各领域克隆获cDNA全面起着重要作用利用 PCR技术特定条件基表达进行检测即通mRNA差别显示（DDRT-PCR）鉴定离所需目基；通RT-PCR克隆目基 cDNA区域进行cDNA文库构建通锚定PCR或反向PCR快速克隆cDNA末端未知序列、功能基调控区等现用于基离克隆 PCR主要：RT-PCRDDRT-PCR用于cDNA末端快速克隆RACE（第3节）用于DNA序列克隆Panhankle- PCR、Cassette-PCR及减cDNA文库PCR构建等Panhankle-PCR、Cassette-PCR基组已知DNA相临未知序列克隆奠定良基础
5 mRNA差别显示技术离差别表达基
mRNA差异显示技术组织特异性表达基进行离种快速行效mRNA反转录与PCR技术结合发展起种RNA指纹图谱技术利用5’锚定引物oligo（dT）12MN3’端随机引物总mRNA进行PCR扩增期差异表达条带并其差异显示条带进行收、克隆
6 插入突变离克隆目基
获突变体进行未知基克隆用举T-DNA标签转座诱变离克隆目基例T-DNA标签T-DNA任何兴趣基处产插入性突变获析该基功能照突变体T-DNA左右边界间携带外源报告基片段作选择性遗传标记插入序列已知获转基重组突变体通各种克隆PCR策略加研究倘若35S强启T-DNA整合宿主基组整合内原基游则产异增加或表达空特异性改变破坏基表达效获性突变功能丧失性突变等转座标签株携带功能性转座系统植物与遗传差异同种植物杂交转座插入某特定基序列破坏该基编码蛋白进导致见表性破坏或改变产代筛选新型突变体
物芯片高密度固定固相支持介质物信息微列阵列阵每序列及位置都已知并按预先设定顺序点阵基芯片物芯片种其固定核算类物质主要用于DNA、RNA析DNA芯片微点阵两种
离目基指基组发现或找某目（标）基目前通①比较同物种间或同物种同体间；或同体同发育期或同环境条件基差异表达（基表达平行析）实现采用基芯片技术进行基差异表达研究通杂交直接检测细胞mRNA种类及丰度与传统差异显示相比具品用量自化程度高检测目标DNA密度及并行种类等优点②利用同源探针cDNA或EST微列阵筛选离目基目前DNA 芯片、cDNA芯片两种其基本步骤包括：基芯片制备、靶品制备、杂交与检测、目基离并获全
2 基文库技术离目基
基文库指某物类型全部基集合种集合重组体形式现某物DNA片段群体与载体重组重组转化宿主细胞转化细胞选择培养基单菌落（或噬菌斑或细胞）即DNA片段克隆全部DNA片段克隆集合体即该物基文库其类型基组文库与cDNA文库、克隆文库与表达文库按载体智力文库、噬菌体文库、黏粒载体文库、工染色体文库等基文库构建文库筛选基主要几种：核算杂交、免疫检测、DNA同胞选择、PCR筛选等基文库构建目前基工程核工作离目进用
3 功能蛋白组离目基
蛋白组指细胞内全部蛋白存及式即基组表达产总蛋白质统称功能蛋白质组指些能涉及特定功能机理蛋白质群体主要研究蛋白质双向电泳通高效液相色谱、质普蛋白质序列进行析借用物手段则进行目基离：应用PCR进行离目基：通蛋白质序列析通密码简并性设计简并引物利用RT-PCR 目基全；应用核算杂交筛选离目基：即利用简并寡核苷酸探针筛选cDNA或基组文库；免疫雪筛选离目基：通蛋白特异抗体与目蛋白专结合表达文库离目基蛋白基
4 PCR技术基克隆应用
PCR技术已经渗透物各领域克隆获cDNA全面起着重要作用利用 PCR技术特定条件基表达进行检测即通mRNA差别显示（DDRT-PCR）鉴定离所需目基；通RT-PCR克隆目基 cDNA区域进行cDNA文库构建通锚定PCR或反向PCR快速克隆cDNA末端未知序列、功能基调控区等现用于基离克隆 PCR主要：RT-PCRDDRT-PCR用于cDNA末端快速克隆RACE（第3节）用于DNA序列克隆Panhankle- PCR、Cassette-PCR及减cDNA文库PCR构建等Panhankle-PCR、Cassette-PCR基组已知DNA相临未知序列克隆奠定良基础
