eCl@ss32110501
Properties:
| RelatedCategories | AnalyticalColumn,3μm,Analytical/Chromatography,DiscoveryHPLCColumns,DiscoveryHSF5,HPLC, |
| feature | endcapped |
| extentoflabeling | 12%CarbonloADIng |
| parameter | ≤70°Ctemp.range |
| application(s) | HPLC:suitable |
| L×I.D. | 10 cm×2.1 mm |
| surfacecoverage | 4 μmol/m2 |
| impurities | <10 ppmmetals |
Description:
FeaturesandBenefits
• Uniqueselectivity
• SimilarretentiontoC18(sometimesrequiresstrongermobilephase)
• Excellentpeakshape
• Stable,low-bleedLC-MSseparations
• Scalableseparationsfrom3to10μmparticlesizes
Generaldescription
GuidelinesfortransferringaC18methodtoDiscovery®HSF5:
Generally,basesareretainedlongerontheHSF5thanonaC18.IncreasingtheorganiccontentofaC18separation5to10percentwillgenerallyprovidesimilarretentiononanHSF5.Resultswithothercompoundsarehighlyvariable.However,itisgenerallytruethatsoluteswithlog Po/wvalueslessthan2.5willberetainedlongeronHSF5comparedtoaC18.Thedegreeofdifferenceishighlysolutedependent.
TheDiscovery®HSF5bondedphaseprovidesreversed-phaseseparationsthataredistinctlydifferentfromC18columns.However,compoundswillgenerallyelutewithinthesameretentiontimewindow,makingmostC18methodseasilytransferable.
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LegalInformation
DiscoveryisaregisteredtrademarkofSigma-AldrichCo.LLC
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B.阴离子去垢剂 常见的有十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸钠。前者可促进核蛋白的溶解,将核酸释放出来,并对核酸酶有一定抑制作用,常用于核酸的提取。
C.阳离子去垢剂 如洁尔灭、新洁尔灭、CTAB、CPC、ZEPH、克菌定、消毒净(TMPB)、杜灭芬等,消毒灭菌类居多。
D.天然表面活性剂 又称为生物表面活性剂,包括种类较为广泛,如各种树胶(阿拉伯胶、杏胶、桃胶、果胶)、明胶、皂甙、卵磷脂、豆磷脂、琼脂、海藻酸钠、酪蛋白、胆甾醇、胆酸类、多糖类(如环糊精)等。
E.两性表面活性剂 在碱性水溶液中呈阴离子表面活性剂的性质,起泡性好,去污力也强;在酸性溶液中则呈现阳离子表面活性剂特征,其杀菌性很强。向左转|向右转
RAW细胞,6孔板,RIPA提取蛋白(提前加好PMAF),每孔100uLRIPA,冰上用tip倒过来刮细胞,放置15min,12000gX15min离心,取上清。做WB时,沸水煮5min,胶冻样物质还是存在。
操作过程中发现离心后还是有胶冻样物质,和上清混在一起无法分开,严重的时候基本上全是胶冻样物质。
这个胶冻样物质应该是DNA,园友提供的方法为用超声碎裂器,但是我们实验室没有。请问还有别的方法可以使用么?
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白,大小40kd到200kd,机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子,用来分环肽。
如果分比较大的蛋白,有什么效果相对好的柱子,请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白,不知道会不会堵,洗不下来?

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