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2018-12-26
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死, 查看更多
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与琼脂糖凝胶不同,聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭,因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而,电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚丙烯酰胺会猝灭溴化乙锭的荧光,所以检测 DNA 的灵敏度降低。电泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probes) 进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多
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本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多
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2018-08-06
神经组织是构成神经系统的基本成分,主要由神经细胞、神经胶质细胞和神经纤维组成。神经细胞尼氏体是分布于神经细胞质内的三角形或椭圆形小块或颗粒状物质。神经元的轴突及胶质细胞由形成的膜包裹,或者神经轴突(树突)被神经膜细胞包襄,以及被小胶质包裹形成神经纤维。神经纤维进一步分为有髓神经纤维和无髄神经纤维。 查看更多
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2018-08-10
掌握痰标本抗酸染色法。 查看更多
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2018-08-06
细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。 查看更多
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2021-09-17
报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。 查看更多
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2021-08-21
大多数用于分析蛋白质的现代电泳方法,都是建立在聚丙烯酰胺为介质的区带电泳或圆盘连续电泳的基础上(Raynond and Weintraub,1959;David,1964;Orn-stein,1964)。聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegel..electrophoresis,PAGE) 同时利用了分子大小和电荷差别两种属性,从而达到分离目的。[澳] 理查德 J. 辛普森 (Richard J.Simpson) 主编 何大澄 主译 查看更多
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2021-08-12
免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。 查看更多
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2018-08-06
培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社) 查看更多
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2018-12-26
Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of in vitro assays. Segmented microtubules are microtubules with a bright s 查看更多
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2018-12-26
染色体分裂指数低:患者处于非常时期(感染期、放、化疗期): 培养基营养成份不良; 培养基PH偏低或偏高; PHA过量或不足; 小牛血清质量不高; 小牛血清数量偏低或过高; 查看更多
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【求助】GFP+细胞流式检测荧光染料的选择 免疫学讨论版...123
juju832021-08-10
请问表达绿色荧光蛋白(GFP)的细胞做流式检测表面分子的表达情况能够使用Fitc标记的抗体么?
流式荧光染料搭配六点技巧 (...123
七情GAKK2017-10-02
示踪染料有很多种,跟据你的目的和实验方法来选取,比如calcein,dri,cfda,还有bcef等。这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。dri,还可以看膜啊cfda也不错bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
实时荧光定量PCR荧光染料发出的是什么波长段的光?不同染料的荧光...123
猫九尾k7742017-09-29
Fam,Vic are most uded ones.
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【求助】荧光素FAM 和FITC分别是什么? 生物材料 学术...123
yumingxi2021-08-04
我现在正在做细胞吞噬铁的实验,想在共聚焦下观察细胞吞噬的实验,想找一个荧光染料可以染到细胞膜的?新手上路,还望各路高手多多指点啊!
希望同路人多多交流啊!
希望同路人多多交流啊!
Akce的个人空间 ( ゜ ゜)つロ 乾杯~ Bilibili123
td哥哥69262018-02-18
PCR生物实验常用的染料有哪些
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB(溴化乙锭,高致癌性),goldview,sybr green(实时定量PCR时常用染料).这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等,它们多从植物体中提取得到,其成分复杂,有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料,也称煤焦油染料,多从煤焦油中提取获得,是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类,难溶于水,而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水,通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为酸性染料、碱性染料、中性(复合)染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB(溴化乙锭,高致癌性),goldview,sybr green(实时定量PCR时常用染料).这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等,它们多从植物体中提取得到,其成分复杂,有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料,也称煤焦油染料,多从煤焦油中提取获得,是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类,难溶于水,而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水,通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为酸性染料、碱性染料、中性(复合)染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
pi染料激发波长_完美作业网_www.wanmeila.com123
玖bi0T2017-09-29
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
染料基础知识:荧光染料在使用时有什么要求要注意的 汉科精化123
进口颜料2021-08-07
荧光染料是一种能吸收部分子外光,将紫外光转化为可见光,从而增加亮度的着色剂,从而使颜色极为鲜明。
荧光燃料使用的问题有两个:
一个就是迁移性,使用时要严格控制用量,以避免产生迁移现象;
二是荧光染料使用有一个极限值,如果超量使用,导致荧光线被吸收,使吸收和发光成叠所致。
荧光燃料使用的问题有两个:
一个就是迁移性,使用时要严格控制用量,以避免产生迁移现象;
二是荧光染料使用有一个极限值,如果超量使用,导致荧光线被吸收,使吸收和发光成叠所致。
请教可以长时间染活细胞的荧光染色剂_问答详情_荧光染料_染色剂...123
荒城452017-10-02
示踪染料有很多种,跟据你的目的和实验方法来选取,比如calcein,dri,cfda,还有bcef等。
这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。
比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。
dri,还可以看膜啊
cfda也不错
bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。
当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
这些染料都非常成熟,光毒和淬灭都很低,当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。
比如calcein,常用的示踪,绿光(虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩),但要考虑你的实验过程中结合细胞结构,是否会伴随calcein的泄漏,就是荧光降低。
dri,还可以看膜啊
cfda也不错
bcef虽是ph指示,但你试验时不仅可观察细胞,还可看细胞ph变化,也行。
当然你或许还要结合其他方法,如细胞免疫化学等手段去双染或多染,都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料,有点浪费,不如多染,数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
常用荧光染料的激发和发射波长 123
梓惭炒322021-08-08
激发波段在488的荧光染料有哪些
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)123
枫岛LO03392018-02-18
1、菲林试剂 还原糖 砖红色沉淀(需水域)
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红(龙胆紫、改良苯酚品红) 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色(不常用)
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红(龙胆紫、改良苯酚品红) 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色(不常用)
同一基因突变,为何向左为LQT3,向右为Brugada综合征?_心肌细胞123
第537位访客2018-02-18
在生物中,健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料。
健那绿染液是一种活体染液,实验对象必须是活细胞,健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
健那绿染液是一种活体染液,实验对象必须是活细胞,健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。
荧光染料选择和数据分析 123
众里寻清忧2021-07-26
最常用的就是洗衣粉中的荧光增白剂,也就是白色荧光染料,几乎所有配方的洗衣粉中都有。
然后是碱性荧光染料,造纸厂用来增加纸的亮度。
直接和分散的荧光黄,印染厂用来增加棉质和化纤面料的艳度
然后是碱性荧光染料,造纸厂用来增加纸的亮度。
直接和分散的荧光黄,印染厂用来增加棉质和化纤面料的艳度

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