Description: | Live cell studies of cellular DNA content and cell cycle distribution are useful to detect variations of growth patterns due to a variety of physical, chemical, or biological means, to monitor apoptosis, and to study tumor behavior and suppressor gene mechanisms. In a given population, cells are distributed among three major phases of cell cycle: G0/G1 phase (one st of paired chromosomes per cell), S phase (DNA synthesis with variable amount of DNA), and G2/M phase (two sets of paired chromosomes per cell, prior to cell division). DNA content can be measured using fluorescent, DNA-selective stains that exhibit emission signals proportional to DNA mass. Flow cytometric analysis of these stained populations is then used to produce a frequency histogram that reveals the various cell cycle phases. This analysis is typically performed on permeabilized or fixed cells using a cell-impermeant nucleic acid stain, but is also possible using live cells and a cell-permeant nucleic acid stain. The CellCycle™ Blue stain is DNA-selective, cell membrane-permeant, and nonfluorescent stain for DNA content analysis in living cells. The CellCycle™ Blue stain is fluorescent upon binding to double-stranded DNA. CellCycle™ Blue stain is excited using both UV and 405 nm laser with emission ~460 nm. The staining protocol is simple and includes incubating suspended cells in the presence of CellCycle™ stain and directly measuring the fluorescence without the need for any additional treatment or centrifugation steps. This live cell stain allows the simultaneous co-staining of the cell population for other parameters, and allows for the possibility of cell sorting based on DNA content. |
Order #: | A053-ABP |
Unit Size: | 100 assays |
Supplier: | ABP Biosciences |
Shipping: | RT |
Storage: | 2~8℃ |
Subcategory: | Cell Cycle |
More information: | Go to webpage |
MoBiTecGmbH是一家私人控股公司,由StephanDiekmann教授于1987年创立。与Max-Planck学会的密切关系以及德国领先的研究中心之一哥廷根的所在地促进了与某些研究中心的密切合作。德国最具创造力的科学家。此外,MoBiTec一直与欧洲和北美的科学家广泛合作,包括法国巴斯德研究所和荷兰Vrije大学的科学家。通过将许多研究人员的精彩创意商业化,MoBiTec能够提供一系列独特的高质量产品和简化的协议,使实验室生活更轻松,并为实际研究留出更多时间。MoBiTec的产品包括e。G。用于体内检测蛋白质-蛋白质或DNA-蛋白质相互作用的双杂交系统,用于筛选特定肽配体的噬菌粒展示系统和选择具有特异性结合特性的新蛋白质,方便的LamBDaPS基因组文库用于克隆的多功能DNA载体,表达和分析靶基因,有效表达和纯化重组蛋白的试剂盒,细胞转染试剂和细胞培养工具,固定化和可溶性酶,许多用于基因组学和蛋白质组学研究的产品(例如用于PCR,核酸和蛋白质纯化和分析),众多抗体,细胞因子,生长因子和重组蛋白,优质荧光试剂和试剂盒(如蛋白标记试剂盒,标记抗体,细胞染色试剂,柱和凝胶电泳附件)。与其自有产品线并行,MoBiTec分销德国多家国际公司的产品,包括荧光探针和研究化学品(AnaSpec,TEFLabs),量子点,各种DNA纯化试剂盒和DNA聚合酶(EdgeBio),诊断工具(ZJBioTech)),凝胶电泳配件(Amresco,ClareChemical),糖生物学产品(DextraLaboratories,Sumitomo),细胞转染试剂(Mirus)以及抗体,蛋白质,底物,精细化学品和分子和细胞生物学试剂盒 -特别是病毒学,免疫学,神经生物学,细胞凋亡,信号转导,细胞增殖,细胞毒性和癌症研究(MBLI,AGScientific,Amresco,AdarBiotech,AnaSpec,Echelon)。MoBiTec提供全面的服务,从清晰完整的产品文档开始,为客户提供个性化的建议和技术服务。MoBiTec产品通过MoBiTec的总部在德国分销,在其他国家由分销商分销。此外,MoBiTec不断寻求新产品和可销售的许可技术,因此对科学合作非常感兴趣,以开发创新的产品理念。
