ProductDescription
| Parameter,Testing,andMethod | PureCol®EZGelTypeICollagen#5074 |
| SterilizationMethod | Filtration |
| ExtractionMethod | Enzyme-atelocollagen |
| Form | Solution |
| PackageSize | 35mL |
| StorageTemperature | 2-10°C |
| ShelfLife | Minimumof6monthsfromdateofreceipt |
CollagenConcentration-Biuret | ~5mg/mL |
CollagenPurity-SilverStaining | >99% |
| pH | 6.9-7.4 |
| KineticGelTest(Minutes) | <40 |
| GelFormationTubeTest(Minutes) | <40 |
Fibrillogenesis(AbsorbanceUnits) | >0.5 |
ElectrophoreticPattern-CoomassieBlue | Characteristic |
| Sterility-USPmodified | Nogrowth |
| Endotoxin-LAL | <1.0EU/mL |
| Osmolality(mOsmoH2O/kg) | 300-360 |
| CellAttachmentAssay | Pass |
| Source | BovineHide |
| HydrogelYoung"sModulusE(Pa) | Characteristic |
| MediumSupplement | DMEM/F-12 |
| L-GlutamineSource | MixtureofL-GlutamineandDipeptide(L-alanine-L-glutamine) |
DirectionsforUse
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3-DPreparationProcedure
- RemovePureCol®EZGelfrom2–10°Cstorage.Important:Topreventgelation,maintaintemperatureofproductat2–10°C.
- IntroducePureCol®EZGelintocellculturesystem.CellscanbeaddedtothePureCol®EZGelsolution.
- Toformgel,warmto37°C.Thebeginningofgelationwilloccurwithin40minutes,butallowapproximately90tominutesforfirmgelformation.
ProductQ&A
Theconcentrationrangesfrom5.2-5.5mg/ml.
WecompletedastudytoshowthatDNAiscompletelydestroyedatpH2,anddemonstratedthatourcollagenproductsdonotcontainDNA.
Thecollagenisfullyhydrolyzed.TheaminoacidanalysisisdoneusingtheWatersAccQ-Tagderivatizationmethod.Duringtheacidhydrolysisstep,asparagine(N)isconvertedtoasparticacid(D)andglutamine(Q)isconvertedtoglutamicacid(E).Tryptophan(W),ifpresent,isdestroyedduringacidhydrolysis.Experimentally,onecandeterminethepicomoles(pmol)ofeachaminoacidperinjecteddetectedusingaminoacidstandards.Fortheconcentrationdetermination,thetotalnumberofpmolofeachaminoacidissummedtogetthetotalpmolofthe18aminoacidsdetected.Thetotalpmolaminoacidsisdividedbythetheoreticalnumberofaminoacidresiduesincollagenbasedonthepublishedsequence.Theresultisthepmolofcollageninjected.Theresultisthenmultipliedbythedilutionand300,000isusedasthecollagenmolecularweighttogettomg/mL.Themolecularweightofcollagenisnotwellagreedupon.
Dilutingwith1XPBS(ratherthanwateror0.01NHCl)wouldhaveaneffectforcoatingpurposes.ItwouldchangethepHofthedilutedcollagensolutionfromacidtoneutralpH.ThepHchangewilltransformthecollagenmoleculesfromamolecularformtoafibrillarform;andthenthenatureofcoatingsurfacewillbechangedfromamonomericcoatingtoafibrillarcoating.
WeusethefollowingantibodiesfromSouthernBiotech:
1.1310-02–GoatAnti-TypeICollagen-FITC
2.1310-08–GoatAnti-TypeICollagen-BIOT
3.7100-05–Streptavidin-HRP
ThemajorcollagenmolecularspeciesinourTypeIcollagenproductsaremonomers(approx.70%),buttherearedimers,trimersandafewpercentagesofoligomerstoo(approx.30%)withsomeminoramountsofcollagenfragments.Thecollagenmonomerisarodshapedmoleculewith300nminlengthand1.5nmindiameter.Thedimer,trimerandoligomerare600nm,900nmandevenlongerinlengthrespectively.Accordingtothecoatingprocedures,thecollagenmoleculesareattachedtothechargedpolystyrenesurfacerandomlybychargeoraffinityinacidconditionsduringthe1-2hrsincubationperiodat37°C,andanyunattachedmaterialsareremovedbyaspirationandrinsing.Therefore,thecoatedsurfaceisasinglelayerofcollagenmonomer,dimer,trimerandoligomermixtures.Thethicknessofthemono-molecularlayerisdependentonhowthosemoleculesareattachedonthesurface.Thecoatingdensitythicknesswouldgenerallybecharacterizedasa1moleculethicknesswhichcouldberangingfromafewnanometerstoafewhundrednanometerswiththewholesurfacebeingcoveredbycollagen.
