| Host | mouse |
|---|---|
| Antibody Type | monoclonal |
| Isotype | IgG2a |
| Clone | Bu5.1 |
| Immunogen | Bromodeoxyuridine |
| Purification | protein A affinity chromatography |
| Conjugate | unconjugated |
| Formulation | lyophilized; reconstitute in 1 ml dist. water (final solution contains 0.09 % sodium azide, 0.5% BSA in PBS buffer, pH 7.4) |
| Storage | short term at 2 – 8 °C; long term storage in aliquots at - 20 °C; avoid freeze/ thaw cycles |
| Tested species reactivity | tissue and cell culture after incorporation of BrdU |
| Tested applications | Tested dilutions |
|---|---|
| Immunocytochemistry (ICC)/ Immunofluorescence (IF) | 1:10 |
| Immunohistochemistry (IHC) - frozen | 1:10 (proteolytic treatment recommended) |
| Immunohistochemistry (IHC) - paraffin | 1:10 (proteolytic treatment and/or microwave treatment recommended) |
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按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体（能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上）。
按理化性质和生物学功能
按理化性质和生物学功能，可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。
IgM抗体是免疫应答中首先分泌的抗体。它们在与抗原结合后启动补体的级联反应。它们还把入侵者相互连接起来，聚成一堆便于巨噬细胞的吞噬；
IgG抗体激活补体，中和多种毒素。IgG持续的时间长，是唯一能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。他们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿得到保护；
IgA抗体进入身体的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。还可以通过母乳的初乳把这种抗体输送到新生儿的消化道黏膜中，是在母乳中含量最多，最为重要的一类抗体；
IgE抗体的尾部与嗜碱细胞、肥大细胞的细胞膜结合。当抗体与抗原结合后，嗜碱细胞与肥大细胞释放组织胺一类物质促进炎症的发展。这也是引发速发型过敏反应的抗体；
IgD抗体的作用还不太清楚。它们主要出现在成熟的B淋巴细胞表面上，可能与B细胞的分化有关。（IgD于1995年从人骨髓瘤蛋白中发现，分子量为175kD，主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生，人血清中IgD浓度为3～40μg/ml,不到血清总Ig的1%，在个体发育中合成较晚。IgD铰链区很长，且对蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短，仅2.8天。血清中IgD确切的免疫功能尚不清楚。在B细胞分化到成熟B细胞阶段，除了表达SmIgD，抗原刺激后表现为免疫耐受。成熟B细胞活化后或者活化后或者变成记忆B细胞时，SmIgD逐渐消失。）
按可见反应
按与抗原结合后是否出现可见反应，可将其分为：在介质参与下出现可见结合反应的完全抗体，即通常所说的抗体，以及不出现可见反应，但能阻抑抗原与其相应的完全抗体结合的不完全抗体。
按抗体来源
按抗体的来源，可将其分为天然抗体和免疫抗体。
抗体就是免疫球蛋白，是改变了的球蛋白分子。由特异性抗原刺激产生，抗体的产生是由于抗原侵入人体后引起各种免疫细胞相互作用，使淋巴细胞中的B细胞分化增殖而形成浆细胞，浆细胞可产生分泌抗体。
按抗体发展
单克隆抗体的发展经历了四个阶段，分别为：鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体。
