| Clone | C1P5 |
| Isotype | IgG1 |
| ProductType | MonoclonalAntibodyPrimaryAntibodies |
| Units | 3ml |
| Host | Mouse |
| Application | Immunohistochemistry(frozen¶ffin)Immunohistochemistry(frozen)Immunohistochemistry(paraffin) |
BackgroundThisantibodyisusedforthedetectionofhighriskHumanPapillomavirus(HPV)infectionsindifferenttissues.ItshouldalwaysbeusedwhenthescreeningantibodyhasdetectedthepresenceofpapillomavirusinsUSPectedtissues.HumanPapillomavirustype16and18areresponsIBLeforthedevelopmentofcervicalcarcinoma,aswellascarcinomasoftheheadandneckregionandsomeothertumors.
SourceMouseimmunizedwithrecombinantE6proteinfroHPV18
Immunogen:HPVtype18E6proteinproducedinbacteria
ProductAntibodysolutioninstABIlizingphosphatebufferpH7.3.Contains0.09%sodiumazide**.Thevolumeissufficientforatleast30immunohistochemicaltests(100µlworkingsolution/test).Useappropriateantibodydiluente.g.BIOLOGOArt.No.PU002ifrequired.
PurificationMethod:AntibodysolutioninstabilizingphosphatebufferpH7.3.Contains0.09%sodiumazide**.Thevolumeissufficientforatleast30immunohistochemicaltests(100µlworkingsolution/test).Useappropriateantibodydiluente.g.BIOLOGOArt.No.PU002ifrequired.
SecondaryReagents:WerecommendtheuseofBIOLOGO"sUniversalStainingSystemDAB(Art.No.DA005)orAEC(Art.-No.AE005).
SpecificityHumanPapillomavirusEarlyAntigenE6fromHPV16and18.
ApplicationsIHC(C,P)
IncubationTime:60minatRT
WorkingConcentration:(RTU)neat
Pre-Treatment:ImprovementofstainingwithunmaskingfluidG(Art.No.DE007)orunmaskingfluidC(Art.No.DE000)
PositiveControl:HPV-positivevulvacarcinoma
Storage2-8°C
CautionThisproductisintendedFORRESEARCHUSEONLY,andFORTESTSINVITRO,notforuseindiagnosticortherapeuticproceduresinvolvinghumansoranimals.Itmaycontainhazardousingredients. PleaserefertotheSafetyDataSheets(SDS)foradditionalinformationandproperhandlingprocedures.Disposeproductremaindersaccordingtolocalregulations.Thisdatasheetisasaccurateasreasonablyachievable,butNordic-Mubioacceptsnoliabilityforanyinaccuraciesoromissionsinthisinformation.
References1.Cowsertetal.(1987)J.Natl.CancerInst.79;1053-1057.2.BanksL.J.(1987)J.Gen.Virol.68;1351-1355.3.CasonJ.,PatelD.,NaylorJ.,etal.(1989)Identificationofimmunogenicregionsofthemajorcoatproteinofhumanpapillomavirustype16thatcontaintype-restrictedepitopes.J.GeneralVirol.70;2973-2987.4.ShepherdP.S.,LunnyD.,BrooksR.,etal.(1992)Thedetectionofhumanpapillomavirusesincervicalbiopsiesbyimmunohistochemistryandinsituhybridization.Scand.J.Immunol.36(11);69-74.
SafetyDatasheet(s)forthisproduct:NM_SodiumAzide/wp-content/uploads/SDS/AntibodySDSwithSodiumAzideNoridic-MUbio.pdf
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其次，察看次目的蛋白的存在形式，有没有多聚体形式及变构形式；
最后，查看多家抗体公司的DATA，看看别人的WB做出来的条带的位置。
根据你说的，特异识别多个组织中的同样大小的条带，我觉得很可能就是你的目的蛋白。
一般来说多克隆的阳性率高一些，但出现假阳性的比例也高一些。
1取组织
（1） 灌注固定：暴露心脏,将注射针头插入左心室,剪开右心耳,快速灌注PBS,待右心耳处流出澄清液体,换4%多聚甲醛灌注到大鼠四肢强直为止,快速取脑和肾。
（2） 固定：将组织置于4%多聚甲醛中固定15小时
（3） 脱水：将组织放入30% 蔗糖溶液中直至下沉
（4） 切片：脑组织冰冻切片20微米，37度烘干2h以上；
（5）将切片放置－80度保存，随用随取。
2免疫单标记
（1）做抗原修复（0.4g柠檬酸、3g柠檬酸钠、1000ml水配制成溶液，放到水浴箱中90~94℃保存15min）,冷却后， 用1*PBS反复洗标本10min，吸去PBS，同时向标本加渗透液（配0.4%trition液，然后将BSA加入到配好的trition液中，配成1％浓度）100ul，常温下湿盒反应1h。
（2） 吸去渗透液，同时向标本加block液（5％封闭用正常山羊血清）100ul，常温下湿盒反应5h。
（3） 吸去block液，同时向标本加入1：50稀释的羊抗鼠一抗100ul，37度湿盒反应过夜。
（4）吸去一抗，并回收，用1*PBS洗液反复洗15min。
（5）快速从冰箱中取出驴抗羊的二抗，并立即用锡纸包裹，注入到一个新的以锡纸包裹的tube管中并用PBS以1：200稀释。
（6）进入暗室，吸去PBS，同时加入二抗100ul，37度湿盒反应2h,封片。
（7）放置到荧光显微镜下观察。
又由于自然存在的抗原大都存在多个抗原表位,会刺激机体产生多种针对同一抗原的不同抗原表位相应的不同抗体.
