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抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行,也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化,包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段,以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化。... 查看更多>
2021-09-01
上海武昊生物科技有限公司在发布的丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio供应信息,浏览与丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的产品或在搜索更多与丙氨酸乙醛酸转氨酶2(AGXT2)多克隆抗体(大鼠的一抗)/武昊生物/wuhaobio相关的内容。 查看更多>
武汉巴菲尔生物技术服务有限公司在发布的RFWD3多克隆抗体供应信息,浏览与RFWD3多克隆抗体相关的产品或在搜索更多与RFWD3多克隆抗体相关的内容。 查看更多>
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北京博尔西科技有限公司在发布的兔抗人IgG-Fc(多克隆抗体)供应信息,浏览与兔抗人IgG-Fc(多克隆抗体)相关的产品或在搜索更多与兔抗人IgG-Fc(多克隆抗体)相关的内容。 查看更多>
2021-08-05
武汉爱博泰克生物科技有限公司在发布的 多克隆抗体制备供应信息,浏览与 多克隆抗体制备相关的产品或在搜索更多与 多克隆抗体制备相关的内容。 查看更多>
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Reagents:Bacterial strainE. coli N4830/pJW10LB amp media50 µg/ml ampicillinHigh salt bufferfor 1 L50 mM KH2PO4 6.8 g150 mM KCl 11.18 g50 mM sodium pyroph 查看更多>
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2021-07-21
抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆... 查看更多>
北京华夏远洋科技有限公司在发布的M5 HiPer pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit(无多克隆位点平末端TOPO克隆载体)【一级代理】供应信息,浏览与M5 HiPer pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit(无多克隆位点平末端TOPO克隆载体)【一级代理】相关的产品或在搜索更多与M5 HiPer pTOPO-Blunt Simple Cloning Kit(无多克隆位点平末端TOPO克隆载体)【一级代理】相关的内容。 查看更多>
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抗体的制备—多克隆抗体123
弗兰爱贝尔2452017-11-04
一、多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤:
1、制备抗原。
2、选择实验动物。
3、动物免疫。
4、试取血进行测试,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,杀死实验动物,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。
二、抗体分类
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monoclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。多克隆抗体是由异源抗原(大分子抗原、半抗原偶联物)刺激机体产生免疫反应,有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。多克隆抗体由于其可识别多个抗原表位、可引起沉淀反应,制备时间短,成本低的原因广泛应用于研究和诊断方面。
三、免疫方法
可以采用以下各种方法之一进行免疫。
(1)淋巴结注射法:①在兔的两后足跖部皮下(或皮内)注射活卡介苗 50mg(每侧约0.30ml) 。7~10 天后,兔跖及腘肌淋巴结肿大;②于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml);③必要时,14 天后,重复步骤②一次;④再过 7 天后,于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml(含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml) ;⑤5~7天后,耳静脉采血。测定血清效价。
(2)皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。
(3)多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。
一般选用鼠或兔来做,如果你的免疫原分子量够大的话,就直接免疫,如果是小分子的话,可以连上BSA等的一些蛋白再免疫,五免后取血检测血清中抗体含量
兔单克隆抗体 123
最后一次HVVLE2021-08-05
单抗制备难度大,使用时候容易受到目标蛋白降解的影响。
多抗,稀释度更大,特异性相对较差,容易出现多条带。
兔的单克隆抗体和鼠的单克隆抗体在使用上不会有什么区别。

用来很多抗体,许多时候觉得单抗多抗也未必是理论上那样的。单抗做不好的也有,多抗条带唯一且清晰的也有。
而且很多蛋白的抗体未必有那么多的选择。

AKT2多克隆抗体应该切取哪个分子量大小的条带呢?磷酸化和非磷酸化有啥区别么?分别应该怎么跑呢?磷酸化的蛋白在提取时有啥讲究么?求大神指导。

单克隆抗体是由淋巴细胞杂交瘤产生的、只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定簇的特异性抗体。
单克隆抗体这项新技术从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可用于探讨: ①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位.。
因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。

本人做多克隆抗体制备,所用蛋白为纯化的过敏原,与福氏佐剂等量混合,每次量为1mg,每次总的注射量为3-4ml,兔子皮下多点注射,但是其中两只兔子在首次免疫后死亡,另有一致在首次加强免疫后死亡,死亡原因全是消化不良,胃鼓的像气球一样,请问各位老师这是什么原因啊,应该如何改进啊?谢谢

多克隆抗体技术 实验方法123
哦草0g燵剆2017-11-04
抗血清收获后,加 1/万硫柳汞或 1/万的叠氮钠防腐,或加入等量的中性甘油,分装小瓶,置-20℃以下的低温保存,数月至数年内抗体效价无明显变化。注意避免反复冻融。也可将抗血
清冷冻干燥后保存。
单克隆抗体多克隆抗体IgG,IgD,IgE,IgA,IgM单克隆抗体定义到底是什么样的,不要用书上的答,说人话我不理解的地方在于,一个抗原决定簇能诱导产生一种抗体,这个一种是IgG,IgD,IgE,IgA,IgM其中一种呢还是指别的分类标准?一个抗原决定簇诱导产...
老鼠每年可怀胎多达八次,每胎可诞幼鼠四至七只。繁殖小鼠成熟早,繁殖力强,寿命1~3年。新生仔鼠周身无毛,通体肉红,两眼不睁,两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行,12天睁眼。除了人类以外,老鼠是哺乳类中繁殖最迅速且最成功的。以经常在人类生活地区活动的一种家鼠以为例:每年可怀胎多达八次,每胎可诞幼鼠四至七只。除了消耗或污染食物外,老鼠性喜磨牙,故因老鼠咬而遭破坏的包装材料或建筑设备颇为可观,据统计美国有四分之一原因不明的火灾,可能是由老鼠咬损电线所引起。
现在,国内做抗体的公司是比较多的,有些公司名为抗体制备公司,他们接到后在外包给有实力的做,一定要看清楚。其中美国的ABclonal的还不错,要是用重组蛋白作为免疫原,最重要的是抗原区域的设 计,他们中文名字叫什么爱博泰克,记不清了。
最近老师让做小鼠多克隆抗体,以前没接触过,哪位大神能给个试验步骤,所需试剂,实验器材和注意的事项啊,万分感谢!!!!!补充一句:最好能将制备多抗的整个流程都涵盖,包括前面的蛋白纯化以及后续的如何获得血清和抗体的纯化等,谢谢各位!
抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针对该抗原的必定是多克隆