5 mRNA差别显示技术离差别表达基
mRNA差异显示技术组织特异性表达基进行离种快速行效mRNA反转录与PCR技术结合发展起种RNA指纹图谱技术利用5’锚定引物oligo（dT）12MN3’端随机引物总mRNA进行PCR扩增期差异表达条带并其差异显示条带进行收、克隆
6 插入突变离克隆目基
获突变体进行未知基克隆用举T-DNA标签转座诱变离克隆目基例T-DNA标签T-DNA任何兴趣基处产插入性突变获析该基功能照突变体T-DNA左右边界间携带外源报告基片段作选择性遗传标记插入序列已知获转基重组突变体通各种克隆PCR策略加研究倘若35S强启T-DNA整合宿主基组整合内原基游则产异增加或表达空特异性改变破坏基表达效获性突变功能丧失性突变等转座标签株携带功能性转座系统植物与遗传差异同种植物杂交转座插入某特定基序列破坏该基编码蛋白进导致见表性破坏或改变产代筛选新型突变体
乙型脑炎减毒活疫苗株全长感染性克隆的构建及表达外源基因的初步研...123
hubing007hb2011-09-03
各位大侠：
大家好，小弟最近做做乙脑病毒（JEV）全长感染性克隆，实验遇到一些问题，希望得到园子里面高手的指点。乙脑为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约为11kb，小弟以takarapMD19-TsimpleT载体（该载体来源PUC载体系列，含有PUCori，2700bp）为模板，为了克隆乙脑全长CDNA，将JEV全长基因组分四段进行RT-PCR扩增，得到JEV-A（2.2kb）,JEV-B（3.5kb）,JEV-C（3.3kb）,JEV-D（1.9kb）四个片段，JEV-***段5.端加上了T7启动子为后面进行体外转录用，在克隆前对宝生物的pMD19-TsimpleT载体进行了改造，连了一段linker序列（500bp左右），该序列中含有克隆JEV四段序列的单一酶切位点（克隆过程中的酶切位点均为常见酶，排除未切开的可能性，而且每次酶切均发现有小片段被切下）。采用分四段分部克隆的策略将乙脑病毒全长基因组连上改造后的载体。JEV-A很顺利一次连上，再连JEV-D也很顺利也一次连上，再连JEV-C，连了很多次，用了TAKARAT4，solutionI和NEB的连接酶均为能连上，也调整了DNA和载体的比例均未能连上，是不是PUC系列载体容量有限，装不下太大的片段，载体上连上的片段加起来越大了往上面再连就越困难。问了宝生物的客服说PUC载体最大能容下18kb的片段。之前也将JEV基因组分两段进行克隆，每段5000多bp，连了很多次一段都没连上去，故将全长DNA分四段，想每次往上面连一部分，每连上一段载体相当于变成了一个新载体，载体大小也变大了，能插入的片段也会相应变大。另外，实验室另一个学生拿pbluescriptsk载体（3.0kb）来连，采用类似的克隆策略均为连上，大家觉得是什么原因，是不是得换载体，换大载体，我查了很多别人也有拿pbluescriptsk载体建其他病毒感染性克隆的也能连上（都是连10kb以上的片段），到底是哪个环节出问题已经做了一个暑假2个多月均未得到克隆，急死了，请大家给点高见。
