Target | 14-3-3 epsilon |
Clonality | Polyclonal |
Reactivity | Human, Mouse, Rat |
Tested Applications | ELISA, WB |
Host | Rabbit |
Recommended dilutions | WB: 1/500 - 1/3000, ELISA: 1/20000. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. |
Conjugation | Unconjugated |
Immunogen | The antiserum was produced against synthesized peptide derived from C-terminal of human 14-3-3 epsilon. |
Isotype | IgG |
Form | Liquid |
Purification | Purified from rabbit antiserum by affinity chromatography using epitope-specific immunogen. |
Storage | Aliquot and store at -20°C. Avoid repeated freeze/thaw cycles. |
UniProt Primary AC | P62258 (UniProt, ExPASy) |
UniProt Entry Name | 1433E_HUMAN |
KEGG | hsa:7531 |
String | 9606.ENSP00000264335 |
Buffer | PBS (without Mg2+ and Ca2+), pH 7.4, 150 mM NaCl, 0.02% sodium azide, 50% glycerol. |
Concentration | 1 mg/ml |
Availability | Shipped within 5-10 working days. |
Note | This product is for research use only. |
Abbexa是一家致力于为生命科学研究、药物研发及生物技术公司提供优质抗体、蛋白及检测试剂盒等产品的高科技生物技术公司。基于剑桥大学研发技术优势,Abbexa提供包括一抗、二抗、纯化蛋白、ELISA试剂盒、各种酶类及其它多种试剂与研究工具的大量生命科学研究产品。
目前Abbexa的产品涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、纯化蛋白质及生物试剂,此外,为满足研发人员特殊的实验需要,Abbexa还提供抗体/多肽定制服务。严格的质控标准保证了Abbex产品的高性能,如您对产品不满意,Abbexa将直接提供退/换货服务
CLIAKits 化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA) RNAInterferenceProducts RNA干扰试剂 RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。 由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。 1. RNAi抑制转座子活性 两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关 ①发现蠕虫mut-7基因参与RNAi并且与转座子的转座抑制有关; ②在果蝇中,参与RNAi的RNA解螺旋酶Spindle-E的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。 2. RNAi抵御病毒感染 在拟南芥中研究转基因引起基因沉默时发现,sgs2/sde1基因突变的拟南芥对病毒的侵染表现出高度的敏感性。 3. RNAi参与异染色质的形成和维持 Hall等研究表明,着丝粒同源重复序列和RNAi组分一起正负调节着异染色质的形成并共同促使异染色质组装成核;Vople等在敲除裂殖酵母(S.pombe)的RNAi途径基因(如Argonaute、Dicer、RDRP)时发现异染色质转录得到的dsRNA可以在RNAi途径的参与下,加工成siRNA,siRNA募集异染色质蛋白1(HP1),然后靶向性引起相应异染色质区域的转基因沉默。 