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更新于 2018-12-26
细胞活化︰ 1. 收到细胞株包裹时， 请检查细胞株冷冻管是否有解冻情形， 若有请立即通知。细胞 株请尽速开始培养， 或立即冷冻保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。 2. 冷冻细胞解冻程序: 2.1. 依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比 例， 制备培养基。绝大多数之
编码PCR二代测序建库方法,试剂盒及检测方法
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更新于 2018-12-26
三.器械的清洗和消毒 玻璃器械洗消： (1)新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸
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更新于 2018-12-26
五.细胞传代培养（消化法） 具体操作： (1)传代前准备： 1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。 3.正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。 4.点燃酒精灯：注
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更新于 2018-12-26
其实DMEM细胞培养基的高糖和低糖对细胞培养影响并不大，我几年前刚开始做细胞培养时也常为此困扰。如果为了保险起见，选高糖的好了。培养基中的谷氨酰胺、丙酮酸钠浓度更重要，一定注意不同货号培养基之间的细小差别，最好选组分全加 入的货号产品，毕竟省得不少另加试剂的开销。HEPES的添加也
试剂加入顺序的先后对实验的影响
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更新于 2018-12-26
配液：Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液。取鼠：鼠盆用棉铺好，取鼠。准备：事先检查显微镜、磁力搅拌器及离心机是否好用，提前三小时把小牛血清、胰酶、抗生素拿出来化开。其余未冻药品也提前20分钟拿出来缓和一下。新洁尔灭（0.1％）泡纱布（用10ml5％
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更新于 2018-12-26
牙髓细胞的培养1、 培养用液：PBSA；胶原酶：I型，用D－Hank’s液配制，625U/ml；培养液：DMEM＋10％FBS；2、 Protocol：u 取拔除的正畸牙或阻生牙（年龄小者较佳），尽量完整的取出牙髓，置于培养皿中，用PBS冲洗；u 将牙髓放入离心管，加入胶原酶2－3ml/牙，37℃，2－3小时（原则是
细胞培养中的黑胶虫问题_图文
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更新于 2018-12-26
1.我们实验室最近一次的情况:我们前后从上海细胞中心买了三批细胞，细胞刚到的时候，观察均生长良好，密度适中，培养液清亮，也没有见小黑点，但是对细胞传代以后就陆续出现多少不等的小黑点，有时候在一夜之间暴长，给培养液加庆大霉素，也无济于事，对贴壁细胞用生理盐水及D-hanks液冲洗七遍
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更新于 2018-12-26
常规组织培养法1）初代消化培养法1. 准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2. 布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。3. 处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合
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更新于 2018-12-26
特殊培养法1）二倍体细胞培养法二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为：1. 吸除旧培养液注入另瓶中。2. 用温BSS冲洗1次。3. 用0.25%温胰蛋白酶消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。4. 待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和间隔加大，便终止消化。为防止细胞丢失
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