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siRNA细胞转染操作步骤
发布人 hbhdaj   发布时间 2021-08-03
最近在做movas转染siRNA，用的是lipo2000，siRNA终浓度100nM，转染时细胞密度60%，80%，90%都尝试过，转染后6h换液，24h提RNA，效果一直不好，最好的时候沉默效率60%左右，非常崩溃
结肠肿瘤_可以看出哪一期
发布人 dxy_h2lc4whq   发布时间 2021-08-03
如题，本人在做结肠肿瘤细胞时，每次从医院拿回来的组织都只有一指甲盖大小，我是剔除肉眼可见的一些血丝之类的，然后就进行处理了，不知道这样对不对，有没有清除干净，不知道大家在做肿瘤原代时，是怎么判断那一部分是肿瘤组织，有什么建议么？大家可以分享自己的经验。
mRFPEGFPLC3稳转细胞株构建 肿瘤医学讨论版 专业医生社区...
发布人 longmed   发布时间 2021-08-02
相关疾病：心力衰竭范可尼贫血心肌梗死癌症mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建质粒来源：Addgene#21074(载体pEGFP...
如何构建重组质粒转染后稳定表达的细胞系 分子生物 ...
发布人 元超瞄   发布时间 2021-08-02
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
我猜你不知道,细胞转染率低是因为这个上海中洪博元
发布人 autumn--1989   发布时间 2021-08-02
影响转染试验的因素：1转染试剂跟细胞系不匹配转染试剂跟细胞系也是讲究配合默契的，使用同一种试剂，不同细胞系转染效率通常不同。但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然，最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。2细胞状态变化因为有些细胞系是不稳定的，可能随着培养时间的改变，培养条件的不同，不同的选择压力，可能引起不同的克隆选择。因此就算是...
原代细胞培养和传代培养的方法及其
发布人 longshao2014   发布时间 2021-08-02
我目前培养大鼠原代食管上皮细胞，虽然已经分离出来（细胞量很少），但是后期细胞不增殖，3-4天细胞就死掉了。我用的培养是基础培养基添加一些细胞因子。请问是培养基的问题，还是操作的问题？如果是培养基的问题，应该添加哪些细胞因子，或者购买哪个牌子的培养基？在线等，急！！！
【求助】瞬转、稳转? 细胞技术讨论版论坛
发布人 zjliuzj   发布时间 2021-08-01
制备成功稳定转染细胞株后，能否再用瞬时转染的方法转入其它质粒？
传代细胞和原代细胞的克隆难易
发布人 轮回决濦   发布时间 2021-08-01
原代细胞，即原代培养的细胞，也就是培养不超过10次的细胞，是细胞培养的一个阶段传代细胞，即传代培养的细胞，也就是培养在10到50次之间的细胞，也是胞培养的一个阶段二倍体细胞就是细胞内含有两个染色体组的细胞，没什么作用，就是个二倍体。杂交瘤细胞是细胞融合的产物，用于制备单克隆抗体
细胞转染
发布人 忻忻相惜458   发布时间 2021-08-01
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。向左转|向右转
【求助】有没有哪位老师或同学在养乳腺癌细胞SKBR3 细胞技术...
发布人 hudingrong   发布时间 2021-08-01
我养的乳腺癌细胞株SKBR3状态不佳，细胞内含大量粗大颗粒，急死了。重新复苏细胞，结果全军覆灭。几十只都无法复苏成功。着急死了。故在此请教各位老师关于该细胞的冻存方法，是不是有什么特别的？我的冻存方法如下：常规消化离心细胞。冻存液即配即用：培养基：FBS：DMSO=7：2：1。4度放30分钟，-20度2小时，然后放到-80度。我养的另一只乳腺癌细胞MCF-7在此条件下可以成功复苏。复苏时温度38度左右，摇1分钟左右。请问我需要怎么改进？谢谢！如果您有养这株细胞的经验，请指教一二，包括我目前情况的...
原代细胞难转染怎么办？原代细胞转染注意事项 实验动物_中国实验...
发布人 rongtmrong   发布时间 2021-07-31
如题~~关于第一问能回答的详细点么？谢谢各位大虾~~
...85,高于正常值028,怎么理解,怎么办?请教一下_寻医问药网_xywy.com
发布人 380229836   发布时间 2021-07-31
患者信息：女22岁宁夏银川
siRNA干扰常见问题
发布人 有恃无恐0350   发布时间 2021-07-31
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
细胞转染 实验方法
发布人 一直攀爬的蜗牛   发布时间 2021-07-31
本人最近正在做质粒DNA的293T细胞转染，请问各位大神，有没有用过sigma的转染试剂，我们实验室买了，但是是凝胶状，不知道怎么用，请指教！
脂质体介导DNA转染法 实验方法
发布人 冷泪轩_韝   发布时间 2021-07-30
请教做过DNA 脂质体法转染细胞的高手DXY721认为：悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大，主要差别在于转染后的筛选，当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。其实转染的过程很简单，问题是能不能转的进去的，转染率能有多少，转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染，说明书上都有具体的操作过程，将脂质体和目的基因按比例混合，然后加到细胞悬液里就OK了，说的简单，实际上还是有一些细节要注意的，比如脂质体和目的基因混合的比例，转染的细胞数，细胞的代数，细胞的状态，有的...
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