4. RNAi参与机体的发育调控及生理代谢 RNAi只抑制转录后的基因,所以RNAi在生物体发育学研究中具有优势。Chuang等用RNAi技术进一步证实了AG、CLV3、AP1、PAN等已知功能基因在拟南芥花发育过程中的功能。在RNAi过程中形成的RISC复合物可根据不同情况分别利用siRNA或stRNA行使不同的功能,但最终均导致特定基因沉默。 IsotypeControl 同型对照 同型对照(IsotypeControl),使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色。 同型对照 同型对照的主要目的是确定一抗的结合是特异性的,而不是非特异性的Fc受体或与其他蛋白的相互作用。还可以用来竞争性的结合抗体,与功能阻断抗体发挥同样的功能。 同型对照要与一抗的来源,Ig分型和标记完全一致。 如果一抗是多抗,可以用annormalserum(与一抗相同的正常血清)(mustbethesamespeciesasprimaryantibody)。Thiscontroliseasytoachieveandcanbeusedroutinelyinimmunohistochemicalstaining.这个可以咨询试剂商。同型对照为免疫荧光标记中的阴性对照。由于荧光标记单抗的组来源不同,应选用相同来源的未标记单抗作为同型对照来调整背景染色。举个例子:比如检测一抗为单抗的mouseantiratCD11b,cloneOX-42purifiedIgG,那么它的isotype是mouseIgG2a,所以可以用purified(纯化的)mouseIgG2a来做OX-42的同型对照(IsotypeControl)。一般的的生物技术公司和国内的代理都有出售。 同型对照:是指与MoAb相同的、未免疫小鼠的免疫球蛋白亚类,若使用直接免疫荧光染色法,同型对照也应标记荧光色素,如IgG1FITC、IgG2a、PE等。主要考虑了细胞的自发荧光、FC受体介导的抗体结合和非特异性抗体结合等影响因素。此外,同型对照与MoAb所标记的荧光色素、浓度、F:P比值(标记的荧光色素与免疫球蛋白分子的比值)应该相同为最佳,这对准确设定阴性与阳性细胞的界标有重要意义,切忌使用与MoAb不相匹配的同型对照,最好为同一实验室、采用相同工艺或方法制备(如同一品牌)的产品。
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IgE的特点:IgE是血清浓度最低的免疫球蛋白 ,只有血清中IgG浓度的万分之一。IgE对热不稳定,是半衰期最短一的免疫球蛋白 ,只有2.8天,与细胞表面结合的IgE半衰期稍长,8~14天,IgE由变应原入侵部位(鼻咽、支气管、胃肠道)的黏膜固有层中的浆细胞合成。在各类免疫球蛋白中,IgE是合成率最低、分解率最高的。属于亲细胞抗体,过敏体质者的胎儿脐带血中IgE浓度可能升高,检测脐血中IgE浓度可用于评估胎儿过敏体质的可能性。
IgE检测方法:通常用ELISA方法检测总IgE。由于血清IgE浓度很低,一般酶免疫试验方法的敏感性不足以检出血清IgE,现在常规实验室检测血清IgE的试剂盒采用生物素——抗生物素蛋白 放大的ELISA。试剂盒中所含用于制定标准曲线的IgE标准品和检测结果的IgE浓度单位与其它免疫球蛋白 不同,不是用mg/L表示,而是用u/ml或ku/l表示。
IgE的正常值(参考范围):血清IgE水平在正常人群中呈偏态分布,即多数人为0或接近于0,IgE水平越高的人数越少。因此计算平均值时应计算几何平均值才能反映其真实情况,即用对数转换后其分布才能近似正态分布。
健康人群血清IgE水平与年龄关系较大,小儿和老年人的IgE水平低于成年人。新生儿血清中IgE水平很低,接近于零。随年龄增长,IgE水平也不断升高,5~7岁后接近正常人水平。按Pharmacia公司提供的参考范围,1个月以内<12KU/L,1岁<11KU/L,2~4岁<33KU/L,5岁以上至成人<85KU/L.
过敏性疾病患者的血清IgE水平可达2000~8000KU/L,当IgE水平高于2000KU/L时应考虑寄生虫感染.
有时血清总IgE水平检测结果为0或参考范围内低值,并不能排除过敏性疾病的可能,须结合临床表现和血清特异性IgE检测结果进行判断.
什么是特异性IgE检测(sIgE)?
