
Theconjugatedgoatanti-mousepolymerhorserADIshperoxidase(HRP)andtheconjugatedgoatanti-rabbitpolymeralkalinephosphatase(AP)secondaryantibodiesreactwithbothheavyandlightchainsonmouseandrabbitIgGrespectively.ThisinnovativeHRP-andAP-polymerizationtechnologyprovidesasignificantincreaseinstainingsensitivitywhencomparedtootherconventionalHRP-orAP-conjugatedsecondaryantibodies.Avidin-biotinblockingproceduresarenotnecessarywhenusingtheMACH2conjugatedsecondaryantibodies.Itisspeciallydesignedforarapiddoublestainprocedure.Anantibodycocktailwithamousemonoclonalandarabbitpolyclonal/monoclonalmustbeused.Theoverallstainingprocedurecanbedonewith4majorstepsandinlessthantwohours.Itcanbeusedmanuallyorusedwithautomatedstainers.
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想做个蛋白的定位,可是没有好抗体,就想做个转基因小鼠,在基因后面加一个标签。但是之前没有相关经验,不知道哪一种tag更好呢,更适合在小鼠里表达呢?因为我蛋白比较小,加GFP那么大的话可能会影响表达。比较小的tag例如HA,Flag还有His等,不知道哪个更适合一些?求大神们给些经验。
免疫荧光是通过抗体上标记的荧光基团发光
抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白.
载体,你说的是那种载体?生命科学载体有2种,一种是分布于膜上的载体蛋白,和物质运输有关.另一种是基因工程里面的携带外源DNA的一段DNA片段,例如质粒、噬菌体和动植物病毒.
所以,抗体全部是蛋白质,载体部分是蛋白质.
对于艾滋病和HIV感染的诊断,血清样品检测HIV抗体。可用真空采血管采血5—10ml(确定采样量)静脉血,室温下自然放置1—2h,待血液凝固后用3000rpm,离心15分钟,吸取血清HIV抗体检测。血清样品置2—8℃冰箱保存7天。
若用检测试剂检测HIV抗体,也可用末梢全血,成人、儿童或幼儿可选择中指、无名指采集、足跟部位采血。采血部位用75%酒精或碘伏认真消毒皮肤,用EDTA毛细管吸取血样。采血结束后,彻底止血,完成后的穿刺针头丢弃于耐穿透的容器内,妥善处理,严防职业暴露损伤。
采集血浆或全血应实验项目要求选用的抗凝剂,CD4/CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA或肝素。本实验室完成的实验尽早完成,完成检测项目,采集后在规定限时内及时送到,避开采集不当、暂存环境与时间的延误等因素而影响检测结果,如要检测CD4/CD8+T淋巴细胞测定的样品应选择合适的抗凝剂, 血样检测抗凝剂用EDTA(5 ml)若用EDTA钾盐血样品应在30h以内,尽早(8h以内)处理用ACD或肝素抗凝,血样在48h以内,尽早(8h)处理。静脉采集血样运用EDTA钾盐真空管,采集后立即颠倒混匀8--10次,使血液与抗凝剂混匀,对样品编号、日期、采集时间。
二、样品的保存:
用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放在-20℃,短期在一周内检测的样品可存放于2-8℃。HIV检测阳性血清样品可保存至少十年。艾滋病筛查实验室存放阳性血清,阳性血清有资质的实验室可存放(确认艾滋病实验室)用于CD4/CD8+T淋巴细胞测定样品采集时
间超过48小时则检测。HIV检测阳性反应血清样品均保有着艾滋病检测确认实验室,,在HIV阳性反应血清样品较多的地区,艾滋病检测确认实验室应配置-20℃的低温冰箱和-80℃的超低温冰箱保存。
三、样品的运送:
确认阳性反应的血清或血浆,应WHO的三级包装系统。层容器:装样品、防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上有明确的标记、受检者的姓名、种类和采集时间。在试管周围应垫有缓冲吸水,以防碰碎。随样品应附有送检单。要填写送检单种类信息,分开放置。层容器:要求耐受性好的、防渗漏、容纳保护层容器,容器便于消毒处理。层容器:是运输用于外层包装内,应易于消毒。在层容器外面要贴有标签(注明数量、收样单位等内容)血清或血浆样品应在2--8℃条件下专人运送。
检测检测CD4/CD8+T淋巴细胞测定的清或血浆温样品应在室温下(18--23℃)运送。但三级包装要求将盛样品的试管放好,避开使用玻璃容器,以保证不会破碎和渗漏。运送要有感染防护措施。
四、样品的接收
在有感染源设备的实验室内由经过培训、则在生物安全柜中戴手套、口罩、戴防护衣、带防护眼镜、的工作人员打开,用后的包裹应消毒。认真核对样品盒送检单、检查样品有无破损和渗漏,如渗漏立即将存留的样品移出,对样品管和渗漏消毒,检查样品情况,有无溶血、微生物污染、血脂过高及黄疸等情况,污染或溶血等情况样品被接受,则应将样品安全废弃,并要将样品情况立即通知送样人或单位。打开标本容器时要小心,以防皮肤或粘膜污染,以防内容物泼溅。
aware天猫唾液检测不用抽血!
单抗标签选择的一抗范围比较小一些,多抗标签选择的一抗范围可能相对大一些。而商品化二抗基本没什么差别。不管是选择什么样的抗体,在Western blot检测方面都是一样的
所以做Western blot的单抗和多抗标签并没有什么不同

