细胞凋亡检测(AnnexinVFITC 单染法)(Assay of Cell Apoptosis)_百度文...
| 实验方法原理 | 细胞凋亡时，其细胞膜上的磷脂分布发生改变，尤其是凋亡早期，细胞膜上的磷脂酰胆碱暴露出来，由于PS（磷脂酰丝氨酸）外膜化比凋亡引起的核酸变化更早期，成为细胞凋亡的早期指征之一。抗凝剂膜联蛋白V具有与带负电荷的磷脂酰胆碱结合的特性，因此可采用荧光素标记的膜联蛋白V和PI同时染色来检测早期凋亡细胞。也可采用IHC方法迸行鉴别。 |
|---|---|
| 实验步骤 | 1.主要试剂的配制 染色缓冲液：10mmol/LHEPES-NaOH，pH7.4；140mmol/LNaCl；2.5mmol/LCaCl2。 FITC-膜联蛋白V染色液：结合有FITC-膜联蛋白V按1.0mg/ml溶于染色缓冲液中（新鲜配制）。 PI（Sigma，MO，USA）保存液：1mg/ml的水溶液，于4℃避光保存。 2.操作流程 2.1（0.1～1）×106细胞离心（3000r/min）去上清后，重新悬浮于1ml的膜联蛋白V-FITC染色液中，室温下染色5min。 2.2在细胞悬液中加入10μl的PI保存液，室温下染色5min后上机检测。 2.3流式细胞仪检测采用蓝色激发光（波长为488nm的氩离子激光），绿色荧光检测范围为（530士20）nm，红色荧光检测范围为〉600nm。 3.结果观察 正常活细胞不被着色，仅具有背景染色；早期凋亡细胞膜与膜联蛋白V-FITC结合而显示出绿色荧光，但不被PI着色，所以无红色荧光；晚期凋亡细胞或坏死细胞则同时显示出强的绿色和红色荧光。 |
| 注意事项 | |
| 其他 |
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-09-16
阅读（461）
▍
相关分类
▍
相关文章
黑方法 nginx
难辨梭状芽胞杆菌(Cd)核酸检测试剂盒方法_PCR荧光探针法上海谷...
Quick Preparation of Plasmid DNA from Yeast 组分提取...
适于局部涂敷的预成型薄片器件的制作方法
一、荧光标记单参数检测造血干细胞——CD34FITC_CNKI学问
化学制品和弹药公司：欧林Olin Corporation(OLN) | 美股之家 ...
核仁组织者区的AgNO3染色 实验方法
彗星实验（Comet assay）如何做？
投资组合 / 投资方向 / Healthcare_凯风创投官网
电子行业产品指南HuntsmanCorporation.PDF
VARIAN 美国VARIAN色谱仪 世界上研究开发科学仪器和 ...
Argus II_
▍
相关问答
