| Conjugates | AlkalinePhosphatase,APC,ATTO390,ATTO488,ATTO565,ATTO594,ATTO633,ATTO655,ATTO680,ATTO700,Biotin,FITC,HRP,PE/ATTO594,PerCP,RPE,Streptavidin,Unconjugated
| PerCP | Overview:- Peridinin-Chlorophyll-ProteinComplex
- Smallphycobiliprotein
- Isolatedfromredalgae
- Largestokesshift(195nm)
- MolecularWeight:35kDa
PerCPDatasheet |  | OpticalProperties: λex =482nm λem=677nm εmax=1.96x106 Laser =488nm | PE/ATTO594 | | PE/ATTO594isatandemconjugate,wherePEisexcitedat535nmandtransfersenergytoATTO594viaFRET(fluorescenceresonanceenergytransfer),whichemitsat627nm. | Overview:- Highfluorescenceyield
- HighphotostABIlity
- Veryhydrophilic
- Excellentsolubilityinwater
- Verylittleaggregation
PE/ATTO594Datasheet |  | OpticalProperties: λex =535nm λem =627 nm Laser = 488to561nm | FITC(Fluorescein) | Overview:- Excellentfluorescencequantumyield
- Highrateofphotobleaching
- Goodsolubilityinwater
- Broademissionspectrum
- pHdependentspectra
- Molecularformula:C20H12O5
- Molarmass:332.3g/mol
FITC-Fluorescent-conjugate |  | OpticalProperties: λex =494 nm λem=520 nm εmax=7.3×104 Φf= 0.92 τfl =5.0ns Brightness= 67.2 Laser = 488 nm Filterset = FITC | ATTO700 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Excellentthermalandphotostability
- Quenchedbyelectrondonors
- Veryhydrophilic
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- Zwitterionicdye
- MolarMass:575g/mol
ATTO700Datasheet |  | OpticalProperties: λex =700 nm λem=719nm εmax=1.25×105 Φf= 0.25 τfl =1.6ns Brightness= 31.3 Laser =676nm Filterset =Cy®5.5 | ATTO680 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Excellentthermalandphotostability
- Quenchedbyelectrondonors
- Veryhydrophilic
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- Zwitterionicdye
- MolarMass:631g/mol
ATTO680Datasheet |  | OpticalProperties: λex =680nm λem=700 nm εmax=1.25×105 Φf= 0.30 τfl =1.7ns Brightness=37.5 Laser =633 –676nm Filterset =Cy®5.5 | ATTO655 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Highthermalandphotostability
- Excellentozoneresistance
- Quenchedbyelectrondonors
- Veryhydrophilic
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- Zwitterionicdye
- MolarMass:634g/mol
ATTO655Datasheet |  | OpticalProperties: λex =663nm λem=684nm εmax=1.25×105 Φf= 0.30 τfl =1.8ns Brightness= 37.5 Laser =633 –647nm Filterset =Cy®5 | ATTO633 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Highthermalandphotostability
- Moderatelyhydrophilic
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- StableatpH4–11
- Cationicdye,perchloratesalt
- MolarMass:652.2g/mol
ATTO633Datasheet |  | OpticalProperties: λex =629nm λem=657nm εmax=1.3×105 Φf= 0.64 τfl =3.2ns Brightness=83.2 Laser =633 nm Filterset =Cy®5 | ATTO594 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Highphotostability
- Veryhydrophilic
- Excellentsolubilityinwater
- Verylittleaggregation
- Newdyewithnetchargeof-1
- MolarMass:1137g/mol
ATTO594Datasheet |  | OpticalProperties: λex =601 nm λem=627nm εmax=1.2×105 Φf= 0.85 τfl =3.5ns Brightness=102 Laser =594nm Filterset =TexasRed® | ATTO565 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Highthermalandphotostability
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- Excellentsolubilityinwater
- Verylittleaggregation
- Rhodaminedyederivative
- MolarMass:611g/mol
ATTO565Datasheet |  | OpticalProperties: λex =563nm λem=592nm εmax=1.2×105 Φf= 0.9 τfl =3.4n Brightness=10 Laser =532nm Filterset = TRITC | ATTO488 | Overview:- Highfluorescenceyield
- Highphotostability
- Veryhydrophilic
- Excellentsolubilityinwater
- Verylittleaggregation
- Newdyewithnetchargeof-1
- MolarMass:804g/mol
ATTO488Datasheet |  | OpticalProperties: λex =501nm λem=523nm εmax=9.0×104 Φf= 0.80 τfl =4.1ns Brightness= 72 Laser = 488 nm Filterset = FITC | ATTO390 | Overview:- Highfluorescenceyield
- LargeStokes-shift(89nm)
- Goodphotostability
- Moderatelyhydrophilic
- Goodsolubilityinpolarsolvents
- Coumarinderivate,uncharged
- Lowmolarmass:343.42g/mol
ATTO390Datasheet |  | OpticalProperties: λex =390nm λem=479nm εmax=2.4×104 Φf= 0.90 τfl =5.0ns Brightness= 21.6 Laser =365or405nm | APC(Allophycocyanin) | Overview:- Highquantumyield
- Largephycobiliprotein
- 6chromophorespermolecule
- Isolatedfromredalgae
- MolecularWeight:105kDa
