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abfrontier/TaKaRa RNA LA PCR Kit (AMV) Ver.1.1/TaKaRa RNA LA PCR Kit (AMV) Ver.1.1/RR012A
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제품특징
□ 제품설명
본 제품은 RNA를 cDNA로 변환한 후에 PCR을 실시하기 위한 2 Step RT-PCR Kit로 AMV (Avian Myeloblastosis Virus) 유래의 역전사효소에 의해 RNA로 부터 cDNA 합성 그리고, TaKaRa LA Taq에 의한 cDNA의 증폭을 한 개의 tube 내에서실시할 수 있다.Oligo-dT Adaptor Primer는 poly(A)+ RNA의 3、말단으로부터 아주 높은 효율로 cDNA를 합성할 수 있도록 설계되어 있다. 따라서 3、- RACE법에 의한 미지의 3’말단의 증폭에 용이하다.
□ 특징
| RNA template | 모든 RNA |
| 증폭사이즈 | 12kb라지 증폭가능 |
| 역전사효소 | AMV Reverse Transcriptase XL (42~60℃에서 역전사가능) |
| DNA Polymerase | TaKaRa LA Taq |
| RNase Inhibitor | Kit에 포함 |
| 1st strand cDNA합성 | Random 9 mers, |
| 합성 Primer | Oligo dT- Adaptor Primer특이적 하류 primer 사용가능 |
| 3’- RACE법 | RT 반응 시 Oligo dT-Adaptor Primer, PCR 반응 시 M13 M4 Primer를 사용하므로써 3’- RACE법이 가능 |
| 조작 | 1개의 tube 내에서 반응가능, 열처리하여 역전사 효소 활성을 실활시킨 후 PCR한다. |
□ 내용 (100 회) *1
AMV Reverse Transcriptase XL*2 (5 U/㎕) | 50 ㎕ |
RNase Inhibitor (40 U/㎕） | 25 ㎕ |
Random 9 mers (50 pmol/㎕) | 50 ㎕ |
Oligo dT-Adaptor Primer (2.5 pmol/㎕) | 50 ㎕ |
RNase Free dH2O | 1 ㎖ |
TaKaRa LA Taq (5 U/㎕)㎕) | 25 ㎕ |
M13 Primer M4 (20μM) | 50 ㎕ |
10× RNA PCR Buffer *3 | 120 ㎕ |
10× LA PCR Buffer II (Mg2＋ free) | 5000 ㎕ |
dNTP Mixture (각 10 mM) | 150㎕ |
MgCl2 (25 mM) | 1㎕ |
Control F-1 Primer (20 pmol/㎕) (Positive Control RNA downstream primer) | 25㎕ |
Control R-1 Primer (20 pmol/㎕) (Positive Control RNA upstream primer) | 25㎕ |
Positive Control RNA (2×105 copies/㎕ )(pSPTet3 plasmid의 전사 poly(A)＋RNA) | 25㎕ |
*1 [10 ㎕ 역전사반응 → 50 ㎕ PCR반응]의 100회분*2 Life Sciences사 제조품이다.*3 100mM Tris-HCI (pH8.3), 500mM KCI.
