The 3G3 antibody reacts with mouse Foxp3, a 50-55 kDa transcription factor which is a central regulator of T cell activity and is critical for the development and function of regulatory T cells (Tregs). Foxp3 is expressed at constitutively high levels in Treg cells, which are further identified as being CD4+ CD25+. In resting conventional T cells (CD4+ CD25-) Foxp3 expression is restricted, and upon TCR activation is expressed only transiently and in a small proportion of cells. However, the growth factor TGF-beta has been shown to induce expression of Foxp3 in na-ve T cells, driving their development into Foxp3+ Tregs, which are called -induced- or -adaptive- Tregs. These cells are phenotypically similar to so-called -natural- Tregs (CD4+ CD25high Foxp3+) which originate in the thymus and comprise the majority of Treg cells. Tregs are critical for maintaining peripheral tolerance and are implicated in the development of autoimmunity.
It is important to review the literature in choosing an antibody for the Foxp3 antigen in flow cytometry, as the potential for high background or non-specific staining may be observed. The 3G3 antibody may be used for intracellular detection of Foxp3 in cells from mouse and Rhesus macaque.
Ramos RN, Oliveira CE, Gasparoto TH, et al. 2012. Carcinogenesis. 33: 902-909. (Flow cytometry)
Klein M, Vaeth M, Scheel T, Grabbe S, Baumgrass R, Berberich-Siebelt F, Bopp T, Schmitt E, and Becker C. 2012. J. Immunol. 188: 1091-1097. (Flow cytometry)
Ansari AA, Reimann KA, Mayne AE, Takahashi Y, Stephenson ST, Wang R, Wang X, Li J, Price AA, Little DM, Zaidi M, Lyles R, and Villinger F. 2011. J. Immunol. 186: 1044-1059. (Flow cytometry - Rhesus macaque)
Nagar M, Vernitsky H, Cohen Y, Dominissini D, Berkun Y, Rechavi G, Amariglio N, and Goldstein I. 2008. Int. Immunol. 20: 1041-1055. (Flow cytometry)
Hombach AA, Kofler D, Hombach A, Rappl G, and Abken H. 2007. J. Immunol. 179: 7924-7931. (Flow cytometry).
Gavin MA, Torgerson TR, Houston E, deRoos P, Ho WY, Stray-Pedersen A, Ocheltree EL, Greenberg PD, Ochs HD, and Rudensky AY. 2006. Proc Natl Acad Sci USA. 103(17): 6659-6664. (Flow cytometry)
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请各位大侠给予帮助！！
谢谢！！
而且样品中的无水硫酸钠未变色,而做标准曲线的五个和空白对照的变为蓝色了,请高手指教,多谢!
还有,是否变蓝对测定结果有影响吗?
谢了哈
欢迎你！请下次规范发贴:)
二苯胺
甲基绿派洛宁
还有一种忘了。
假期没法联系老师呵呵。
这三种的作用都是什么。
健那绿染液是一种活体染液，实验对象必须是活细胞，健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
1、快讯上是Invotrogen公司的SYRBGOLD，不过500ul/1390元，实在有点贵，为了查用量；
2、结果又查出赛百盛的GoldViewTMDNA染料1ml/100元；
3、还有一种在日光下即可看出DNA条带的上海华舜生物工程有限公司的LightBluedye；
为了一个EB，居然不小心查出三种染料，而对这三种染料的评价也褒贬不一，我个人希望找个毒害小些，而且灵敏度还不能低于EB，价格方面也能让老板接受的来。
而对这三个染料，我有三个问题：
1、SYRBGOLD的用量问题，500ul能用到200次吗（我一般一次用30ml的胶，配在胶中）？
2、GoldViewTMDNA染料的成分是否如有些人所说的就是丫啶橙（能举出确切证据吗）？
3、LightBluedye灵敏度如何？能比得过EB吗？
前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:
GoldViewTM核酸染料——使用说明
概述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA，也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。
2.加入5µlGoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用GoldView染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用，但对皮肤、眼睛会有一定的刺激，操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
问题1.Goldview到底是不是丫啶橙？
2.赛百盛不公布其成分的原因是害怕其为丫啶橙还是出于技术保密？
健那绿——高中唯一一个活体染色剂。染线粒体的，染成蓝绿色
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
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