请使用支持JavaScript的浏览器! +,NEB/ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer Pack/B9005S/6 ml (4 x 1.5 ml),上样缓冲液,NEB,New England Biolabs,,10X,6 ml (4 x 1.5 ml)蚂蚁淘商城
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NEB/ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer Pack/B9005S/6 ml (4 x 1.5 ml)
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NEB/ThermoPol® II (Mg-free) Reaction Buffer Pack/B9005S/6 ml (4 x 1.5 ml)
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10XThermoPolII(Mg-free)ReactionBufferandsupplementalMgSO4areoptimizedforusewithVentR®andDeepVentR™DNAPolymerases.Thisbufferandsupplementalsoprovidesuperiorreaction conditionsforotherthermophilicDNApolymerases,includingTaqDNAPolymerase,aswell asvariousotherDNAandRNAmodifyingenzymes.TheMg-freereactionbufferandsupplementalMgSO4areprovidedforusersthatrequirecompletecontroloverMg2+concentrationtooptimizetheirspecificapplication.Seeindividualproductdescriptionsfortherecommendedbufferfor eachenzyme,orvisittheFAQpageforthisproductontheNEBwebsiteforacompletelistofenzymesforwhichthisbufferiseitherrecommendedorcompatIBLe.

ReagentsSupplied

Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

Storeat(°C)Concentration
MagnesiumSulfate(MgSO4)Solution-20100mM
ThermoPol® II(Mg-free)ReactionBufferPack-2010X
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2019-01-31
上样缓冲液 DNAII是由上海美吉生物医药科技有限公司代理或销售的Applichem原装品牌的试剂,产品来源于Applichem。上海美吉生物医药科技有限公司是中国最权威的上样缓冲液 DNAII试剂销售服务商之一,在上海等地方销售上样缓冲液 DNAII试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业上样缓冲液 DNAII仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的上样缓冲液 DNAII产品 查看更多>
上海沪震实业有限公司在发布的蛋白示踪上样缓冲液(还原,5×)供应信息,浏览与蛋白示踪上样缓冲液(还原,5×)相关的产品或在搜索更多与蛋白示踪上样缓冲液(还原,5×)相关的内容。 查看更多>
AG-10T-0020-L0011 mladiAdipogenAdipogen/Loading Buffer (5X)/AG-10T-0020-L001/1 ml 查看更多>
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在基因操作中,把DNA或RNA、蛋白质等在薄膜滤器上先经浸润,固定后,于薄膜滤器上进行杂交,生成杂种分子。为基因操作中最常用的技术。... 查看更多>
Description: 50% Glycerol, 1mM EDTA, 0.6% Bromphenol blue, and 0.6% xylene cyanol, 20 ml, 10 pack Application: Suitable electrophoresis and blotting applications. Shipping Conditions: Ambient. Storage Conditions: Room Te 查看更多>
ABIN11130355 mLantibodies-onlineAntibodies-Online,inc.Antibodies-Online/Native Gel Sample Loading Buffer (5x)/ABIN1113035/5 mL 查看更多>
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我做的是明胶酶谱实验,开始用以前师姐剩下的还原型上样缓冲液(成分不详)上样组织蛋白酶,电泳后洗脱掉SDS,置入反应液中,酶可以在相应位置降解明胶,这次换了新的上样缓冲液,就是含巯基乙醇的,可是电泳后酶却不能降解明胶了,不知道这个巯基乙醇打开蛋白质的结构后,对酶的活性有没有不可逆的影响,如果有的话,是不是要换一种上样缓冲液了?谢谢
上样缓冲液中甘油与溴酚蓝的左右分别是
① 上样缓冲液中包括甘油,溴酚蓝,SDS等,甘油主要作用是防止样品漂浮出点样孔,溴酚蓝作为电泳指示剂,用来观察电泳进度,SDS用于一些核酸结合蛋白的变性解离.
②核酸染料与凝胶中核酸结合,以便于在紫外光下显示核酸条带.

提了蛋白,加上样缓冲液煮过,但发现还是有很多胶状的沉淀,比较黏稠,堵枪头。于是自作主张又超声了一次,结果跑了一次,内参都没有。煮过之后的蛋白不能超声么?

4×和5×的上样缓冲液区别
蛋白上样缓冲液
蛋白电泳上样缓冲液包括2%SDS , 0.1%溴酚蓝 10%甘油,SDS是保证样品中的所有蛋白带电荷一致,减少电荷对电泳结果的影响。还原剂是让二硫键处于断开状态,保证蛋白分子的线性.
溴酚蓝作用是指示上样蛋白的跑胶时标记的,甘油是增加上样重量的,以免漂浮,煮沸是使蛋白变性的永久保存
(以下内容仅供参考)
2乘SDS-PAGE上样缓冲液(20ml体系)
1.0mol/L Tris-HCL (pH 6.8) 2ml
1.0mol/L DTT 4ml
SDS 0.8g
溴芬蓝 0.04g
甘油 4ml
dd水 定容至20ml
4℃冰箱保存,可以不分装,我们实验室一般用三个月以上
先配1.0mol/L的DTT,双蒸无菌水溶解4℃冰箱保存,配上样缓冲液的时候加入就可以了,都混匀保存也没问题的
上样缓冲液是4×,上样体积是24微升,则上样缓冲液应该是6微升。如果不按这个比例,多加或者少加有什么影响呢?谢谢
total:10ml 4度下保存:
1mol/l Tirs-HCl(PH8.8) 0.6ml
10%SDS 2ml
50%甘油 5ml
2-巯基乙醇 0.5ml
1%溴酚兰 1ml
水 0.9ml
另外:SDS不好溶解建议加热溶解,如果要做非还原SDS-PAGE请将2-巯基乙醇 0.5ml换成超纯水即可

实验小白刚刚起步,一般采用等质量上样的方法,但我算的上样量是没加缓冲液之前的,加完缓冲液蛋白样品浓度会变么?师姐说不会变,就按照算好的上样量加就行。

前几天提的样按50ug算每个样本的上样量也只有上5ul左右,按师姐说的就那么上了,结果发完光只有内参有条带,目标蛋白一点也没有,但以前做过一次是出过一点趋势的,而且这次整个过程感觉做的很仔细,发完光结果也很干净整齐,所以我在想是不是跟上样量有关系?上样缓冲液加入之后会使样本浓度稀释五倍么,这样的话上样量就得乘5。

变性前后加上样缓冲液的区别是什么呢?哪一种会改变蛋白浓度从而改变上样量呢?


找公司合成了一个30AA的阳离子多肽(纯度90%),加水溶解至6ng/μl,加入2x上样缓冲液后,立即出现沉淀,加热至99度10分钟仍不溶解,离心取上清电泳,蛋白Marker条带清晰,样品无条带形成,在预期位置的上方10~15kd处出现弥散状着色区,请问:
1)为何出现沉淀,怎样才能避免沉淀的出现?
2)为何没有预期大小的3.5kd条带出现?10~15kd处可能是什么?是不是分子聚合?若是分子聚合,怎样解聚?
凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
dna上样缓冲液和rna上样缓冲液可以通用。
因为DNA和RNA链上的碱基都基本一致。而这两种上样缓冲液中含有的染料是二甲苯青和溴酚蓝,都可以与其碱基结合,跑出条带。
但是,如果使用DNA上样缓冲液,里面会夹杂一些RNA酶,这些酶有可能会影响到实验结果。使用前需要将RNA酶处理掉。
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