流式细胞术中为什么要用同型对照?如何选择同型对照资讯分析测试...
由于抗体与细胞间存在非特异性结合（如电荷间互吸等），流式抗体与细胞结合时有特异性结合部分和非特异结合部分,流式同型对照试剂用于消除非特异结合所至非特异染色，严格来说，同型对照应该是同一抗原抗体制备的生产厂家，同一种属动物来源，同一种免疫球蛋白（包括亚型），同一荧光标记，作用类似调零（一般阳性率控制在1~2%内）。特别是多标调荧光补偿时，做为参考。荧光素直接标记一抗：FITC标记为例：兔抗人的CD34/FITC标记的抗体(荧光素直接标记一抗),抗体动物种属来源RabbitIgG抗体,它的同型对照应该是FITC标记的RabbitIgG（亲和纯化IgG）。注意同型对照的成份跟它的名称是相同的。使用标记一抗：RabbitAnti-CD34/FITC荧光素标记兔抗人CD34抗体IgG同型对照：RabbitIgG/FITC荧光素标记兔IgG间接免疫荧光检测：PE标记为例如果采用间接免疫荧光检测：一抗+荧光PE标记的二抗，抗体动物种属来源为小鼠抗人的CD4抗体+羊抗小鼠IgG/PE标记的二抗。它的同型对照应该是：亲和纯化小鼠IgG+羊抗小鼠IgG/PE标记的二抗。MouseAnti-HumanCD4MonoclonalAntibody小鼠抗人CD4抗体同型对照：MouseIgG+GoatAnti-mouseIgG/PE纯化小鼠IgG+羊抗小鼠IgG/PE标记的二抗
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发布于 ： 2021-09-01
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