□ 보존 -20℃
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-08-13
真核细胞结构组分的差异去垢剂分离实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》<link rel="stylesheet" type="text/css" h... 查看更多
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2021-08-27
厦门慧嘉生物科技有限公司在发布的 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent供应信息，浏览与 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent相关的产品或在搜索更多与 噻唑兰（MTT）去垢剂 -Detergent Reagent相关的内容。 查看更多
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2021-09-04
amresco去垢剂样品【1218】，amresco现货。Amresco公司来自美国，成立于 1976 年，为高质量生化试剂 / 试剂盒的生产商及供应商，产品服务于生物科研领域。用于体外诊断及医药中间体的美国 FDA 注册。amresco去垢剂样品【1218】021-61806666 33779006品牌：AMRESCO数量：大量保存条件：4℃供应商：AMRESCO保质期：1年amresco去垢剂样品【1218】CodeItem Des 查看更多
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2021-09-15
真核细胞结构组分的差异去垢剂分离实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。来源：《蛋白质与蛋白质组学实验指南》<link rel="stylesheet" type="text/css" h... 查看更多
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2021-08-19
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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2021-08-16
膜蛋白研究美国Anatrace是全球公认的膜蛋白研究用产品供应商,为膜蛋白提取与纯化提供高纯度生化产品,提供膜蛋白提取和纯化试剂,高纯的生化试剂和清洁剂,去垢剂等。徕创... 查看更多
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2021-09-06
去垢剂产品名称：去垢剂产品简介：上海通善生物是去垢剂最权威的供应商，提供去垢剂的报价，咨询，技术服务，欢迎来电021-61806666咨询选购。产品库存：现货。产品价格：询价。供 应 商：通善生物。供应商地址：上海市闵行区金平路788弄166号。去垢剂说明书：去垢剂其它信息：货号产品名称级别K610-1L0.1X SSC BUFFER WITH 0.2% SDS超纯级K611-1L0.1X SSPE BUFFER WITH 0.2% S 查看更多
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产品描述... ⍺DDM990(对应Anatrace货号D310HA) 1G n-Dodecyl-⍺-D-Maltopyranoside, Analytical Pure(⍺DDM) 380 徕创 ⍺DDM990(对应Anatrace货号D31... 查看更多
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2021-08-15
由于双向凝胶电泳对总蛋白具有杰出的分离能力，因此它能应用于所有类型蛋白质的分离。然而蛋白质的溶解性严重阻碍了许多种类蛋白质分析，尤其是膜蛋白的研究。主要是在提取和等电聚焦步骤出现这些问题，解决办法是设法改进在等电聚焦前溶解蛋白质的样品溶液。样品溶液经过离液剂和新去垢剂处理，从而提高蛋白质的溶解度。在膜蛋白质组学分析时加入这些化合物，是现在以及未来的讨论方向。 查看更多
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2021-09-03
显微镜耗材、玻璃量器、陶瓷搪瓷石英制品、病理一次性刀片、OCT冷冻包埋剂、日本羽毛刀片、德国莱卡刀片、英国珊顿刀片、美国伯舒纳刀片、樱花包埋剂、徕卡包埋剂、珊顿... 查看更多
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2021-09-09
由于双向凝胶电泳对总蛋白具有杰出的分离能力，因此它能应用于所有类型蛋白质的分离。然而蛋白质的溶解性严重阻碍了许多种类蛋白质分析，尤其是膜蛋白的研究。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。 查看更多
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麦迪康医疗用品贸易（上海）有限公司在发布的ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L供应信息，浏览与ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L相关的产品或在搜索更多与ANIOSYME DLT PLUS中性全效多酶清洁剂1L相关的内容。 查看更多
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我有0.1M PB 和30%Triton X100,怎样配制成PBS中含有1%的Triton ...123
狸TA07382017-10-02
Triton X-100是一种非离子型去垢剂分子式：C14H22O(C2H4O)n用途：Triton X-100是一种比较温和的去垢剂（表面活性剂或称界面活性剂）,常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白.性质：Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用.2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收（lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol）,因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量.3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象.4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS.5.Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存.6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体.7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0（5%的溶液）.8.Triton X-100可以高压灭菌.9.用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题.10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性.11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 .去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多.中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200；多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类；聚氧乙烯醇醚,如苄泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去；也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂.
【求助】非离子型去垢剂是否影响包被_问答详情_去垢剂_其他_生化试...123
xiaxia_xmu2011-02-14
各位战友好！我纯化一个膜蛋白，计划用来做单抗，但膜蛋白里含有一定浓度（0.1%左右）的tritonX-100，请问这样是否会影响包被呢？如果影响那有没有替代筛选方案？
使用胶做westernblot的方法资讯123
初音酱00242017-10-02
细胞膜是一层膜、两层磷脂分子层,或者细胞膜是磷脂双分子层,他基本结构是磷脂双分子层
去垢剂的类型有什么?区别?常见的123
小夕阳丶4Oy2017-10-02
常用的去垢剂有: 离子型去垢剂 非离子型去垢剂 两类.
如要膜蛋白保持原来的结构应采用：非离子型去垢剂.
如要膜蛋白保持原来的结构应采用：非离子型去垢剂.
