
The Carlavirus Group PCR primers offer a sensitive diagnostic method to detect members of the Carlavirus genus of the Betaflexiviridae family. The primer sequences are based on conserved genome regions and can detect characterized and unassigned members of the Carlavirus genus.This test can be used as an aid for identification of viral etiology of unknown plant diseases, test for known viruses when other tests are not available and can be used to confirm results from other test methods. For a full list of confirmed and predicted reactions, click here.The Carlavirus Group PCR primer product includes a lyophilized mix of forward and reverse primers, PCR quality water and detailed instructions.Disclaimer of License: This product is optimized for use in the Polymerase Chain Reaction (PCR) process covered by patents owned by Hoffmann-La Roche, Inc. and F. Hoffmann-La Roche Ltd.Purchase of this product does not include the license under these patents to use the PCR process.This product is recommended for use in conjunction with an authorized thermal cycler.
User Guide
This test reacts with a variety of viruses from the Carlavirus genus. The list below represents Carlaviruses that have been experimentally detected with our Carlavirus PCR and confirmed by sequencing. If you have confirmed detection of a Carlavirus not on this list, please contact us. For viruses predicted to be detected, click here.
Confirmed Detections | |
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Blueberry scorch virus (BlScV) | Carnation latent virus (CLV) |
Chrysanthemum virus B (CVB) | Coleus vein necrosis virus (CVNV) |
Cowpea mild mottle virus (CPMMV) | Garlic common latent virus (GarCLV) |
Helleborus mosaic virus (HeMV) | Hellebore net necrosis virus (HeNNV) |
Hop latent virus (HpLV) | Hydrangea chlorotic mottle virus (HdCMV) |
Kalanchoe latent virus (KLV) | Ligustrum necrotic ringspot virus (LNRSV) |
Lily symptomless virus (LSV) | Narcissus symptomless virus (NeLV-NSV) |
Nerine latent virus (NeLV) | Pea streak virus (PeSV) |
Phlox virus M (PhlVM) | Potato latent virus (PotLV) |
Potato virus M (PVM) | Potato virus S (PVS) |
Red clover vein mosaic virus (RCVMV) | Shallot latent virus (SLV) |
This test reacts with a variety of viruses from the Carlavirus genus. The list below represents Carlaviruses that have not been experimentally detected, but based on in silico analysis, will likely be detected with our Carlavirus PCR. If you have samples of these pathogens below, please contact us.
Predicted Detections | |
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Aconitum latent virus (AcLV) | American hop latent virus (AHLV) |
Butterbur mosaic virus (ButMV) | Caper latent virus (CapLV) |
Cucumber vein-clearing virus (CuVCV) | Daphne virus S (DVS) |
Elderberry symptomless virus (ElSLV) | Hippeastrum latent virus (HLV) |
Hop mosaic virus (HpMV) | Melon yellowing-associated virus (MYaV) |
Mirabilis jalapa mottle virus (MjMV) | Narcissus common latent virus (NCLV) |
