【求助】酸性染料比色法测定总生物碱含量中遇到的问题
2007-03-31
问题描述：
我在做中药提取物中总生物碱含量测定,用的是酸性染料比色法,两次试验在处理样品时,同样的重量,同样的溶剂量,只是最后在调节PH值时一次用的是氨水调到9-10,一次用的氢氧化钠溶液调到9-10,但是发现用氨水调的溶液测定值明显比氢氧化钠调的要高得多,这是怎么回事呢?有同学说氨水可能有部分也与酸性染料形成络合物了,但是我的供试液是经三氯甲烷萃取,挥掉三氯甲烷,再用无水乙醇定容的,应该不会存在这种可能的.请教各位大侠,这是什么原因呢?
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PH_H100
用户
响应号召来讨论0回复贴:)1、原因是氨水不仅调节了 pH值，还参与反应生物碱+酸性染料的络合反应了，使得最后产生紫外－可见（你没说波长）吸收的物质的结构不一样。2、酸性染料或生物碱和氨水反应，生成了另外一种物质，这种物质能溶解在三氯甲烷重，被萃取了出来，而且在你的波长处有吸收。紫外可见没有分离功能，所以一并被测了出来。不过，本人不才，有个疑问，你难道没做空白么？另外，你没说你的试验方法，连波长都没有，怎么会有人回复呢？我是响应号召来的。
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防风半夏
用户谢谢楼上的，的确没有说清楚，以后会注意的。
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