APCDatasheet |  | OpticalProperties: λex =650nm λem=660nm εmax=7.0×105 Φf= 0.68 Brightness= 476 Laser =594or633 nm Filterset =Cy®5 StreptavidinProperties: - Homo-tetramericproteinpurifiedfromStreptomycesavidiniiwhichbindsfourbiotinmoleculeswithextremelyhighaffinity
- Molecularweight:53kDa
- Formula:C10H16N2O3S
- Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA
StreptavidinDatasheet Biotin Properties: - BindstetramericavidinproteinsincludingStreptavidinandneuravidinwithveryhighaffinity
- Molarmass:244.31g/mol
- Formula:C10H16N2O3S
- Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA
BiotinDatasheet HRP(HorserADIshperoxidase)Properties: - Enzymaticactivityisusedtoamplifyweaksignalsandincreasevisibilityofatarget
- Readilycombineswithhydrogenperoxide(H2O2)toformHRP-H2O2complexwhichcanoxidizevarioushydrogendonors
- Catalyzestheconversionof:
- Chromogenicsubstrates(e.g.TMB,DAB,ABTS)intocolouredproducts
- Chemiluminescentsubstrates(e.g.luminolandisoluminol)intolightemittingproductsviaenhancedchemiluminescence(ECL)
- Fluorogenicsubstrates(e.g.tyramine,homovanillicacid,and4-hydroxyphenylaceticacid)intofluorescentproducts
- Highturnoverrateenablesrapidgenerationofastrongsignal
- 44kDaglycoprotein
- Extinctioncoefficient:100(403nm)
- Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA
HRPDatasheet AP(AlkalinePhosphatase)Properties: - Broadenzymaticactivityforphosphateestersofalcohols,amines,pyrophosphate,andphenols
- Commonlyusedtodephosphorylatethe5’-terminiofDNAandRNAtopreventself-ligation
- Catalyzestheconversionof:
- Chromogenicsubstrates(e.g.pNPP,naphtholAS-TRphosphate,BCIP)intocolouredproducts
- Fluorogenicsubstrates(e.g.4-methylumbelliferylphosphate)intofluorescentproducts
- Molecularweight:140kDa
- Applications:Westernblot,immunohistochemistry,andELISA
APDatasheet | R-PE(R-Phycoerythrin) | Overview:- Broadexcitationspectrum
- Highquantumyield
- Photostable
- Memberofthephycobiliproteinfamily
- Isolatedfromredalgae
- Excellentsolubilityinwater
- MolecularWeight:250kDa
R-PEDatasheet |  | OpticalProperties: λex =565nm λem=575nm εmax=2.0×106 Φf= 0.84 Brightness=1.68x103 Laser = 488to561nm Filterset = TRITC ProductImages Immunocytochemistry/ImmunofluorescenceanalysisusingMouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody,Clone2H2(SMC-504).Tissue:Embryonickidneycells(HEK293).Species:Human.Fixation:5%Formaldehydefor5min.PrimaryAntibody:MouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody(SMC-504)at1:50for30-60minatRT.SecondaryAntibody:GoatAnti-MouseAlexaFluor488at1:1500for30-60minatRT.Counterstain:PhalloidinAlexaFluor633F-Actinstain;DAPI(blue)nuclearstainat1:250,1:50000for30-60minatRT.Magnification:20X(2XZoom).(A,C,E,G)–Untreated.(B,D,F,H)–Cellsculturedovernightwith50µMH2O2.(A,B)DAPI(blue)nuclearstain.(C,D)PhalloidinAlexFluor633F-Actinstain.(E,F)AcroleinAntibody.(G,H)Composite.Courtesyof:Dr.RobertBurke,UniversityofVictoria.  WesternBlotanalysisofAcrolein-BSAConjugateshowingdetectionof67kDaAcrolein-BSAusingMouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody,Clone2H2(SMC-504).Lane1:MolecularWeightLadder(MW).Lane2:Acrolein-BSA(0.5µg).Lane3:Acrolein-BSA(2.0µg).Lane4:BSA(0.5µg).Lane5:BSA(2.0µg).Block:5%SkimMilkinTBST.PrimaryAntibody:MouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody(SMC-504)at1:1000for2hoursatRT.SecondaryAntibody:GoatAnti-MouseIgG:HRPat1:2000for60minatRT.ColorDevelopment:ECLsolutionfor5mininRT.Predicted/ObservedSize:67kDa.  FlowCytometryanalysisusingMouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody,Clone2H2(SMC-504).Tissue:Neuroblastomacells(SH-SY5Y).Species:Human.Fixation:90%Methanol.PrimaryAntibody:MouseAnti-AcroleinMonoclonalAntibody(SMC-504)at1:50for30minonice.SecondaryAntibody:GoatAnti-Mouse:PEat1:100for20minatRT.Cellsweresubjecttooxidativestressbytreatingwith250μMH2O2for24hours. ProductCitations(0)Currentlytherearenocitationsforthisproduct. | ATTO655 | Overview:- Highfluorescenceyield
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ATTO655Datasheet | | OpticalProperties: λex =663nm λem=684nm εmax=1.25×105 Φf= 0.30 τfl =1.8ns Brightness= 37.5 Laser =633 –647nm Filterset =Cy®5
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EDTA对金属离子的络合能力随酸度改变而不同，酸度越低，络合能力增强；酸度越高，络合能力越弱。可见控制溶液的pH在络合滴..
