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核仁组织者区的AgNO3染色实验方法

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一、原理
1976年Goodpasture等应用银染色技术，使9种哺乳动物的核仁组织者区（NORs）特异性的染为黑色，该技术被称为Ag-As的银染技术，银染色阳性的NORs被称为Ag-NORs，与Hsu等人用原位分子杂交得到的结果比较，表明Ag-NORs就是18S+28S核糖体基因（rDNA）的分布区，后证实染色的不是rDNA基因本身，而是与rDNA转录有关的一种酸性蛋白。因此，银染色的是有转录活性的NORs。

二、用品和试剂
染色体制片，水浴锅。
试剂：50%硝酸银溶液：5g硝酸银（AR）溶解在10ml蒸馏水中，保存在铝箔包裹的玻璃容器内，可稳定保存1年。明胶显影液∶2g 明胶粉末溶解在99ml蒸馏水中，加1ml甲酸。

三、操作步骤
l．在一培养皿底部放一张蒸馏水润湿的滤纸，上放两根竹签，置水浴内保温60℃。
2．将玻片标本正面向上平放其上，将50%硝酸银溶液和明胶显影液以2∶1体积混匀，立即加至玻片上，覆以盖片，至玻片标本呈现褐色为止，一般3—4min。
3．自来水流洗去盖片和染料，空气中晾干。
4．镜检。

四、注意事项
如银染的染色体形态过浅，可用2% Giemsa复染1—3min.

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