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absoluteantibody/Ab00100-16.0 Anti-c-myc epitope tag [9E10]/Ab00100-16.0/50 µg
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Description:Recombinantmonoclonalantibodytoc-mycepitopetag.ManufacturedusingAbAb’sRecombinantPlatformwithvariableregions(i.e.specificity)fromthehybridoma9E10.
SpeciesandIsotype:HumanIgA,kappa
CloneNumber:9E10
UniProtAccessionNumberofTargetProtein:P01106
PublishedApplication(s):IHC-F;IHC-P;IF;IP;WB
PublishedSpeciesReactivity:Human
Immunogen:Asyntheticpeptidecorrespondingtoaa408-439fromC-terminusofhumanc-myc.
Specificity:Epitopesequence,EQKLISEEDL,locatedinaa410-419ofhumanc-mycprotein.
AntibodyFirstPublishedin:
EvanGI,LewisGK,RamsayG,BishopJM.Isolationofmonoclonalantibodiesspecificforhumanc-mycproto-oncogeneproduct.MolCellBiol.1985Dec;5(12):3610-6.Noteonpublication:Describesthemakingoftheantibody,showsitrecognisesa62kDac-mycproteininc-mycoverexpressingcelllines(Westernblot).

ProductForm

Purification:AffinityPurifiedusingarecombinantlectincolumn
Suppliedin:PBSwithpreservative(0.02%Proclin300)
StorageRecommendation:Storeat4°Cforupto3months.Forlongertermstoragealiquotintosmallvolumesandstoreat-20°C
Concentration:Seeviallabel.

Importantnote–Thisproductisforresearchuseonly.Itisnotintendedforuseintherapeuticordiagnosticproceduresforhumansoranimals.
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GNI亲和凝胶(Affinity Gel)内参标签抗体信息:1,单克隆标签抗体:anti-Flag,anti-Myc,anti-HA,anti-GST,anti-His,anti-V5,anti-GFP;2,内参抗体:anti-β actin,anti-alfa-Tubulin,anti-β-Tubulin,anti-GAPDH 应用:Western 和 IP 3,HRP偶联的抗体 应用:WB4,Tag Affini 查看更多>
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货号产品包装价格(元)Abs30001AAnti-GST,mAb100ul400Abs30001BAnti-GST,mAb500ul1500Abs30001CAnti-GST,mAb1ml2600Abs30002AAnti-His,mAb100ul400Abs30002BAnti-His,mAb500ul1500Abs30002CAnti-His,mAb1ml2600Abs30003AAnti-His(C-terminal),mAb10... 查看更多>
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重组蛋白的话,一般在蛋白冻干或最终制得之前,都会进行纯化,一般的生物公司可以纯化纯度到达90%,就是不会有其他的杂蛋白存在。做抗体或者抗原等都不会对免疫有影响的,如有你的里面其他杂蛋白多的话,建议先做蛋白纯化(亲和纯化,分子筛都可,一般的亲和纯化,带有his标签或者GST标签都可到达最少85%以上的纯度)
抗体指机体的免疫系统在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白.
载体,你说的是那种载体?生命科学载体有2种,一种是分布于膜上的载体蛋白,和物质运输有关.另一种是基因工程里面的携带外源DNA的一段DNA片段,例如质粒、噬菌体和动植物病毒.
所以,抗体全部是蛋白质,载体部分是蛋白质.
His 标签抗体123
jerrywang742021-08-09

小弟我最近在做Western,目的蛋白是一个加了6×His和Flag标签的融合蛋白,不过实验室还存有Anti-His抗体(并不是Anti-6×His抗体),就拿这个抗体跑了WB,但是内参什么的都很好,目的条带出不来,不知道是不是与一抗有关。

另外质粒转染细胞应该也没问题,设的阳性对照pGFP转染的荧光量很高(转染效率在90%左右),所以理论上讲蛋白表达和提取没有问题。

在这里先谢过!

最近在构建一个过表达质粒,载体是pef-flag。基因测序是完全正确,WB检测有flag的条带,但是用内源性抗体杂空载和过表达的变化基本没有,所以这个是否已经过表达了?坛友们是否遇到过这种情况?

