Abcore是一家生物技术公司,在全球范围内提供定制的多克隆抗体服务,并代表北美的欧洲小型生物技术公司。抗体服务在南加州的美国农业部许可的设施进行。Abcore公司总部设在加利福尼亚州圣迭戈,是生命科学发现和创新的中心。Abcoreisabiotechcompanythatprovidescustompolyclonalantibodyservicesworldwide;andrepresentssmallEuropeanbiotechcompaniesinNorthAmerica.AntibodyservicesareperformedinSouthernCaliforniaatUSDAlicensedfacilities.HeadquarteredinSanDiego,CA,Abcoreisatthecenteroflifesciencediscoveryandinnovation.
多克隆抗体定制服务|实验技术服务——pCzn1质粒+ArcticExpress宿主菌低温表达体系。我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧,承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信,我们提供原始的表达菌株和克隆质粒,客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。产品品牌: Abcore测序实验流程:A:(Cat.No.LA001)多肽→多克隆抗体多肽合成:纯度>75%,10mg,长度>15个氨基酸多肽与KLH偶联(2-3mg)抗体生产周期为12-15周,包括2只兔子,4次免疫亲和层析纯化抗血清终产品:2-3mg多肽;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:32,000)B:(Cat.No.LA002)基因→多克隆抗体基因扩增、载体构建、大肠杆菌系统蛋白表达免疫,亲和层析纯化抗血清抗体生产周期为14-17周终产品:质粒(带有目的基因);1mg蛋白;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果(>1:32,000)C:(Cat.No.LA003)酸化多肽→多克隆抗体多肽合成酸化多肽:纯度>95%,10mg,长度>15个氨基酸非酸化多肽:纯度>75%,10mg,长度>15个氨基酸酸化多肽与KLH或BSA偶联(2-3mg)非酸化多肽与BSA偶联抗体制备周期13-16周,包括2只兔子,4次免疫亲和层析纯化抗血清,去除非酸化抗体、纯化酸化特异性抗体终产品:免疫前血清收集;2-3mg多肽(未修饰肽和酸化修饰多肽);2-5mg***酸化特异性抗体;ELISA检测结果(效价>1:32,000)D:(Cat.No.LA004)Western检测保证多克隆抗体制备终产品:2-3mg多肽;1-2ml免疫前血清;2-5mg纯化后的抗体;ELISA检测结果>1:32,000;Western检测(1:200)以保证抗体来自其中一条多肽.目录号 价格/元 不同的路线 免疫前IP001 4500 客户提供抗原 1周IP002 5000 客户提供E.coli高表达质粒1-高表达蛋白位于包涵体。 2周IP003 5000 客户提供E.coli高表达质粒2-带有His-tag高表达蛋白位于上清。 2周IP004 6000 客户提供表达克隆模扳:例如全长基因克隆,CDNA或者genomicDNA。 3周IP005 6000 全合成219bp表达序列,引进E.coli优化表达公式,专门针对不易获得高表达的蛋白。 3周IP006 7000 多肽设计,合成,交联到载体蛋白作为抗原
当机体受到抗原刺激后,可产生抗体。抗体的特异性取决于抗原分子的决定簇,各抗原分子具有许多抗原决定簇。因此,由它免疫动物所产生的抗血清实际上是多种抗体的混合物。一分子蛋白质激素的表面存在多个不同的抗原决定簇,可同B淋巴细胞表面的相应受体结合。一个B淋巴细胞表面只能和一个抗原决定簇结合。一个静止的B细胞与抗原决定簇结合后即被活化并增殖和分化为一群合成和分泌抗相应抗原决定簇抗体的浆细胞,这一群细胞称为一个克隆。用经典动物免疫法得到的抗血清中含有多种由不同克隆产生的、抗不同抗原决定簇的抗体,称为PCAb。自身免疫性内分泌疾病患者血清中存在的抗某一自身抗原例如甲状腺过氧化物酶等的抗体,也可具有多克隆性质,也可称为多克隆抗体。UMO1(UBL1;MIM601912)是一种类似于泛素的蛋白质,可以与其他蛋白质共价结合。SENP2是一组酶,它将新合成的SUMO1加工成可结合的形式,并催化对含苏素的物种的分解。SENP6是SUMO/sentrin特异性蛋白酶,其功能是从缀合蛋白中去除SUMO。SENP6已经被证明是去SUMO化配体激活的转录因子成员,称为类视黄醇X受体a。RXRa的转录活性受SUMO化的调节。研究人员已经证明SENP6优于SUMO2/3缀合物而不是SUMO1缀合物。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)浓度为1mg/ml,缓冲=0.01MTBS(pH7.4),1%的BSA,0.03%的丙二醇和50%的甘油。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)免疫原为KLH共轭合成肽,由人类的SENP2衍生而来。预测的分子量68kDa。短期储存在4℃,长期储存在-20℃(避免重复冷冻/解冻循环)。Senp6core多克隆抗体(SUMO1sentrin特异性蛋白酶6)用于WB时稀释浓度为1:500-2000=1:500-1000,免疫组化实验时稀释浓度为1:100-500。
