酸度取本品，加水制成每1ml中合2ng的溶液，依法测定(附录VI H)，pH值应为3.5~5.5 。阿莫西林聚合物照分子排阻色谱法(附录VH)测定。 色谱条件与系统适用性试验用葡萄糖凝胶MS-G10 (40~120μm)为填充剂，｛推荐使用Cef-SEC 5um 300*7.8mm｝不锈钢柱内径1. 0~1. 6cm，柱高度30-40cm。以pH8. 0的0.05mo1/L磷酸盐缓冲液[0.05mol/L磷酸氨二钠溶液-0.05 mol/L磷酸二氨钠溶液(95: 5)]为流动相A,以水为流动相B,流速为每分钟1.5ml,检测波长为254nm。分别以流动相A, B为流动相，取0.1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液200μl注入液相色谱仪，理论板数按蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于500。拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值应在0.93~1.07之间，对照溶液主峰和供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰的保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。称取阿莫西林约0. 2g置10ml量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml使溶解后，用0.3mg/ml的蓝色葡聚糖2000溶液稀释至刻度，摇匀。量取200ul 注入液相色谱仪，用流动相A进行测定，记录色谱图。高聚体的峰高与单体与高聚体之间的谷高比应大于2.0。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液200μl，连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0%。 对照溶液的制备取青霉素对照品适量，精密称定，用水溶解并定量稀释制成每1ml中约合0.2mg的溶液。测定法 取本品约0.2g。精密称定，置10ml量瓶中，加2%无水碳酸钠溶液4ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，立即精密量取200ul注入色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图。另精密量取对照溶液200μl注入色谱仪，以流动相B为流动相，同法测定。按外标法以峰面积计算，结果除以10,即得含阿莫西林聚合物以阿莫西林计，不得过0.15%(阿莫西林: 青霉素=1: 10)。 （含量测定）照高效液相色谱法(附录VD)测定 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用2mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5. 0)一乙睛(97.5: 2.5)为流动相，流速为每分钟约1ml;检测波长254nm。取阿莫西林杂质混合对照品和阿莫西林对照品各约25ng,置50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，取20ul注入液相色谱仪，记录的色谱图应与标准图谱一致 （测定法）取本品约25mg,精密称定，置50ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。另取阿莫西林对照品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算出供试品中C16H19N305S的合量。 【制剂】 （1）阿莫西林片 (2) 阿莫西林胶囊 (3) (3)阿莫西林颗拉 (4) (4)阿莫西林干混悬剂 下面是阿莫西林聚合物检测色谱柱的谱图： 阿莫西林（聚合物） Column: SRT SEC-150 ( 5 μm, 150 , 7.8 x 300 mm ) Mobile phase: 150 mM Sodium phosphate buffer ( pH 7.0 ) : ACN = 95 : 5 ( v/v ) Flow rate: 1.0 mL/min Detector: UV 254 nm Column temperature: Room temperature Injection volume: 10 μL Sample: 5 mg/mL amoxicillin in 150 mM Sodium phosphate buffer 中国药典规定了采用色谱法测定头孢他啶、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮钠、他唑巴坦钠、青霉素和阿莫西林等头孢药物中高分子杂质的含量。但是采用传统的玻璃低压凝胶色谱柱柱效非常低，很难达到药典规定的色谱柱的指标，同时该类色谱柱还有操作不方便、分离时间长、分离度差等不足。针对上述问题，成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分色谱柱在药典规定的基础上，成功开发聚合物检测专用G10凝胶色谱柱，能够满足药典规定的头孢药物中高分子杂质质量控制的需要，多年来用户使用得到很好的效果。目前国内外分离分析β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的主要方法是色谱法，应用的色谱分离模式包括反相、离子交换和凝集色谱等。由于结构不同的高分子杂质通常具有相似的生物学特性（如均为过敏性杂质），因此在药品质量控制中一般只需控制药品中高分子杂质的总量而不必控制不同结构的杂质。因此根据样品分子量差异进行分离的凝胶色谱法具有明显的优势。 成都摩尔公司提供的赛分色谱柱改进了此色谱柱的填法从简易干填法到现润湿填法，柱效从百量级提高到千量级(400mm长柱、葡聚糖2000),提高了柱饱和度，使柱子可靠性和耐用性大大的提高。 根据药典要求，MS-G10葡聚糖凝胶柱供应如下规格供选择： 300mm*10mm 300mm*13mm 300mm*14mm 300mm*15mm 400mm*10mm 400mm*13mm 400mm*14mm 400mm*15mm MS-G10头孢系列药物聚合物专用凝胶色谱柱，采用符合中国药典2005/2010/2015版头孢类药物聚合物的测试条件设计制作，用进口GE葡聚糖凝胶Sephadex G-10(40-120um)装填。只需配以高效液相色谱仪，即可准确、方便、快捷的完成头孢类系列药物聚合物的分析工作，可提高分析效率，确保样品分析结果的重现性。 使用时注意事项： 1.为避免管路中的有机溶剂和气泡进入凝胶色谱柱，先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入凝胶柱。 2.不要让有机溶剂进入柱中，否则会使填料脱水，导致柱床损坏， 要小流速开启泵，不要快速加大流速，以防止压力迅猛升高而导致柱床损坏。15mm的柱子流速不要超过3ml/min。 3.每次使用后务必用蒸馏水冲洗干净将含盐的流动相置换干净，若较长时间不用请按保存方法保存。 保存方法： 1.将凝胶柱用蒸馏水冲净后充上0.02%-0.05%的叠氮钠水溶液封存,或三氯丁醇(0.015%) 苯基汞代盐(0.001-0.01%)将色谱柱封闭后低温保存(温度在5 左右)在冰箱。 2.再次使用时,用蒸馏水将保护溶液冲洗掉即可使用。 3.如果第二天还要使用也要从系统中取下，将柱封闭后存于4~8度的冰箱中冷藏。 凝胶色谱柱的保养和再生： 由于高分子杂质含量较低，一般测量方法中均采用高浓度大体积进样来提高检测能力，多次进样后，样品可能在色谱柱中发生严重的非特异性吸附，有换流动相时进入有机溶剂或长时间水保存生菌都可能改变凝胶色谱柱的分离机制，同时导致色谱柱的堵塞，使柱压升高，此时必须精心保养色谱柱：用40度左右的温水变换流速冲洗几个小时。如效果不佳，再进行再生处理：用0.5MOL/L NAOH和0.5MOL/L NACL的混合溶液10-30倍的柱体冲洗，再用温水冲到中性。如使用过程中遇到任何问题，请不吝随时联系负责你单位的销售代表，谢谢！ 使用说明：为避免管路中的有机溶剂和气泡进入凝胶色谱柱，先用水冲洗整个色谱系统,然后才能接入凝胶色谱柱。接到柱子后，先用0.2molNaOH和0.5molNaCl混合溶液冲洗200ml左右后，再用水冲洗至中性。不要让微量有机溶剂进入柱中，否则会导致柱床损坏
