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  • BiotinylationofAntibody(ContributedbyNanciDonacki)
  • Antibodylabeling(HouseEarInstitute)LabelingprotocolsusingaffinityMarkers.
  • CouplingColloidalGoldtoProtein(WalterSteffen)
    • GoldlabellingofrabbitIgG
    • Preparationofenzymegoldcomplex
    • CouplingofNanogoldtoIgG
  • ProductionofColloidalGold(WalterSteffen)
  • Protein(Antibody)FluorescentLabeling(MarioRoederer)Detailedprotocolforconjugationofproteins(principallymonoclonalantibodies)tofluorescentdyes.Theconjugationsfallintofourbasicprotocols:Type1(usedforFITC,Cy5,andtheinitialpreparationoftheCy5andCy7tandemdyes);Type2(usedforBiotinandCascadeBlue);Type3(usedforconjugationofPE,APC,TR-BSA,andtheirderivatives);andType4(usedfortheinitialpreparationofnon-immunoglobulinproteinslikeAnnexinV).Proceduresfortheconjugationofimmunoglobulinsareprovidedforthefollowingmolecules:
    • Fluorescein(FITC)
    • Phycoerythrin(PE)
    • Cy5PE
    • Cy7PE
    • TexasRed(TR)
    • Allophycocyanin(APC)
    • Cy5
    • Cy7APC
    • CascadeBlue
    • Biotin

Inaddition,protocolsforconjugationofAnnexinVtothefollowingmoleculesaregivenasmodelsforfluorescentconjugationofnon-immunoglobulinproteins.

    • FITC
    • PE
    • TR-BSA
    • APC
    • CascadeBlue

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