缓冲物质更重要。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。
药典上说取本品10ml，加甲基红指示液（变色范围ph4.2-6.3，红~黄）2滴不得显红色；加溴麝香草酚蓝（变色范围ph6.0-7.6，黄~蓝）5滴不得显蓝色。 是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6？能否直接用 pH计测量？谢谢!
通HCl前,溶液是c(CH₃COOH)=c(CH₃COONa)=0.1mol/L的混合溶液,按照缓冲溶液pH的求法求.
pH(1)=pKa+lg[c(CH₃COONa)/c(CH₃COOH)]=pKa=4.74
通HCl后,溶液是c(CH₃COOH)=0.2mol/L、c(NaCl)=0.1mol/L的混合溶液,溶液pH按照弱酸溶液pH的求法求.
c(H⁺)=√[Ka*c(CH₃COOH)]=√(10^-4.74*0.2)=0.00191(mol/L)（采用了近似公式）
pH(2)=-lg{c(H⁺)}=2.72
两个pH求得,那么pH的变化量也就可得了.pH的变化量=|pH(2)-pH(1)|=|2.72-4.74|=2.02
1）PH缓冲溶液作用原理和pH值
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液.弱酸及其盐的混合溶液（如HAc与NaAc）,弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液.
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故.当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H离子基本上被A-离子消耗：
所以溶液的pH值几乎不变；当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化.
2）PH缓冲溶液的缓冲能力
在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用.这说明它的缓冲能力是有一定限度的.
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关.0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大.关于这一点通过计算便可证实.但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用.
组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH最小,缓冲能力大.不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用.缓冲溶液的pH值可用下式计算：
此时缓冲能力大.缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用.对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内.
弱酸及其盐（弱酸及其共轭碱）体系pH=pKaφ±1
弱碱及其盐（弱碱及其共轭酸）体系pOH=pKbφ±1
例如HAc的pKaφ为4.76,所以用HAc和NaAc适宜于配制pH为3.76～5.76的缓冲溶液,在这个范围内有较大的缓冲作用.配制pH=4.76的缓冲溶液时缓冲能力最大,此时（c（HAc）/c（NaAc）=1.
3）PH缓冲溶液的配制和应用
为了配制一定pH的缓冲溶液,首先选定一个弱酸,它的pKaφ尽可能接近所需配制的缓冲溶液的pH值,然后计算酸与碱的浓度比,根据此浓度比便可配制所需缓冲溶液.
以上主要以弱酸及其盐组成的缓冲溶液为例说明它的作用原理、pH计算和配制方法.对于弱碱及其盐组成的缓冲溶液可采用相同的方法.
PH缓冲溶液在物质分离和成分分析等方面应用广泛,如鉴定Mg2离子时,可用下面的反应：
白色磷酸铵镁沉淀溶于酸,故反应需在碱性溶液中进行,但碱性太强,可能生成白色Mg（OH）2沉淀,所以反应的pH值需控制在一定范围内,因此利用NH3·H2O和NH4Cl组成的缓冲溶液,保持溶液的pH值条件下,进行上述反应.
Whatman的网站上说DE52（货号4057-200）是预膨胀的（Preswollen），有的中文网站上说DE52是即用型。
这就是说不用酸碱预处理吗？
Whatman的网站上没有DE52最大耐受压力，请问又经验的战友应该是多少？
Whatman的网站上：
DE32DryMicrogranularDEAECellulose
SimilarperformancecharacteristicsafterprecyclingasDE52.
