Quick Preparation of Plasmid DNA from Yeast 组分提取...
| 实验方法原理 | 糖原由多糖衍化而来，是单纯的多糖。糖原易溶于水，所以用特殊的Carnoy固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原，常用高碘酸（periodicacid）-Shiff反应（PAS）染色法。 | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 石蜡组织切片 试剂、试剂盒 | 高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）双重蒸馏水Mayer明矾-苏木精液乙醇二甲苯中性树胶 实验步骤 | 高碘酸氧化液：高碘酸0.5g，蒸馏水100ml。此液溶解后放入冰箱中待用。 Schiff染色液：碱性复红1g，1mol/L盐酸20ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2g，双重蒸馏水200ml。先将200ml双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入1g碱性复红，再煮沸1min，冷却至50℃加入20ml1mol/L盐酸，待35℃时加入2g焦亚硫酸钠。室温中2h之后见稍带红色，5h之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。 1.石蜡组织切片，常规脱蜡至水。 2.蒸馏水洗2次。 3.高碘酸氧化液处理10～20min。 4.充分蒸馏水洗。 5.Shciff液染色，染色10～20min（如果室温在15℃以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。 6.流水冲洗3min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。 7.用Mayer明矾-苏木精液染细胞核3～5min。 8.0.5％盐酸乙醇液分化30s，自来水浸洗2min。 9.无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。 注意事项 | 1.糖原固定必须及时取小块组织进行固定，防止固定不透或不均现象。 2.Schiff试剂使用时的吸管要清洁，当室温较低需加热时，要注意染色不能较深，防止影响染色效果。 其他 | 结果：糖原物质呈红色，细胞核呈蓝色。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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