Passiflora latent virus (PLV) | Phlox virus B (PhlVB) |
Phlox virus S (PhlVS) | Poplar mosaic virus (PopMV) |
Potato virus P (PVP) | Sint-Jan"s onion latent virus (SJOLV) |
Sweet potato C6 virus (SC6V) | Sweet potato chlorotic fleck virus (SPCFV) |
Verbena latent virus (VeLV) | Potato virus H (PVH)* |
Twisted-stalk leaf streak virus (TSLSV)* |
* Tentative Carlaviruses
Includes:
- Lyophilized forward and reverse primers
- Sterile PCR quality water
- User Guide
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链接很容易,就用EDC或者CMC等碳二亚胺,是最容易在羧基和氨基之间催化形成酰胺键,反应条件就是0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,pH<7反应快,不过pH=7或稍微pH>7也关系不大。EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,而且一般的蛋白质的分子表面总有Lys,Arg,Asn,Gln,所以游离在分子表面的羧基和氨基总是不少的,参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可。很容易反应,而且EDC或者CMC等碳二亚胺是零臂连接试剂,用于空间位阻,形成多分子交联可能较小,即使形成了也很容易用分子筛层析按照分子量区分开。
参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),为了避免两种蛋白质之间发生交联成为串联,因为一种蛋白质形成串联的可能性低一些;即使要形成串联的蛋白质串珠,最好也不要是价格高的那种;另外,EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,室温下即会催化,所以要在0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,一方面避免碳二亚胺催化活性太高形成串联的蛋白质串珠,另一方面,保护蛋白质不变性;反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可,为什么?因为浓度高了更易形成串联的蛋白质串珠结构,浓度低了,没有反应成功,通过分子筛层析还可以分离出来接着连接,如果形成了酰胺键再要专一性切开就没有那么容易了。
【过敏性咳嗽血清学IGE检查】
以过敏患者血清作为实验材料的本外试验方法称为血清学试验。其它体液如炎症部位分泌物、渗出物、灌洗液也可采用相同的实验方法进行检测。主要检测项目有总IgE和特异性IgE,即过敏原特异性IgE。
【什么是总IgE?】
IgE即免疫球蛋白E,是I型变态反应病如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、异位性皮炎、湿疹、急慢性荨麻疹发病机制中起主要作用的免疫分子,因而在过敏反应的免疫学实验诊断中是首选的检测项目。总IgE是过敏性疾病的特异性检查项目,IgE水平增高提示I型变态反应病的可能性大,但不能用于判断过敏原。
【IgE的特点】
IgE是血清浓度最低的免疫球蛋白 ,只有血清中IgG浓度的万分之一。IgE对热不稳定,是半衰期最短一的免疫球蛋白 ,只有2.8天,与细胞表面结合的IgE半衰期稍长,8~14天,IgE由变应原入侵部位(鼻咽、支气管、胃肠道)的黏膜固有层中的浆细胞合成。在各类免疫球蛋白中,IgE是合成率最低、分解率最高的。属于亲细胞抗体,过敏体质者的胎儿脐带血中IgE浓度可能升高,检测脐血中IgE浓度可用于评估胎儿过敏体质的可能性。
【IgE检测方法】
通常用ELISA方法检测总IgE。由于血清IgE浓度很低,一般酶免疫试验方法的敏感性不足以检出血清IgE,现在常规实验室检测血清IgE的试剂盒采用生物素——抗生物素蛋白 放大的ELISA。试剂盒中所含用于制定标准曲线的IgE标准品和检测结果的IgE浓度单位与其它免疫球蛋白 不同,不是用mg/L表示,而是用u/ml或ku/l表示。
【IgE的正常值(参考范围)】:
血清IgE水平在正常人群中呈偏态分布,即多数人为0或接近于0,IgE水平越高的人数越少。因此计算平均值时应计算几何平均值才能反映其真实情况,即用对数转换后其分布才能近似正态分布。
健康人群血清IgE水平与年龄关系较大,小儿和老年人的IgE水平低于成年人。新生儿血清中IgE水平很低,接近于零。随年龄增长,IgE水平也不断升高,5~7岁后接近正常人水平。按Pharmacia公司提供的参考范围,1个月以内<12KU/L,1岁<11KU/L,2~4岁<33KU/L,5岁以上至成人<85KU/L.
过敏性疾病患者的血清IgE水平可达2000~8000KU/L,当IgE水平高于2000KU/L时应考虑寄生虫感染.
有时血清总IgE水平检测结果为0或参考范围内低值,并不能排除过敏性疾病的可能,须结合临床表现和血清特异性IgE检测结果进行判断.
【什么是特异性IgE检测(sIgE)?】
通常所称的过敏原检测,并非真正检测血液样本中的过敏原分子,而是间接地检测其中针对某种过敏原的特异性IgE分子,特异性IgE检测实际上是检测过敏原特异性IgE,即检测样本中针对某种变应原的特异性IgE,从而间接地判断患者是否对某种过敏原过敏。
环境中常见的过敏原包括以下类别:
寄生虫和微生物:各种螨类(屋尘螨和粉尘螨等)、各种真菌(点青霉、烟曲霉、分枝孢霉、交连孢霉等)、蟑螂。
植物花粉:各种草花粉(豚草、葎草、蒿草)、各种树花粉(桑树、柏树、悬铃木、桦树、榆树、柳树、杨树等)。
动物皮毛:猫、狗、马、鸽子等动物的毛和皮屑。
叶酸和生物素都属于B族维生素,
对维持机体的生理功能有重要作用。
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SP法是生物素-卵白素系统:生物素为一种小分子维生素,卵白素又称为抗生物素,SP法的染色步骤为一抗~生物素化二抗~ABC复合物~DAB显色,其中ABC复合物是由一分子抗生物素蛋白与三分子结合有HRP的生物素组合成的复合物。
PV法属于非生物素系统免疫组化方法,应该是称为二步法,是以高分子的葡聚糖为载体将多个二抗分子和酶结合在一起,代替了传统的二抗和三抗,是检测变得简单而且增加了敏感性。
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