大家好，小弟最近做做乙脑病毒（JEV）全长感染性克隆，实验遇到一些问题，希望得到园子里面高手的指点。乙脑为单股正链RNA病毒，病毒基因组全长约为11kb，小弟以takarapMD19-TsimpleT载体（该载体来源PUC载体系列，含有PUCori，2700bp）为模板，为了克隆乙脑全长CDNA，将JEV全长基因组分四段进行RT-PCR扩增，得到JEV-A（2.2kb）,JEV-B（3.5kb）,JEV-C（3.3kb）,JEV-D（1.9kb）四个片段，JEV-***段5.端加上了T7启动子为后面进行体外转录用，在克隆前对宝生物的pMD19-TsimpleT载体进行了改造，连了一段linker序列（500bp左右），该序列中含有克隆JEV四段序列的单一酶切位点（克隆过程中的酶切位点均为常见酶，排除未切开的可能性，而且每次酶切均发现有小片段被切下）。采用分四段分部克隆的策略将乙脑病毒全长基因组连上改造后的载体。JEV-A很顺利一次连上，再连JEV-D也很顺利也一次连上，再连JEV-C，连了很多次，用了TAKARAT4，solutionI和NEB的连接酶均为能连上，也调整了DNA和载体的比例均未能连上，是不是PUC系列载体容量有限，装不下太大的片段，载体上连上的片段加起来越大了往上面再连就越困难。问了宝生物的客服说PUC载体最大能容下18kb的片段。之前也将JEV基因组分两段进行克隆，每段5000多bp，连了很多次一段都没连上去，故将全长DNA分四段，想每次往上面连一部分，每连上一段载体相当于变成了一个新载体，载体大小也变大了，能插入的片段也会相应变大。另外，实验室另一个学生拿pbluescriptsk载体（3.0kb）来连，采用类似的克隆策略均为连上，大家觉得是什么原因，是不是得换载体，换大载体，我查了很多别人也有拿pbluescriptsk载体建其他病毒感染性克隆的也能连上（都是连10kb以上的片段），到底是哪个环节出问题已经做了一个暑假2个多月均未得到克隆，急死了，请大家给点高见。
基因克隆的几种常见方法 123
sunny1s52021-08-25
工复制基
DNA分子克隆技术(也称基因克隆技术)123
2021-07-30
指外源DNA插入运载体,转入细菌等微物胞扩增几百万倍程.
【求助/交流】大家知不知道哪个公司可以做拓扑异构酶活性的测试...123
zhang19822008-10-15
请问哪位行家知道拓扑异构酶怎么做免疫组化，有哪些技术和方法？
DNA拓扑异构酶概述123
0864181662017-11-07
依托泊苷，抑制有丝分裂，属于细胞周期特异性药物，使细胞分裂停止于S期或G2期，此方案应先用VP-16，后顺铂:VP-16的作用靶点是DNA拓扑异构酶Ⅱ。顺铂属于细胞周期非特异性药物
苏州大学医学院到底怎么样123
wjy_09122021-09-03
最近克隆了一个基因，想对其进行染色体定位，由于种种原因，自己实验室难以尽快完成实验。浙大有几位高年级师兄师姐都是到苏州做的，我想联系苏州大学医学院同行，帮助提供点负责人联系信息，本人将感激不尽！先谢了。
我的信箱：wjy_0912@hotmail.com
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请教高手:克隆基因的步骤 123
大脑2021-08-12
我刚考上硕士，导师就让我克隆一个基因，可我啥也不会，怎么办？
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列，导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办？
听导师说，可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我？
感激不尽啊！
我已经知道了这个基因在其他物种中的序列和它所编码的蛋白质的序列，导师的意思是让我把它在大豆中克隆出来。我该怎么办？
听导师说，可能要用到RT-PCR。谁能帮帮我？
感激不尽啊！
急急急急急急！！！克隆基因目的片断大小为180bp左右、可行吗？_...123
xiaoyao03052021-07-31
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