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immunodx
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由于抗体与细胞间存在非特异性结合(如电荷间互吸等),流式抗体与细胞结合时有特异性结合部分和非特异结合部分,流式同型对照试剂 用于消除非特异结合所至非特异染色,严格来说,同型对照应该是同一抗原抗体制备的生产厂家,同一种属动物来源,同一种免疫球蛋白(包括亚型),同一荧光标记,作用类似调零(一般阳性率控制在1~2%内)。特别是多标调荧光补偿时,做为参考。 荧光素直接标记一抗:FITC标记为例: 兔抗人的CD34/ FITC标记的抗... 查看更多>
2021-08-18
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的 查看更多>
其他 SouthernBiotech(SBA)公司建于1982年,致力于为全球免疫研究的科学家提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆二抗和其它特异性抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒... 查看更多>
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髋部是骨质疏松性骨折最好发的三个部位之一,随着人口老龄化日趋严重,髋部骨折的发病率也呈不断上升的趋势。目前对于髋部骨折应尽可能进行手术治疗是较为公认的观点。然而,虽然手术技术和内固定材料都有了长足的发展,但骨折固定失败,尤其不稳定性骨折,对于骨科医生来说仍是充满挑战的。自从 Synthes(辛迪斯,国内习惯称其为 AO 公司)公司的股骨近端抗旋髓 查看更多>
PNABIO INC公司产品介绍【代理商代购购买现货】 查看更多>
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本人拟进行全血白细胞胞膜受体表达情况的流式实验,已经订购了三种单克隆直标抗体,两种为PE荧光标记,另一种为APC荧光标记,但APC标记的抗体的同型对照缺货,请教各位老师同学,我如果不购买其他品牌的APC标记的同型对照,我能否将APC标记的抗体与PE标记的其中一个抗体共染,进行内对照,也就是APC抗体不设专门的阴性对照?这样对检测出来的结果又多大影响?
所谓同型对照,就是因为担心抗体会有非特异性的结合而设置的一种对照。
选用和特异性抗体同种亚型的,同样荧光素标记的抗体,采用同样的染色步骤染同样浓度的细胞。然后上机检测。如果细胞有非特异性的结合,那同型对照的荧光强度可能会比未染色的阴性对照要高一些。
同型对照只用于那种阳性和阴性之间没有明确分解的情况。如果阳性细胞群非常清楚,是不需要同型对照的。另外,在多色同染的情况下,也不采用同型对照,而是采用FMO(fluorensence minus one)对照。
另外,对于同型对照的使用,也有很多反对意见。就算是同型抗体,也可能会有不同的亲和力,并不一定就能真实反应非特异性的结合。
任何流式的实验都必须要有空白和同型对照。因为流式检测的只是相对荧光强度,必须以空白对照来设定阴性阈值
三色抗体命名为A、B、C
同型对照(阴性对照)管:A同型+B同型+C同型
单阳性对照
A检测管:A+B同型+C同型
B检测管:B+A同型+C同型
C检测管:C+A同型+B同型
不存在荧光重叠的两个抗体不需要调节补偿。

样本为PBMC,想用三色标记Treg细胞,分别为CD4-PECY,CD25-Fitc,Foxp3-PE,想知道如何设置荧光补偿,用的是BD的流式仪,1、是设置阴性管一个,单阳性管每种一个,样品管一个么?

荧光素强度依次为PE, PECY5 APC FITC, PE最强,FITC最弱。 所以,建议抗体组合为:
Foxp3-PE,CD4-FITC,CD25-PECy5.5或者CD25-APC。
同时购买三个相应的同型对照抗体。
样品管设置如下:
1. cell + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype + PE-isotype
2. Cell + FITC-isotype + CD25-mAb + PE-isotype
3. Cell + PE-mAb + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype
4. Cell + CD4-FITC + Foxp3-PE + CD25 -PECy5.5( or APC)。 [这一管的数据可以拿来分析用]。

在充分了解调整电压和补偿原理的基础上,也可以做一些简化。如果不太懂,就按照这个来。其中Foxp3的抗体和同型对照抗体都是在固定破膜以后再加,不是与CD4或者CD25同时加。
isotype
英 ['aɪsətaɪp]美 ['aɪsəˌtaɪp]
n.
同型动物(或植物),图形文字,象征性图像;同位型;同模;同号模式
网络
同型;同种型;模式标本

双语例句
Study on the Action of Decreasing level of Isotype Cysteine for High Blood Viscosity
降低同型半胱氨酸水平对高黏血症作用的研究
UG 编程常见问题123
俺来了2021-07-28
比如:CD45RA的percp-cy5.5,其浓度为20ul(0.06ug)/test,
其同型为;percp-cy5.5(25ug包装)浓度:0.2mg/ml,
那么如果CD45RA抗体如果加入20ul,那同型抗体应该加入多少ml:
我自己的初步计算是:1ul的3分之1.不知道我算对了吗?应该怎么加才好呢?
我打算用流式做干预后HT-29细胞表面Fas表达的差异问题,用的抗体是FITC-Fas抗体,请问各位其背景对照的抗体是什么啊?通常两步法检测时,FITC标记的二抗可以直接做同型对照,但一步法是什么样的啊?请各位赐教!
如题,现在存在的情况是之前买了流式抗体没有买同型对照抗体为了赶时间买不同厂家的同性对照抗体会有很大的影响吗?
一抗
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抗体组合
免疫组化
免疫沉淀
ELISA
ELISPOT
流式
同型对照
酪胺信号放大
免疫对照/血清/阻断/封闭
Western Blot免疫印迹
免疫缓冲剂/固定/透化
细胞/组织裂解物
细胞核裂解物
细胞裂解物
组织抽提物
转染细胞裂解物
CBA蛋白定量
链霉亲和素
抗体纯化
请问:如果做处理组和非处理组间细胞表面某抗原的表达变化,还需要有标记抗体的同型对照吗?
我也是做小鼠脾CD4、CD8和CD3的流式。荧光标记的抗体是分着买的还是买的混合物啊?是不是买进口的抗体比较靠谱啊,哪家的抗体性价比高些呢?需要买同型的非特异性抗体作对照吗?
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