The antibody has a provenmaximum biotin-streptavidin/HRP staining at a 1/1000 - 1/2000 dilution in rat raphe nuclei. Optimal dilution will vary depending upon fixation, labeling technique and/or detection system; therefore, a dilution series is recommended. The specificity of the antiserum was evaluated using a model system of gelatin-indole plugs by a method similar to published procedures (Shipper and Tilders, 1983). Results showed that the 5-HTP antibody dose dependently stained 5-HTP but did not stain any concentration of 5-HT or 5-HIAA. The antiserum was also tested by pre-adsorption with indole/paraformaldehyde/BSA conjugates. Staining was completely blocked by pre-adsorption with 5-HTP conjugate and unaffected by 5-HIAA or 5-HT conjugate.Photo Description: IHC image of neurons staining for 5-HTP in the raphe nucleus of the rat brainstem. The tissue was fixed with 4% formaldehyde in phosphate buffer, before being removed and prepared for vibratome sectioning. Floating sections were incubated at RT in 10% goat serum in PBS, before standard IHC procedure. Primary antibody was incubated at 1:2000 for 48 hours, goat anti-rabbit secondary was subsequently added for 1 hour after washing with PBS. Light microscopy staining was achieved with standard biotin-streptavidin/HRP procedure and DAB chromogen.
Host: Rabbit
Quantity / Volume: 100 µL
State: Lyophilized Whole Serum
Reacts With: Rat, Sea Slug (Aplysia Californica, Tritonia Diomedea
Availability: In StockAlternate Names: anti-5-HTPRRID: AB_572215Immunogen: 5-HTPGene Symbol: AvpEntrez Gene ID: 24221NCBI Gene Aliases: DI, Va
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600-401-880S25 µLrocklandRockland Immunochemicals Inc.Rockland/alpha-Tubulin Antibody/600-401-880S/25 µL
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内参抗体|进口内参抗体—在WB实验中为什么需要使用进口内参抗体？要检测一个基因的表达产物是否正确，或者比较表达产物量的相对变化，首选方法是Western Blot。虽然，顺利的时候Western Blot做起来很简单，可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟，作为一种有活性的生物大分子，抗体和抗原的反应毕竟不象1+1那么明确，而...
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calbiotech Mouse/Rat Prolactin ELISA_产品展示_通善calbiotech Mouse/Rat Prolactin ELISA公司自成立以来，一直十分重视质量。注重质量也表现在于calbiotech Mouse/Rat Prolactin ELISA的产品和诊断试剂上。http://www.aatbio.com.cn/goodsid/fenleiyi/3229297_calbiotech/1.html货
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Western Blot 即免疫印迹试验，可以利用 Western Blot 来比较在不同条件下，不同细胞组织中目的蛋白表达量的差异，属于定
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测的是某种特定蛋白的量。或者是说测定某种蛋白是否存在于样品中，因为WB只能做半定量。
因为这个实验用到了抗体，抗体是特异识别某一种蛋白的，所以只要能检测到信号，说明样品中有该蛋白存在，如果有相应的对照，也能半定量说明该蛋白的量如何。
常用的actin,GAPDH
内参抗体都是与人，动物有关。怎么没有微生物方面的内参抗体啊？
我要做酵母膜蛋白的westernblot，不知道选用何种内参抗体，有人作过吗？如能解惑，不甚感激。谢谢!
百度了一下，推荐了解了解：大肠杆菌gapA基因转录翻译的GAPDH蛋白的高度保守性,为制备大肠杆菌专用内参蛋白抗体提供可能,
内参一般都会用β-actin， GAPDH
当然跟物种有关。
一抗多稀释点试试
我觉得封闭这一步时间长短多少并不能减少背景…背景过深多半还是抗体浓度过大…不管一抗还是二抗过大都会使背景加深…一抗的浓度不一定是条带清晰就是最佳了…联系进一步优化一下
这个主要还是抗体的问题，WB最主要的还是要选择一个特异性较好的抗体，抗体是整个实验的重中之重
我要做两个指标，检测这两个指标分别在大鼠和人肝癌细胞中的表达。
其中一个指标的
一抗来源于兔，另一个一抗来源于鼠。前几天跟试剂公司联系购买
内参抗体时，他们说内参抗体是根据目的蛋白的一抗来定的，要我买两个内参抗体和相应的
二抗，这让我感到很纳闷。我想知道内参的选择是根据什么原则？
我觉得内参只是一个参照，内参抗体跟目的蛋白的一抗有直接联系吗？有没有可以通用于人肝癌细胞和大鼠肝癌细胞的内参抗体，能否帮忙推荐一个，谢谢．
在图书馆也没有找到这方面很详细和确切的论述，急切期盼您的指导！！！谢谢！！！
内参bate－actin或GAPDH多为单抗,来源于小鼠，
一般可与大鼠、小鼠、人、兔均有交叉反应，即可作为上述任一来源蛋白的内参。
Actin分子量为42kD，为肌动蛋白
GAPDH分子量为36kD，为磷酸脱氢酶
一直没做出来这个，目的条带倒是可以做出条带
请问有做GAPDH为内参的吗？
一抗二抗的浓度时多少？最好是santacruz的
抗体。多谢！
内个，个人觉得比较价格还是很有说服力的，一分价钱一分货。
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体，但是如果希望抗体特异性好点，能检测丰度低的蛋白，还是选Abcam吧，Santa有时候全凭人品了，内参抗体什么的还能凑活，其他的比较勉强。
请教各位：在做细胞核内蛋白的表达时，选择内参是PCNA好还是TBP好？目前国内的那家公司的更可靠？谢谢！
请教各位，我买的
CST的beta-actin(#3700)
抗体，说明书上的图片只有一条特异性条带（见图），为什么我做的实际情况是有很多杂带，我做的是脑组织蛋白，这个是怎么回事？
β-Actin是PCR常用的内参，β-Actin抗体是Western Blot很好的内参指数。内参即是内部参照（Internal Control），对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内参有细胞骨架蛋白beta-actin或beta-tubulin和GAPDH（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）等。因此β-Actin抗体、β-Tubulin抗体以及GAPDH抗体成为最常见的三个动物细胞内参抗体。
β-Actin作为内参是得到了公认的，这是针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞浆内，表达量非常丰富。Beta-actin由375个氨基酸组成，分子量大小为42-43kDa左右。
β-actin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作Western的参照时，Actin抗体和Tubulin抗体的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同，这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。向左转|向右转