MoBiTec拥有来自欧洲和北美的研究人员,包括法国的Pasteur研究中心和荷兰的Vrije大学的科学家。MoBiTec公司能提供独一无二的高质量产品,从而简化实验设计,而留出更多更宝贵的时间用于实际的研究。产品包括:双杂交和单杂交系统——体内蛋白-蛋白和DNA-蛋白关系,噬菌体展示系统——筛选特殊的多肽配体和选择具有特异性结合特性的新的蛋白质,LamdaPS基因文库,用于克隆的多功能DNA载体,靶基因的表达与分析,重组蛋白质高效表达和纯化试剂盒,细胞转染试剂和细胞培养工具,各种固体和溶解状态的酶,基因组学和蛋白组学研究产品(PCR,核酸,蛋白质纯化分析),各种抗体、细胞因子、生长因子、重组蛋白质,高级荧光试剂和试剂盒(蛋白质标记试剂盒,标记抗体,细胞染色试剂,钙指示器),亲和层析仪,凝胶分析工具——凝胶柱和凝胶电泳附件。
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
取片剂一片,照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录ⅩC第三法),以水250ml为溶剂,转速为每分钟50转,依法操作,分别经15、30、45、60、75、210分钟取溶液滤过,精密量取续滤液5ml于分液漏斗中,加入pH7.4磷酸盐缓冲液5ml,5ml0.3%溴麝香草酚蓝溶液,用15ml氯仿分两次萃取,合并萃取液,加入0.4g无水硫酸钠,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅥA),在410nm波长处测得溶出A值。现15、30、45、60、75、210分钟溶出A值分别为0.0413、0.0544、0.0437、0.0479、0.0394、0.0302。(测定吸收度偏小是否不准,有影响。)
请各位站友指教。
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB(溴化乙锭,高致癌性),goldview,sybr green(实时定量PCR时常用染料).这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等,它们多从植物体中提取得到,其成分复杂,有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料,也称煤焦油染料,多从煤焦油中提取获得,是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类,难溶于水,而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水,通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为酸性染料、碱性染料、中性(复合)染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
二苯胺
甲基绿派洛宁
还有一种忘了。
假期没法联系老师呵呵。
这三种的作用都是什么。
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红(龙胆紫、改良苯酚品红) 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色(不常用)
前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:
GoldViewTM核酸染料——使用说明
概述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA,也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2.加入5µlGoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
问题1.Goldview到底是不是丫啶橙?
2.赛百盛不公布其成分的原因是害怕其为丫啶橙还是出于技术保密?
而且样品中的无水硫酸钠未变色,而做标准曲线的五个和空白对照的变为蓝色了,请高手指教,多谢!
还有,是否变蓝对测定结果有影响吗?
谢了哈
欢迎你!请下次规范发贴:)
请各位大侠给予帮助!!
谢谢!!
健那绿——高中唯一一个活体染色剂。染线粒体的,染成蓝绿色
1、快讯上是Invotrogen公司的SYRBGOLD,不过500ul/1390元,实在有点贵,为了查用量;
2、结果又查出赛百盛的GoldViewTMDNA染料1ml/100元;
3、还有一种在日光下即可看出DNA条带的上海华舜生物工程有限公司的LightBluedye;
为了一个EB,居然不小心查出三种染料,而对这三种染料的评价也褒贬不一,我个人希望找个毒害小些,而且灵敏度还不能低于EB,价格方面也能让老板接受的来。
而对这三个染料,我有三个问题:
1、SYRBGOLD的用量问题,500ul能用到200次吗(我一般一次用30ml的胶,配在胶中)?
2、GoldViewTMDNA染料的成分是否如有些人所说的就是丫啶橙(能举出确切证据吗)?
3、LightBluedye灵敏度如何?能比得过EB吗?