鼠源性单克隆抗体：鼠杂交瘤单克隆抗体主要是将来源于免疫接种过的小鼠的B 细胞与骨髓瘤细胞融合，继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的鼠杂交融合细胞，进而进行筛选、抗体制备和抗体纯化。
嵌合性单克隆抗体：指用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成一个人-鼠杂合的抗体。其研制程序快，可大幅度降低异源抗体的免疫原性，却几乎保持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力。另外，它还具有人抗体的效应功能，如补体固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC）等。
人源化单克隆抗体：利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用。
全人源单克隆抗体：其抗体的可变区和恒定区都是人源的，去除免疫原性和毒副作用。全人源抗体制备的相关技术主要有：人杂交瘤技术、EBV 转化 B 淋巴细胞技术、噬菌体显示技术（phage display）、转基因小鼠抗体制备技术（transgenic mouse）和单个B细胞抗体制备技术等。
由人源化和全人源抗体制备的人源化和全人源抗体药物因其具有高亲和力、高特异性、毒副作用小的特点，克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点，已经成为了治疗性抗体药物发展的必然趋势。展开
其主要作用就是人体的防御军队，抵抗外来的病毒、细菌的侵袭。
（London-Science.com原创，转载需注明来源，原文地址：http://www.london-science.com/archives/1053）
请想象一下，上百只兔子，老鼠甚至是山羊等动物拥挤在狭小的笼子和窝棚中，吃着劣质的饲料，忍受着病痛的折磨，还要定期被注射针剂，抽取血清。履行完“使命”的动物们甚至要接受安乐死。这是一幅多么可怕的景象！而我们经常使用到的抗体，有很大一部分就是这样被制造出来的。
7月21日，数位科学家在Cell的子刊TrendsInBiotechnology发表文章，揭示了传统抗体生产方式给动物福利带来的严重危害，并呼吁各界使用噬菌体病毒技术来替代动物生产抗体，以保护动物福利。文章指出，尽管这种技术与传统的动物生产模式相比有众多的优点，但还是被人所忽视。人道主义行为，并不一定以牺牲生产力作为代价。改变人们的观念，与改进技术同等重要。
残酷的现实
抗体是一种最常用的生物试剂-不仅仅在基础科研领域，它们也被广泛应用在疾病诊断，临床治疗等各个方面。生物医学领域对抗体的种类和数量有很大的需求。举例来说，仅人类基因组就有20000-25000个编码蛋白质的基因，而mRNA剪切，翻译后修饰等生物过程又会产生许多蛋白质的变体，将蛋白质种类扩大10倍以上。如果要检测这些蛋白质，就必须用到相对应的抗体—强烈的需求创造出了这个发达的市场—全球共有超过200万种科研抗体产品，仅在欧美就有300余家科研抗体供应商（详见：2016年全球科研抗体行业报告）。据估计，整个抗体相关市场规模高达800亿美元以上【1】。
而传统的抗体生产方法极大地依赖于动物。用于抗体生产的动物们会接受免疫—被注射抗原和佐剂，激发体内抗体的产生—然后从腹水中分离目标抗体（多克隆抗体），或从肾脏中提取淋巴B细胞，与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，进而从中提取出目标抗体（单克隆抗体）。
在全球，有上百万只动物被用于抗体的生产和研发。据统计，英国在2013年共有9522只动物被用于抗体生产。而在荷兰，这个数字高达25697只【1】。尽管随着文明的进步，动物福利被越来越多的公司所重视，可还有一些利欲熏心的抗体供应商违背法律和道德，从动物身上榨取利润。在今年五月，抗体行业的巨头SantaCruzBiotechnology就被指控虐待动物，遭到了美国政府350万美元的天价罚款，并将被禁售多克隆抗体（详见：2016第一个或将倒下的抗体巨头）。为什么说SantaCruzBiotechnology是抗体巨头呢？因为仅这一家公司所使用的动物数量，在2013年就达到了15648只，超过了全英国总和的1.5倍！
在今天，依旧有许多宣称“动物友好（animal-friendly）”的传统抗体生产方式，但实际上一点都不“友好”！
技术的突破
为什么一定要利用动物来制造抗体呢？难道是技术的局限性吗？
在过去20年间，真正意义上”动物友好“的抗体生产方法在迅速发展，并且早已在技术上十分成熟，足以替代传统的抗体生产方式—利用动物免疫。已经有多种动物友好性亲和试剂（animalfriendlyaffinityreagenats,AFA)被成功开发出来，甚至投入商业化生产。这些试剂的生产完全独立于任何活体的免疫系统，并且能够替代现有的动物免疫技术手段，在广泛的范围内得到应用。AFA是由噬菌体展示，核糖体展示或者酵母菌展示在体外生产出来并进行筛选的。这些产物主要是抗体，但同时也涉及一些非抗体的亲和试剂，如DARPins，affibodies，monobodies，anticalins或其它产物。这篇文章主要强调了一种最成熟，适用性最高的方式—噬菌体展示。