通常所称的过敏原检测,并非真正检测血液样本中的过敏原分子,而是间接地检测其中针对某种过敏原的特异性IgE分子,特异性IgE检测实际上是检测过敏原特异性IgE,即检测样本中针对某种变应原的特异性IgE,从而间接地判断患者是否对某种过敏原过敏。
环境中常见的过敏原包括以下类别:
寄生虫和微生物:各种螨类(屋尘螨和粉尘螨等)、各种真菌(点青霉、烟曲霉、分枝孢霉、交连孢霉等)、蟑螂。
植物花粉:各种草花粉(豚草、葎草、蒿草)、各种树花粉(桑树、柏树、悬铃木、桦树、榆树、柳树、杨树等)。
动物皮毛:猫、狗、马、鸽子等动物的毛和皮屑。
过敏性疾病治疗的一场新革命
早在17世纪末,18世纪初,最早的显微镜被发明时,人们就已经知道人体内寄生着许许多的微生物,但是,那时的人们还没有意识到这些微生物在各种疾病的发生中扮演着怎样的角色。
直到19世纪末,一些科学家们提出了微生物致病学说,他们认为许多疾病是体内微生物造成的。这个革命性的理论提出后,医学家们开始努力识别那些能引起致死性疾病的微生物,如引起细菌性肺炎和结核病的微生物。医学家们还发明了许多药物试图杀灭这些可怕的致病微生物。
在这场人类与微生物进行的持久战争中,抗生素的发明可以说是人类取得伟大胜利的标志。从第二次世界大战末期开始,抗生素逐渐在世界范围内得到了广泛的应用,然而,从20世纪60年代开始,许多并非由病原微生物引发的慢性病或其它疾病的发病率急剧升高。过敏性哮喘就是一个典型的例子:没有任何证据证明感染某种病原微生物会引发哮喘,它也不具有传染性,但是在过去的40年间,其发病率却直线上升,成为儿童除呼吸道感染性疾病之后的发病率最高的常见病慢性病。
科学家们早在上世纪80年代末就开始注意这种奇怪的现象,有许多文献都提到了哮喘和过敏发病率上升的情况,但是直到最近,新的发现和新的理论才让人们意识到抗生素的滥用与这些疾病之间有着密切的关系,而且不是所有的微生物都会致病,许多事实表明,有些微生物有助于增强免疫力,可以预防或控制传统微生物致病学说无法解释的疾病。
益生菌对维持我们的健康至关重要。我们甚至认为可以把肠道内的一些微生物看做人体不可或缺的“器官”之一,无论它们所起的作用还是重要性,这些微生物完全可以和心脏、肺、肾脏等相提并论。这种器官最重要的功能 是使我们与日常生活中接触到的潜在有害微生物和平共处。如果这些微生物不能有效地发挥作用,人类也就无法保持健康,甚至无法生存。
对于儿童过敏性鼻炎、过敏性哮喘、儿童湿疹、儿童荨麻疹这些常见慢性过敏性疾病,非常困扰孩子的成长,值得我们提出的是,对于儿童过敏性疾病,除了药物治疗外,益生菌抗过敏免疫疗法,强调人体微生态平衡,认为过敏时应当将身体作为一个有机的整体看待,而不仅仅关注出现症状的那一部分,对于儿童过敏性哮喘发病率增高的病因中,医生们已经意识到“婴儿出生后过早使用抗生素,成为诱发过敏性哮喘发病的重要原因之一”,近十年,激素吸入剂已成为儿童过敏性咳嗽、过敏性哮喘的主要治疗手段,虽然吸入激素的治疗方法比起全身激素抗过敏副作用小,起效快,但是,我们仍然发现吸入激素的弊端,长期吸入激素的副作用以及过敏儿童治疗只局限于局部,得不到全面整个过敏反应系统的治疗,许多科学家不仅坚定地认同益生菌可以促进健康的观点,而且还发现了抗过敏益生菌菌种如唾液乳杆菌PM-A0006、格氏乳杆菌PM-A0005、约氏乳杆菌PM-A0009能有效平衡过敏免疫反应从而影响整个过敏性疾病的治疗进程。
由于这些安全、自然的抗过敏益生菌组合物康敏元抗过敏益生菌能够帮助我们应对过敏这种常见而又难以对付的过敏性咳嗽,过敏性哮喘等疾病。
呼吸道过敏症不完全是由过敏原引起的,真正的罪魁祸首是免疫系统本身。过敏体质患者的免疫系统不能正确识别花粉或真菌,它把这些无害物质识别成有害的微生物,进而发生了不应有的免疫应答:与哮喘发作一样,这些症状严重时可能会引发致命的后果。