去垢剂在膜蛋白研究中的应用 123
亡灵睾叹232017-10-02
蛋白质变性剂的作用是破坏蛋白质的次级键，如氢键、盐键和疏水力，引起天然构象的解体；它们并不破坏共价键，如肽键和二硫键，故不涉及一级结构的改变。变性剂有溶解型和沉淀型两类，SDS、尿素和胍盐是有效的溶解型变性剂，而三氯乙酸、甲醇、和氯仿/异戊醇是有效的沉淀变性剂。一般而言，变性剂应用时常大大过量，破坏氢键的变性剂用量至少两倍于氨基酸的克分子数，如1克蛋白质可可结合1.4g。 SDS溶于水可达25%，对温度敏感，W/V贮存液最为方便。需要注意的是SDS的钾盐是不溶性的，所以SDS溶液中要避免混入钾盐。 尿素极易溶于水，可达10mol/L,在8mol/L以上要注意温度以防止沉淀。尿素在水中缓慢分解形成氨及高度活性的氰酸离子，故要防止高温。 三氯乙酸与过氯酸（TCA，PCA）都是极好的沉淀剂，能沉淀蛋白质和核酸，前者应用更为广泛。
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
几种常用离子去垢剂的使用 123
血刺沫沫丶f硢2017-10-02
铬酸洗液：由重铬酸钾和浓硫酸配置，具有氧化性和酸性，用于清洗化学仪器上的污点
表面活性剂：通常由一个极性头和一个非极性尾组成，用于去除难溶于水的污渍
漂白剂：通常含次氯酸盐成分，原理为其氧化性
稀盐酸：用于去除碱性的污渍，如马桶中的结块
碳酸钠溶液：用于去除油渍，其原理为酯在碱溶液中水解，参见皂化反应
表面活性剂：通常由一个极性头和一个非极性尾组成，用于去除难溶于水的污渍
漂白剂：通常含次氯酸盐成分，原理为其氧化性
稀盐酸：用于去除碱性的污渍，如马桶中的结块
碳酸钠溶液：用于去除油渍，其原理为酯在碱溶液中水解，参见皂化反应
脱氧胆酸钠去垢剂123
我爱痕迹1012017-10-02
阳离子去垢剂
去垢剂的类型有什么？区别？常见的_问答详情_蚂蚁淘,【正品极速】...123
窝窝145圣战2017-10-02
离子型去垢剂 非离子型去垢剂 两类. 如要膜蛋白保持原来的结构应采用：非离子型去垢剂.
如何让蛋白质从去垢剂中释放 123
2017-10-02
去垢剂分离膜蛋白，最后是如何释放蛋白质而得到蛋白质的呢？
western出错原因123
tangzq2021-07-21
本人最近在做WB时遇到一个奇怪的问题
我要做的两个目的蛋白，分子量一个是140的，另一个是36，内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白，就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了，细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影，细胞蛋白的，两个目的和内参都出得挺好；但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了，36的那个显出来的像一片水渍一样，斑片状的黑，内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来，WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好，我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的，裂解液也加有PMSF，用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊！
我要做的两个目的蛋白，分子量一个是140的，另一个是36，内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白，就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了，细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影，细胞蛋白的，两个目的和内参都出得挺好；但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了，36的那个显出来的像一片水渍一样，斑片状的黑，内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来，WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好，我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的，裂解液也加有PMSF，用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊！
关于膜蛋白提取去垢剂选择的问题 蛋白质和糖学论坛123
李征宇2004-12-22
文献上都强调要选用强的去垢剂，不知道各位在这方面有什么心得吗？是不是需要同时使用多种去垢剂。关于SB3-10，ASB14等，大家有建议吗？我准备根据文献同时使用CHAPS和ASB14。大家看如何
【专题讨论】蛋白分离纯化及填料选择问题超强技术支持,尽管问:) ...123
chromatography2021-07-22
chromatography战友，
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白，大小40kd到200kd，机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子，用来分环肽。
如果分比较大的蛋白，有什么效果相对好的柱子，请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白，不知道会不会堵，洗不下来？
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白，大小40kd到200kd，机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子，用来分环肽。
如果分比较大的蛋白，有什么效果相对好的柱子，请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白，不知道会不会堵，洗不下来？
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