ThenetchargeofTypeIcollagenproducts’(PureCol®,BovineCollagenandVitroCol®,HumanCollagen)moleculeisdirectlyrelatedtothepH.AtanacidicpH,theaminoacids(zwitterions)alongthecollagenmoleculearepositivelycharged,makingtheentirecollagenmoleculepositive.Attheisoelectricpoint(orzone)ofcollagen,aroundpH7-8,theaminoacidsalongthecollagenmoleculearepositivelyandnegativelycharged,makingthenetchargeofthecollagenmoleculeclosetozero.AtabasicpH,theaminoacidsalongthecollagenmoleculewerenegativelycharged,makingtheentirecollagenmoleculenegative.
Further,thenatureofthechargeofthecollagencoatingsurfacewillbedependentonthetypeofcoatingapplied.ForamonomericcollagencoatingswhenthecollagenisappliedunderanacidicpHcondition,thesurfaceispositivelycharged.IfthesurfaceisrinsedwithpHneutralbufferormediathenitwillchangethechargeofthecollagensurfacenetchargeclosetozero.Fora3Dgelcoating,thecollagenpreparedunderneutralpH;thenetchargeofthecollagensurfaceisclosetozero.
Usingrotaryshadowingtechniqueundertransmissionelectronmicroscopy,itwasfoundthatourcollagen,onaverage,consistsofapproximately80%monomers,13%dimers,trimers,andoligomerswiththeremaining7%collagenfragments.
Yes.ThecollagenmoleculeinPureCol,Nutragen,VitroCol,andallofourotherAtelocollagenproductswerepreparedfromnativecollagenmatrixbypepsintreatmentundercontrolledconditionstoremovethenon-helicalportion,telo-peptides,onlyandthehelicalportionisintact.Inthiscase,theenzymaticactivesitesforMMP(MatrixMetalloproteinase),suchasforMammalianCollagenaseMatrixMetalloproteinase8(MMP-8),onthemoleculewaspreserved.
Thesepepsintreatedcollagenproductsshouldbehaveasnativeintactcollagen.
TGFbetawouldhavebeendigestedwiththepepsinenzymaticdigestionstep.ItwasundetectablebySDSPAGEsilverstainaswell.Wedidn’tdoanyspecificmeasurementsbyELISAhoweverbutpresencesofTGFbetaisnotanticipated.
WeprimarilyusetheBiuretmethod,butwealsouseBCA,AAA,andhydroxyl-prolineassays.
-Collagensolutionsthatarefrozentendtohaveissuesforming3Dhydrogels,andwilllikelynotwork.Thesolutionsshouldstillbegoodfor2Dcoatings.
-Collagensolutionsthatareleftoutatroomtemperatureforextendedperiodsoftimemayshowsignsofdegradation,whichwillaffecttheformationof3Dhydrogels.Itislikelystillfinefor2Dcoatings.
Ourrecommendationisthis:Ifyouareusingtheproductdirectlyforapublication,wehighlysuggestbuyinganewbottleiftheoneyouhavewascompromised.
ProductReferences
ReferencesforPureCol®EZGel:
Senior,J.J."FabricationofComplexHydrogelStructuresUsingSuspendedLayerAdditiveManufacturing(SLAM)."AdvancedFunctionalMaterials1904845(2019).doi:10.1002/adfm.201904845
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Calvao,DominickJoseph,GaetanaA.D"Alesio-Spina,andPatrickEdwardThomas."FabricationofaNutrientPerfusionEnhancingCartilageTissueScaffold."(2015).
TracyLindquist,DougJones,JohnJackman2,ShannonHostetter,andJesseHostetter.EvaluatingtheinvivoimmuneresponsetoMycobacteriumaviumsubspeciesparatuberculosisinfectioninnaïveandvaccinatedcalves1001(2018):26.
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Gehwolf,Renate,etal."3D-EmbeddedCellCulturestoStudyTendonBiology."(2019):1-11.
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PureCol®EZGel-Easy3DCollagenGels
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TelovsAteloCollagen
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SeedingCollagenGelswithCells
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4KeyComponentsfor3DCollagenGels
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CollagenConcentrationvsGelStiffness
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ProductDisclaimer
ThisproductisforR&Duseonlyandisnotintendedforhumanorotheruses.PleaseconsulttheMaterialSafetyDataSheetforinformationregardinghazardsandsafehandlingpractices.
