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兔抗人可溶性纤维蛋白原 (亲和层析纯化),Rabbit Antihuman...
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实验方法原理

富尔根氏(Feulgen)染色法是根据席夫氏(Schiff)试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸,碱性复红与亚硫酸结合后,失去醌式结构而变为无色。当DNA经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后,使醌式结构恢复,合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此染色法对DNA具有特异性。微生物细胞用此法染色后,可在普通光学显微镜下原位观察到细胞内拟核的形态和位置。

富尔根氏染色法主要分两步:

1.将细胞用1mol/LHCI温和水解,使DNA中的嘌呤碱与戊糖分开,放出戊糖的醛基;

2.放出的戊糖醛基与席夫氏试剂作用后呈紫红色。

实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤

1取培养8~10h的酿酒酵母涂片,室温下风干。

2.将涂片置于盛有2%锇酸的蒸气瓶口上,用锇酸蒸气固定5min,然后放入加热至60℃的Schandium固定液中10min。

3.用水冲洗固定后的标本,然后放在60℃1mol/LHCl中水解8min,水洗。

4.用席夫氏试剂作用30~40min。

5.由席夫氏试剂中取出放在亚硫酸水溶液中洗5min。

6.由亚硫酸水溶液中取出水洗,干燥后,用油镜观察。

注意事项
其他
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