本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。如何根据蛋白的活性部位选择相应的抗体进行免疫荧光实验?
Flag标签系统是已被公认的用于表达、纯化以及检测融合蛋白的表达系统,广泛应用于Westernblotting、免疫细胞组化、免疫共沉淀、流式细胞术、蛋白纯化以及蛋白相互作用、蛋白分离等多个研究领域。Flag标签是一个与重组蛋白相融合的由8个亲水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)组成的多肽片断。FLAG标签只有8个氨基酸组成,因此它不会占据其他表位与结合域,避免导致融合蛋白的功能、分泌性以及转运发生改变。由于它的亲水性特点,FLAG标签倾向于定位在融合蛋白表面,因此更易与抗体结合以及被肠激酶酶解。
由于Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,这一系统已用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳细胞。由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。比如在免疫荧光IF的实验里,同时配合EarthOx的Dylight549荧光二抗,使用该抗体可以准确的定位出Flag融合表达蛋白在细胞内的位置(如图红色显示部分)。另外,做融合表达分析前,通过免疫共沉淀技术获得Flag融合表达蛋白也是非常重要的一步,因此选择一个合适的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag标签抗体也是很必要的。EarthOx的Anti-FlagTagMonoclonalAntibody不仅能应用于细胞内定位的IF实验,同样还能应用于IP实验。1:200甚至更高的IP实验稀释比率,也说明了该抗体本身的具有很高的效价,同时,因为是单克隆抗体,因此特异性也很高。高效价所对应的高稀释比率也意味着超高性价比。
条件:Western10%分离胶,蛋白抗体1:500,FlagMouse1:1000,目的蛋白N端带Flag标签。
求助:为什么用蛋白抗体仅出来一条带,而用Flag抗体则出来两条带?
谢谢大家啊
图一:蛋白抗体

图二Flag抗体
并不是必须的,加标签一个重要原因就是方便在蛋白水平检测目的基因表达。如果目的基因编码蛋白有现成的抗体,就不用加标签,如果没有现成的抗体,加上标签后就可以用与目的基因融合的标签蛋白抗体检测目的蛋白表达,不需要再合成目的蛋白的抗体,方便且廉价。标签一般都是经过广泛使用的,如果有问题就不会一直被使用了。
我买的santa crua的抗体sc-7787(FLAG标签抗体),做western,结果融合蛋白用目的蛋白的抗体能检测出来。用FLAG标签抗体就做不出来,这应该说明抗体不行吧,santa crua得是不是很差阿?DAB显色,操作没问题。
有用过FLAG标签抗体的高手们来指点下,FLAG标签抗体那个公司的效果好啊,我准备买。
同时希望能提供宝贵意见。
谢谢各位阿
如题...通过转染带HIS标签的外源性ROCK2到G2细胞中然后用HIS抗体+磁珠去拉ROCK2蛋白...为什么会得到一条240KD的肌球蛋白的重链...困惑中!求指点!!!!!!!!!!!!!!!
用目的蛋白的单抗就能检测到,请问你是怎么解决这个问题的呢?
如题,最近刚刚构建了pIRES2-EGFP重组质粒,暂没加其他标签,要转染MDCK细胞,1500bp,产物大约57kDa,请问表达产物可以用GFP标签抗体做westernblot鉴定吗?
cnlink的丁香客123
蜜兜2021-08-05
楼主新手,最近在做一个蛋白的抗体,表达了目的蛋白的GST融合蛋白送去免疫兔子,现在收到了返回的抗体,想用His标签的融合蛋白对抗体进行纯化,我只知道Ni柱纯化His标签蛋白的方法,最终是要用咪唑洗下融合蛋白,但是现在想把His标签与Ni柱之间的结合固定,从而纯化洗脱抗体,但是不知道His标签与Ni柱固定的的方法...!!!老板发飙了,小女子**大神指点啊55555
最近要买GST标签抗体,但是看santa cruz的抗体有抗原表位,请问要考虑吗?为什么呢?
例如 GST (1-109):

•epitope corresponding to amino acids 1-109 mapping at the N-terminus of GST of Schistosoma japonicum origin
•recommended for detection of GST fusion proteins and glutathione-S-transferase (GST) of Schistosoma japonicum origin by WB, IP, IF and ELISA
还有Schistosoma japonicum origin 跟我载体pGEX4T-1表达的融合蛋白可用Western Blot吗?它们有什么关系?
十分感谢