DE52PreswollenMicrogranularDEAECellulose
ProbablythemostwidelyusedDEAEcelluloseintheworld;usedforbiopolymerswithlowtohighnegativecharges;exhibitsexcellentresolutionwithgoodflowrates.
附件是一本图书(MethodsinMolecularMedicine,)的章节,上面说:
WhatmanDEAE52comesalreadypreswollenandonlyneedstobetransferred
totherunningbuffer50mMTE8.
lAntibodiesUsingIonExchangeChromatography.pdf(87.06k)
我按下面方法配制电泳 缓冲液： Tris-base15.1g 甘氨酸94g SDS5g H2O1000ml 听人说就这样配制，PH值就会在8.3左右，都不要怎么调PH的，但不知我这样配制后PH值在6.4左右？迷惑，配制了几次还是这样。本人初次做sds-page，请前辈们指教。 另外Tris是以前师兄留下的，几年了已经，SDS也是以前的，但是没有开封，密封的很好。甘氨酸是新买进口封装的。会不会试剂过期的原因？
求助：我目前需用离子交换法进行蛋白质的分离和纯化，但是我不知道要纯化的蛋白质的等电点，怎么样选择柱料及洗脱 缓冲液呢？如果必须知道，有没有什么简便的方法测定蛋白质的等电点呢？谢谢
25倍电转 缓冲液的ph＝8.3真的不能调吗？听师兄说一次配好液后它的ph值就必须是8.3，不能再进行加酸或加碱调节，可我配了一天也没达到这个要求，用的是18g甘氨酸和3.64g的trisbase加dd水到100ml，总是ph值到8.8左右，在配过程中可以加热吗，不然太难溶解了，
看了GE公司的NiSephrose6FastFlow说明书，说bindingbuffer建议20mMsodiumphosphate,0.5MNaCl,pH7.4,elutingbuffer中是在bindingbuffer中加了高浓度的咪唑，我想问一下，这个怎么配制啊？那个sodiumphosphate是什么？磷酸钠溶液？貌似不具有缓冲性，磷酸钠 缓冲液？有可能，但是这个咋配啊？有我能想到的三个配制方法，想求助一下; 1.直接用固体磷酸钠配制成50mM的磷酸钠溶液，再调pH到7.4；（我们试着用这个做了下，发现挂不上柱） 2.配置磷酸钠盐缓冲液：按NaH2PO4：Na2HPO4以19：81的摩尔比配制成pH7.4的缓冲液？（附一张百度出来的配方 ） 3.如果是磷酸钠盐缓冲液，可以直接将50mM的NaH2PO4的水溶液用NaOH调成pH7.4吗？ 再者，2和3这两个方法配制的磷酸钠盐缓冲液有什么区别？最终效果是一样的吗？如果不一样，有什么理论的知识支撑呢？个人感觉是分析化学中酸碱理论中的缓冲液那里的知识。求帮忙解答这些疑问。 另外，我还想问一下，pH对于Ni柱对His-tagged的蛋白的分离纯化影响大吗？是怎么影响的？谢谢大家了！
纯化水药典2005版第二部 拼音名：Chunhuashui 英文名：PurifiedWater 【性状】本品为无色的澄清液体；无臭，无味。 【检查】酸碱度取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。氯化物、流酸盐与钙盐取本品，分置三支试管中，每管各50ml。第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml，第二管中加氯化钡试液2ml，第三管中加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。 硝酸盐取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管子50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液［取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1pgNO3）0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000006%）。 亚硝酸盐取本品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）lml与盐酸菜乙H肢溶液（0．l＋100）1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μgNO2）]0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000002%）。 氨取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml）1.5ml，加元氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深（0.00003%）。 二氧化碳取本品25ml，置50ml具塞量筒中，加氢氧化钙试液25ml，密塞振摇，放置，小时内不得发生浑浊。 易氧化物取本品100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后，加高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。 不挥发物取本品100ml，置105℃恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105℃干燥至恒重，遗留残渣不得过1mg。 重金属取本品50ml，加水18.5ml，蒸发至20ml，放冷，加醋酸盐 缓冲液（pH3.5）2ml与水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液1.5ml加水18.5ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.00003%）。 微生物限度取本品，采用薄膜过滤法处理后，依法检查（附录ⅪJ），细菌、霉菌和酵母菌总数每1ml不得过100个。 【贮藏】密闭保存。 【化学成分】本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的供药用的水，不含任何附加剂。 【分子式与分子量】H2O18.02 【药理作用】溶剂、稀释剂 这里药典纯化水标准中并无PH值项目，请问对纯化水有PH值的要求吗，范围应在多少？请说明出处？ 在纯化水检测中，检验酸碱度合格，但是发现PH在8左右。如果按以上标准检验合格，是否要考虑PH值？请知道的解答，谢谢！
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