四水八硼酸二钠_化工百科
| 实验方法原理 | |||||||||||
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| 实验材料 | 组织样本冰冻切片置于载玻片上 试剂、试剂盒 | PBS第一抗体5〜10μgmL第二抗体特异性针对第一抗体的抗体突光染料结合物封片介质（如Gelvatol) 仪器、耗材 | 塑料玻片盒或加湿盒 实验步骤 | 1)将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒。从冰冻切片机或冰箱取出载有切片的载玻片，交叉放入玻片盒（每边约6片）或加湿盒中。勿使载玻片相互接触。 2)待载玻片达到室温且未干时，于切片上铺加PBS，勿使溢出玻片。 3)稀释的第一抗体于4℃用微量离心机以13500g离心2min(每一载玻片上加40〜50μL抗体，应能盖住切片）。 4)用与泵相连的巴斯德吸管，在切片的一端吸去玻片上的PBS，并从另一端加上抗体，盖上加湿盒，室温温育1h。 5)以PBS洗玻片3次（5min/次)。 6)稀释的第二抗体于4℃用微量离心机以13500g离心2min。以每载玻片40〜50μL抗体计。 7)将第二抗体加于切片上，置加湿盒中室温温育1h。以PBS洗玻片3次（5min/次)。 8)将盖玻片放于纸巾上，滴加1滴Gelvatol于盖玻片中央。翻转载玻片放于盖玻片上，勿施压。将玻片置工作台上，用铝箔覆盖避光放置30min，使Gelvatol凝结。 9)显微镜下观察结果，或置玻片盒中储于4℃。 注意事项 | 其他 | |
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发布于 ： 2018-08-06
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