文章指出，使用噬菌体展示制造的抗体，并不仅仅是”看起来像抗体“或者”与抗体有相似的作用“，它们实际就是”原装“的抗体—它们拥有与活体生产出来的抗体完全相同的生物活性—在开发上，功能上，以及结构上，它们无法与活体生产的抗体区分开来。并且，它们的特异性比活体制造的抗体还要优秀，能够有效避免抗体的多态性，继而减少抗体引发的可重复性问题。同时，它们的生产成本更低，产能更大。理论上来说，只需要构建一个良好的噬菌体展示Library，并进行合理的筛选措施，即可利用这种技术生产出与活体生产等效的抗体。即使生产出来的抗体质量不符合预期，也可以利用各种体外手段来改进抗体的特异性，亲和力以及其他特征。目前，一些大规模的比较性研究，如StructuralGenomicsConsortiumSH2Pilot、EUprogrammeAffinityProteome、NIHCommonFundProteinCaptureInitiatives，都证实了利用噬菌体展示生产的抗体，在不利用杂交瘤细胞（单克隆抗体制造技术）的情况下，能制造出完全等效的单克隆抗体。市场上以及有一些比较成熟的非动物来源的抗体了：如ABD和Yumab。
政策与法规
人道主义和动物保护，在西方国家中一直占有重要的地位。文章中例举了欧盟的科研用途的动物保护政策：3Rs原则—替代，减少，精炼（replacement,reduction,refinement)。从名称上，我们不难看出这项法规的目的就是为了利用政策的调控，促进动物替代品在科研中的应用，从而减少实验动物的使用。例如，法案规定”如果可能，一项技术上满足标准的方法或实验手段（不涉及动物使用），应该作为动物实验的替代方法。“另外，法案还规定“如果有其它可以得到理想结果的方法被欧盟法规认可（不涉及动物使用），那么某项涉及动物的实验步骤就不能被执行。”这些规定意味着，在每个欧盟成员国，包括抗体生产在内的各项动物实验都要经过政府部门的审核与评估，以确保”动物使用是唯一的合理选择“。
在欧洲，这就为替代动物生产抗体提供了法律上的支撑。虽然噬菌体展示方法可以作为动物的完美替代品，但由于人们对一些概念上的误解，导致审批部门认为动物生产抗体的方式是”无法替代的“。因此，许多抗体制造的项目依旧可以通过审批，这项替代技术也没有得到足够的重视。
光明的未来
文章的第一作者，来自诺丁汉大学的访问学者AlisonGray博士表示：“科学家们在这个领域的终极目标，因该是在研究和生产上完全替换动物。然而，由于人们对这些替代技术缺乏足够的意识，改变来的不会那么快。利用噬菌体展示来制造多抗和单抗的技术，早在二十年之前就存在了。这是一项高性价比的技术，足以替代当前如此巨大的实验动物用量。事实上，这项技术已经足够成熟，足以淘汰现有的动物免疫手段。”【2】
因此，基于欧盟的3Rs原则，AlisonGray博士带领众多科学家提出了7项行动计划，用来替代动物制造抗体—由欧盟领导，延伸到科研机构和生物技术产业：
1.完全替换利用动物免疫的方式来制造抗体，包括抗体相关产品的进口，除非能够被证明在某些情况下AFA无法作为替代品。
2.应当建立一个专家工作小组，专门策划使用AFA来替代动物抗体的行动路线。
3.设立项目，以促进这项新型技术的转化和扩散。这应该包括设立技术中心，为抗体生产者提供AFA技术培训，确保提供足够的技术支持。
4.应该对非欧盟地区的动物来源抗体生产进行评估，以保证这些抗体的生产是符合欧盟标准的，尤其是在一些动物保护法规较弱的地区。
5.欧盟参考实验室（EURL）应该与它的国际合作伙伴一起扩大活动领域，将AFA的生产和应用包含在内。
6.服从3Rs原则的欧盟国家和机构，以及按照欧盟法规进行化妆品，药品以及食品的商业机构，应该全力支持3Rs原则，停止动物来源的抗体相关产品的进口。
7.由欧盟委员会出具的实验动物统计数据报告，应当把”用于抗体生产的动物“单独归为一个类别。
总结
作为替代医学实验动物基金（FRAME）的主席，AndrewBennett博士对这篇文章做出了很好的总结：”Gray博士的这篇文章指出了一个在抗体制造领域十分反常的现状：一方面，抗体可以不依赖于动物来制造，并且这项技术十分成熟；但是另一方面，每年却有成千上万的动物在抗体制造的过程中被杀害。利用动物来制造抗体，是完全没有必要的。更重要的是，利用动物生产出来的抗体，会引发严重的质量问题—有很大一部分抗体效果很差，甚至是无效（详见这里）。相比传统的抗体生产方式，噬菌体展示技术有潜力制造出特异性更强，功能性更好的抗体。“【2】
参考文献
【1】GrayAC,SidhuSS,ChandrasekeraPC,etal.AnimalFriendlyAffinityReagents:ReplacingtheNeedlessintheHaystack[J].TrendsinBiotechnology,2016.
【2】http://phys.org/news/2016-07-scientists-animals-antibody-production.html
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