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Key Benefits
- Homogenous assay for active caspase 3/7.
- Breakthrough in cell lysis buffer and preservation of caspase activity.
- Results in a no-wash, one-step assay.
- No need to wash out media from cell samples, just add the reagent directly to your experimental samples.
- Easy to Use: No need to make cell lysates or run Western blots.
- Works with suspension and adherent cells.
Additional information
Kit Size | 100, 500, 1000 |
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Cell Technology’s APO 3/7 HTS Assay utilizes the quenched (z-DEVD)2-R110 peptide substrate for caspase 3/7 detection. The absorption and emission properties of the R110 dye are suppressed when attached to the z-DEVD peptide sequence. When R110 is cleaved away, by active caspase3/7, form the quenching DEVD sequence, the free dye excites at 488nm and emits at 515-530 nm. As a result of a novel and proprietary Lysis Buffer System, the APO 3/7 HTS Assay is a homogenous platform that can be utilized for high throughput fluorescence plate reader applications. The reagent is directly added to the samples thus eliminating any wash steps.
Figure. In this figure, Jurkat cells were stimulated with various concentrations of staurosporine for 3 hours, after which caspase 3/7 activity was analyzed using the APO 3/7 HTS kit.
Document Title |
Apo3HTSprotocol |
APO 3 HTS Datasheet |
msds.APO3HTS |
Reference |
Slee, E. A., C. Adrain, and S. J. Martin. 1999. Serial Killers: ordering caspase activation events in apoptosis. Cell Death and Differ. 6:1067-1074. |
Walker, N. P., R. V. Talanian, K. D. Brady, L. C. Dang, N. J. Bump, C. R. Ferenz, S. Franklin, T. Ghayur, M. C. Hackett and L. D.Hammill. 1994. Crystal Structure of the Cysteine Protease Interleukin-1ß-Converting Enzyme: A (p20/p10)2 Homodimer. Cell 78:343-352. |
Wilson, K. P., J. F. Black, J. A. Thomson, E. E. Kim, J. P. Griffith, M. A.Navia, M. A. Murcko, S. P. Chambers, R. A. Aldape, S. A. Raybuck, and D. J.Livingston. 1994. Structure and mechanism of interleukin-1 beta converting enzyme. Nature 370: 270-275. |
Rotonda, J., D. W. Nicholson, K. M. Fazil, M. Gallant, Y. Gareau, M. Labelle,E. P. Peterson, D. M. Rasper, R. Ruel, J. P. Vaillancourt, N.A. Thornberry and J.W. Becker. 1996. The three-dimensional structure of apopain/CPP32, a key mediator of apoptosis. Nature Struct. Biol. 3(7): 619-625. |
Kumar, S. 1999. Mechanisms mediating caspase activation in cell death. Cell Death and Differ. 6: 1060-1066. |
Alnemri, E.S. et al (1996) Cell 87:171 |
Trends Biochem Sci 22,388 (1997) |
Part# | Reagent | Temperature |
Part# 4004 | Caspase 3/7 Reagent (z-DEVD) 2 Rodamine 110, 1 Vial | -20C |
Part# 3005 | Cell Lysis Buffer, 1 Bottle | 2-8C |
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就是蛋白质分子的小片断
是氨基酸形成的
核苷类药按其结构,也可分为3类: ① L-核苷类:,如拉米夫定和替比夫定;为嘧啶类②
无环磷酸盐类,阿德福韦酯和替诺夫韦;为嘌呤类,③ 环戊烷 /
烯类,如恩替卡韦。现在上市的有拉米夫定、替比夫定、阿德福韦和恩替卡韦;将要上市的还有替诺福韦。这一类新的药物还在不断研发,还会有更好的药物问世。
这一类药物有共同的特点。优点是应用方便,每天服一片药就行了;安全性强,很少不良反应,几乎没有禁忌症;最重要的是抑制病毒复制的活性很强,能较快改善病情。共同的缺点是需要长期用药,随意停药可能有反弹的风险;不计划、不规范用药容易发生耐药变异。
1、拉米夫定(贺普丁)有什么特点?