美国AdvancedBioMatrix（简称ABM） www.advancedbiomatrix.comAdvancedBioMatrix（简称ABM）是美国一家著名的生物公司，获得了AllerganInc的授权(Allergan用25年时间不断完善胶原蛋白相关的产品的生产工艺)，将Allergan的专业和技术用于蛋白生产与检测，致力于为组织工程、细胞分析及细胞增殖等研究领域提供优质稳定的产品。AdvancedBioMatrix不断丰富已有产品线，目前可为三维细胞培养提供各种胶原蛋白、纤连蛋白、玻连蛋白、水性凝胶、不同粘度与分子量的透明质酸以及低代成纤维细胞等。在美国全部产品授权Sigma销售。AdvancedBioMatrix是组织培养，细胞分析和细胞增殖三维（3D）应用的生命科学领域的领导者。我们的产品被公认为纯度，功能性和一致性的标准。我们在生产，分离，纯化，冷冻干燥，细胞培养和蛋白质测试，粘附肽，附着因子，底物刚性和其他3D矩阵产品方面拥有丰富的专业知识。我们的专业技术和知识正在被用来确保我们的产品质量最高，批次之间一致且易于为我们的研究客户使用。
美国AdvancedBioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者。AdvancedBioMatrix在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3Dmatrix 产品开发方面有着丰富的经验。AdvancedBioMatrix的研发经验和专业知识确保其产品可达到最佳质量，并保证产品之间一致性，方便研究客户使用。以下为AdvancedBioMatrix3DMatrices 产品竞争优势：1. 提供高纯度和成分确定的胞外基质；2. 超过1000余篇文献引用PureCol产品，品质非常均一；3. 在3D培养基领域可提供最全面的产品线；4. 唯一可提供特异性刚性有机硅基板的公司（CytoSoft）;5. 唯一可提供可溶性丝纤蛋白的供应商（可运用于多种3D培养）；6. 如果客户首次接触3D胶原凝胶，AdvancedBioMatrix还是唯一的预制胶原蛋白(PureColEZGel)供应商；
以下产品为AdvancedBioMatrix全球畅销品：1.PureCol 牛源I型胶原蛋白 3mg/ml#5005-100ML2.Nutragen牛源I型胶原蛋白 6mg/ml#5010-50ML3.FibriCol 牛源I型胶原蛋白 10mg/ml#5133-20ML4.VitroCol 人源I型胶原蛋白 #5007-20ML5. 弹性蛋白原 #5052-1MG6.ECMSelectArraykitUltra-36#5170-1EA7.CytoSoft（刚性可变的基底，AdvancedBioMatrix最新添加产品5190-7EA）8. 人III型胶原蛋白 #5021-10MG9. 人IV型胶原蛋白 #5022-5MG10.SilkFibroin溶液 #5154-20ML11.Fibronectin#5080-5MG12.Vitronectin#5051-0.1MG
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杀菌效果是由微生物所接受的照射剂量决定的，同时，也受到紫外线的输出能量，与灯的类型，光强和使用时间有关，随着灯的老化，它将丧失30%-50%的强度。紫外照射剂量是指达到一定的细菌灭活率时，需要特定波长紫外线的量：照射剂量(J/m2)=照射时间(s)×UVC强度(W/m2)照射剂量越大，消毒效率越高，由于设备尺寸要求，一般照射时间只有几秒，因此，灯管的UVC输出强度就成了衡量紫外光onclick="g(消毒设备);">消毒设备性能最主要的参数。在城市污水消毒中，一般平均照射剂量在300 J/m2以上。低于此值，有可能出现光复活现象，即病菌不能被彻底杀，当从渠道中流出接受可见光照射后，重新复活，降低了杀菌效果。杀菌效率要求越高，所需的照射剂量越大。影响微生物接受到足够紫外光照射剂量的主要因素是透光率(254 nm处)，当UVC输出强度和照射时间一定时，透光率的变化将造成微生物实际接受剂量的变化。
优点
大多数紫外线装置利用传统的低压紫外灯技术，也有一些大型水厂采用低压高强度紫外灯系统和中压高强度紫外灯系统，由于产生高强度的紫外线可能使灯管数量减少90%以上，从而缩小了占地面积，节约了安装和维修费用，并且使紫外线消毒法对水质较差的出水也适用。
研究使用现状
目前国内研究、生产和应用污水紫外线消毒器还很少。天津大学的顾平等人以天津纪庄子污水处理厂的深度处理出水为研究对象，进行了静态和动态试验，确定了紫外线剂量与细菌存活率之间的关系，并设计出能产生紊流的紫外线消毒器，多元水环保技术产业(中国)有限公司研制生产的封闭式消毒器可处理100～500m3/h水量，并且在onclick="g(游泳池);">游泳池的循环水消毒中已有应用，模块化敞开式消毒器可根据用户需求具体设计安装。烟台市套子湾污水厂的深度处理采用了敞开式紫外线消毒工艺，可向城市提供4×104m3/d的工业回用水，目前运行状况良好。