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免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
此法适用于小量抗体的荧光素标记,标记简便,非特异性染色较少。
(1)试剂和材料 试剂和材料同改良法。
(2)方法及步骤
①用0.025mol/L碳酸盐缓冲液pH9.0,将欲标记免疫球蛋白稀释成1%浓度,装入透析袋中。
②用同一缓冲液将FITC配成0.1mg/ml的溶液,按10mg/ml球蛋白溶液体积的10倍,将FITC稀释液盛于圆柱形容器内,并使透析袋浸没于FITC液中。
③容器顶端盖紧,底部放搅拌棒,在4~C电磁搅拌下透析标记24h。取出透析袋中标记液,即刻用SephadexG50凝胶过滤,去除游离荧光素,分装,贮存于4℃中。
免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。
1、直接法:这是最早的方法。其基本原理是用已知的抗体标记上荧光素后成为特异性荧光抗体,染色时将该抗体直接滴在载玻片上进行孵育,使之直接与载玻片上的抗原结合,在荧光显微镜下直接观察,作出判断。该方法评价:简单易行、特异性高、快速方便,常用于肾活检组织几种免疫球蛋白的检测和病原体的检测。但其不足是只能检测相应的一种物质,敏感性较差,效果有时不理想,目前较少作为更多方面的检测。
2、间接法:该法的基本原理是用特异性的抗体与切片中的抗原结合后,继用间接荧光抗体,与前面的抗原抗体复合物结合,形成抗原抗体荧光复合物。在荧光显微镜下,根据复合物的发光情况来确定所检测的抗原。该方法评价:由于结合在抗原抗体复合物上的荧光素抗体增多,发出的荧光亮度强,因而其敏感性强。目前本法应用较广泛,只需制备一种种属荧光抗体,即可适用于多种第一抗体的标记显示。
3、如果你有针对待查抗原一抗(荧光素标记),而且你的待检抗原表达也比较丰富的话,做直接法也未尝不可。不过如果你不具备上述两个条件的话,还是推荐你做间接法。
4、如果你做的是细胞骨架,那么就是用直接免疫荧光。如果是一般的蛋白表达,这个要看有没有试剂是直接标记的;如果没有,还是只能考虑间接荧光。直接荧光相对间接荧光可以避免非特异姓染色,当然步骤也少了些。我做过细胞骨架的直接染色,效果很好。
二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。
做荧光抗体试验时,定量测定荧光素的含量用到的是哪个波长?
荧光素是具有光致荧光特性的染料,荧光染料种类很多。目前常用于标记抗体的荧光素有以下几种:异硫氰酸荧光素,四乙基罗丹明,四甲基异硫氰酸罗丹明,酶作用后产生荧光的物质。
2.放射免疫检测放射免疫检测技术是目前灵敏度最高的检测技术,利用放射性同素标记抗原(或抗体),与相应抗体(或抗原)结合后,通过测定抗原抗体结合物的放射性检测结果.放射性同位素具有pg级的灵敏度,且利用反复曝光的方法可对痕量物质进行定量检测.但放射性同位素对人体的损伤也限制了该方法的使用.
3.酶联免疫吸附试验(ELISA)酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法.该方法是将二抗标记上酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng水平.常见用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)等.由于酶联免疫法无需特殊的仪器,检测简单,因此被广泛应用于疾病检测.常用的方法有间接法、夹心法以及BAS-ELISA.间接法是先将待测的蛋白抱被在孔板内,然后依次加入一抗、标记了酶的二抗和底物显色,通过仪器(例如酶标仪)定量检测抗原.这种方法操作简单但由于高背景而特异性较差.目前已逐渐被夹心法取代.夹心法利用二种一抗对目标抗原进行捕获和固定,在确保灵敏度的同时大大提高了反应的特异性.近年来,抗原的定量检测技术也不断推陈出新.近年来,在夹心法ELISA的基础上,开发了多抗原检测试剂盒,能同时检测微量液相样本中多个抗原含量.这项技术的应用大大缩短了诊断的时间,提高诊断的可靠性和及时性.
4.免疫金胶体技术胶体金技术经过30多年的发展到现在已日趋成熟,该方法是将二抗标记上胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上,此方法简单,快速,广泛应用于临床筛查.