拉米夫定是第一个研发出来的口服抗病毒药,已经上市10年了,治疗了上百万人,救治了无数病人,取得了丰富的经验。
在上述几种口服抗病毒药中,拉米夫定抑制病毒复制的活性居于中等水平,一年平均可降低对数的5次方(即降到治疗前的1/10万)。随着病毒水平的降低,有七成病人血清转氨酶在3个月内降至正常;自觉症状也随之改善;肝组织病变在6个月内会有明显进步。肝硬化病人的恢复要慢一些。
拉米夫定是最安全的核苷类药,价格也较适当,过去、现在和在近期内都是应用最广泛的抗病毒药物,一个月的费用约460圆。
但拉米夫定也是最容易发生耐药变异的,每年以20%的比率递增。过去由于“一花独秀”,也有过一些误导,使我国有众多耐药变异的乙肝病毒感染者,因对其他核苷类药可能会发生交叉耐药,造成治疗困难。今后如能吸取教训,使用得当,仍不失为一个好药。
2、阿德福韦有什么特点?
阿德福韦抑制病毒复制的作用稍弱,1年降低4次方,故控制病情较缓慢,1年只有半数的病人血清转氨酶正常。但阿德福韦发生耐药变异较少,只要血清病毒长期维持在很低的复制水平,就有可能较长时间稳定控制病情。
阿德福韦是我国拥有自主知识产权的新药,目前国内有多家企业生产。在多种核苷类药物中,价格是最低的(一个月的费用约430圆),而且药品价格还在不断下调中。既能解决患者问题,又不至于增添患者太多经济负担。
但要注意的是:老年病人和肝移植病人可能有潜在的肾损害,用药中要多做检查。
3、恩替卡韦有什么特点?
恩替卡韦,在已经上市和尚未上市的几种药物中,抑制病毒复制的活性最强,一年平均可降低对数的7次方,几乎是拉米夫定的100倍,对极大多数病毒水平很高的病人也能在1年左右降至不能检出。早期作用更明显,头2周就能降低2次方,对救治重症病人特别有利。在肝移植病人可用于抑制病毒复现,可长期应用预防再感染导致的移植肝排斥。
恩替卡韦在没有用过核苷类药的初治病人,耐药变异的发生率很低,对已经拉米夫定耐药的病人疗效会明显降低。最大的问题是价格最贵,一个月的费用达1100圆。
4、替比夫定有什么特点?
替比夫定是拉米夫定的同类药,而抑制病毒作用约有拉米夫定的10倍,一年平均可降低血清病毒水平6次方,约60%的病人不能检出病毒。不过这些数据多来源国外,从临床疗效来看,控制病情、HBV-DNA阴转率、变异率稍优于拉米夫定,但从统计学上来分析,没有实际意义的差别。替比夫定一个月的费用约700圆,尚没有纳入国家医保。拉米夫定效果不佳时,可以考虑换用替比夫定,但一年后的耐药率也不低于10%。
怎样正确应用这一类药物?
因为服用这类药物很方便、很安全,有些病人像用止痛片或胃病药一样,随意停停用用,血清转氨酶升高了就用,正常了就停。这样不规范的用药很少有不出问题的,过去曾经有过不少教训。必须在医生指导下,按规定的剂量服药,要定期检查,发现问题要及时处理。
在官方网上查到的可用产品信息如下。Leupeptin用水溶解,工作液有效浓度是10-100uM.我认为这个数值太大,我怎么算也不知道该加多少量..
PMSF用5%乙醇溶解,有效浓度没有说。怎样配,有效浓度应该是多少?
使用过的同学,帮忙讲几句.
脂类,由脂肪酸和醇作用生成的酯及其衍生物统称为脂类,这是一类一般不溶于水而溶于脂溶性溶剂的化合物。
脂肪:存在于人体和动物的皮下组织及植物体中,是生物体的组成部分和储能物质。
脂类所指代的一类物质较脂肪更广。而酯类则是从化学角度来看物质世界,有不少是化工原料。有些酯类是脂肪的构成成分。
如上所述,脂类包括脂肪酸(多是4碳以上的长链一元羧酸)和醇(包括甘油醇、硝氨醇、高级一元醇和固醇)等所组成的酯类及其衍生物。包括单纯脂类、复合酯类及衍生脂质。
脂肪是指人体或动物体内的、由一分子甘油和三分子脂肪酸结合而成的甘油三酯。
酯类是指酸(羧酸或无机含氧酸)与醇起反应生成的一类有机化合物。低分子量酯是无色、易挥发的芳香液体,如:如乙酸乙酯CH3COOC2H5、乙酸苯酯CH3COOC6H5、苯甲酸甲酯C6H5COOCH3等;高级饱和脂肪酸单酯常为无色无味的固体,高级脂肪酸与高级脂肪醇形成的酯为蜡状固体。所以,酯类与脂类不可替代使用。
核酸是天然高分子化合物,,糖类中的多糖(淀粉、纤维素、糖原等)也是天然高分子化合物
同属于生命的六大营养物质(水,无机盐,糖类,脂质,核酸,蛋白质)