紫外线消毒适用范围：
2.3.1 适用范围：
用于室内空气、物体表面和水及其它液体的消毒。
2.3.2 紫外线消毒灯和紫外线消毒器
2.3.2.1 消毒使用的紫外线是C波紫外线，其波长范围是200-275nrn，杀菌作用最强的波段是250-270nrn，消毒用的紫外线光源必须能够产生辐照值达到国家标准的杀菌紫外线灯。
2.3.2.2 制备紫外线消毒灯，应采用等级品的石英玻璃管，以期得到满意的紫外线辐照强度。
2.3.2.3 紫外线消毒灯可以配用对紫外线反射系数高的材料(如抛光铝板)制成的反射罩。
2.3.2.4 要求用于消毒的紫外线灯在电压为220V、环境相对湿度为60%、温度为20℃时，辐射的253.7nm紫外线强度不得低于7ouW/cm2(普通30W直管紫外线灯在距灯管1米处测定，特殊紫外线灯在使用距离处测定，使用的紫外线测强仪必须经过标定。)
2.3.2.5 紫外线灯使用过程中其辐照强度逐渐降低，故应经常测定消毒紫外线的强度，一旦降到要求的强度以下时;应及时更换。
2.3.2.6 紫外线消毒灯的使用寿命，即由新灯的强度降低到70Uw/cm2的时间(功率≥30w)的灯，或降低到原来新灯强度的70%(功率<30w=的时间，应不低于1000h。
2.3.2.7 目前我国使用的紫外线消毒灯有下述几种
(1) 普通直管热阴极低压汞紫外线消毒灯：灯管采用石英玻璃或其它对紫外线透过率高的玻璃制成，功率为40W、30W、20W、15w等。要求出厂新灯辐射253.7nrn紫外线的强度(在距离1米处测定，不加反光罩)为：功率>30W灯，≥90Uw/cm;功率>20w灯，≥60Uw/cm2 ;功率150灯，≥20Uw/cm2。由于这种灯在辐射253.7nrn紫外线的同时，也辐射一部分184.9nm紫外线。故可产生臭氧。
(2)高强度紫外线消毒灯：要求辐射253.7nrn紫外线的强度(在距离1米处测定)为：功率30W灯，>180uW/CM2;11w灯，>30 uW/CM2。
(3)低臭氧紫外线消毒灯：也是热阴极低压汞灯，可为直管型或H型;由于采用了特殊工艺和灯管材料，故臭氧产量很低，要求臭氧产量<1mg/h。
(4)高臭氧紫外线消毒灯：由于采取了特殊工艺，这种灯产生较大比例的波长184.9nrn的紫外线，故臭氧产量较大。
2.3.2.8 紫外线消毒器
(1)紫外线空气消毒器：采用低臭氧紫外线杀菌灯制造，可用于有人条件下的室内空气消毒。
(2)紫外线表面消毒器：采用低臭氧高强度紫外线杀菌灯制造，以使其能在瞬间达到满意的消毒效果。
(3)紫外线消毒箱：采用高臭氧高强度紫外线杀菌灯制造，一方面利用紫外线和臭氧的协同杀菌作用，另一方面利用臭氧对紫外线照射不到的部位进行消毒。
2.3.3 适用范围及条件
2.3.3.1 紫外线可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、芽胞
SIM 凝胶、化学发光图像分析系统为科学家提供了一种新一代36Bit，Bio-1DExpress软件，Windows98/2000/XP均兼容，能够观察分析各种透明或不透明的电泳图像，如EB染色胶，蛋白胶，放射自显影、印迹、斑点印迹等，满足定性，定量分析的迫切需要。
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样品对投射或者反射光有部分的吸收，从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度，通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用最新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀，最大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。向左转|向右转
凝胶成像仪genegeniusbioimage（syngene公司）系统，我实验室是2006年直接进口了这台仪器，时间太久远，连工程师的号码都是空号了，用过这台仪器的师兄师姐也都毕业不知道了找谁了，请问哪位实验室有这个公司产品的，找一下武汉这边的负责人，我们想联系到再找工程师来维修一下，谢谢！
有人知道是什么原因也行
仪器性能：拍摄对象：核酸琼脂糖凝胶电泳X光胶片功能：获取并处理图像测定图像光密度操作步骤：1. 开启成像系统，电脑电源2. 打开Quality One，调整光源所示图像3. 观察并调整曝光时间，获得图像并保存4. 调整图像，并对图像进行光密度分析5. 关闭所有电源