抗过敏益生菌和过敏免疫系统的相关性研究
近年来,抗过敏益生菌调节免疫功能,平衡因TH2过度反应而引起的过敏反应这一机理在过敏性疾病免疫学领域产生了一个新理论,为这场关于抗过敏益生菌的革命铺平了道路。
康敏元抗过敏益生菌抗特异性IgE的非药物抗过敏免疫疗法
适合反复过敏或对多种物质过敏者以及有过敏体质者,对过敏性鼻炎,过敏性哮喘,过敏性咳嗽,荨麻疹,湿疹,异位性皮炎等过敏症状通过非药物抗过敏免疫疗法康敏元加强型益生菌对于湿疹(奶癣)的免疫调节改善一般是1-3个月,对于过敏性鼻炎过敏性咳嗽和过敏性哮喘的改善一般是40-60天会有自觉性过敏症状明显减轻的改善。
已有研究证实一些特定的益生菌如唾液乳杆菌和格氏乳杆菌经过完整临床测试:可定殖肠道刺激肠道内的免疫细胞进行免疫调节,对于过敏体质的调整发挥最佳功效。“益生菌调整过敏体质”早已在免疫学及医学界对导致过敏发生的根源已达成共识,根据基因的功能性分析,通过国际最新菌株筛选平台(SINT),运用基因芯片进行高效筛选及体外基因重组,找到了具有抗过敏基因的益生菌菌株,研究证实,唾液乳杆菌LS,格氏乳杆菌,约氏乳杆菌,副干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌都具有显著的抗过敏功能,其中唾液乳杆菌是研究最多的抗过敏的乳酸菌分离菌株,唾液乳杆菌与格氏乳杆菌,约氏乳杆菌,副干酪乳杆菌等组成五种菌体复方抗过敏菌株群康敏元益生菌,明显缩小了抗过敏功能个体差异化,相比单一抗过敏菌株免疫调节抗过敏能力更加全面。
现配现用
链接很容易,就用EDC或者CMC等碳二亚胺,是最容易在羧基和氨基之间催化形成酰胺键,反应条件就是0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,pH<7反应快,不过pH=7或稍微pH>7也关系不大。EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,而且一般的蛋白质的分子表面总有Lys,Arg,Asn,Gln,所以游离在分子表面的羧基和氨基总是不少的,参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可。很容易反应,而且EDC或者CMC等碳二亚胺是零臂连接试剂,用于空间位阻,形成多分子交联可能较小,即使形成了也很容易用分子筛层析按照分子量区分开。
参与反应的两种蛋白质用大致10:1的比例混合(哪种蛋白质便宜,哪种蛋白质的物质的量就大些,但是这不是全部原因),为了避免两种蛋白质之间发生交联成为串联,因为一种蛋白质形成串联的可能性低一些;即使要形成串联的蛋白质串珠,最好也不要是价格高的那种;另外,EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高,室温下即会催化,所以要在0到4度,过夜,用磁力搅拌子温和搅拌,一方面避免碳二亚胺催化活性太高形成串联的蛋白质串珠,另一方面,保护蛋白质不变性;反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度(别用储存液的浓度)即可,为什么?因为浓度高了更易形成串联的蛋白质串珠结构,浓度低了,没有反应成功,通过分子筛层析还可以分离出来接着连接,如果形成了酰胺键再要专一性切开就没有那么容易了。
叶酸和生物素都属于B族维生素,
对维持机体的生理功能有重要作用。
SP法是生物素-卵白素系统:生物素为一种小分子维生素,卵白素又称为抗生物素,SP法的染色步骤为一抗~生物素化二抗~ABC复合物~DAB显色,其中ABC复合物是由一分子抗生物素蛋白与三分子结合有HRP的生物素组合成的复合物。
PV法属于非生物素系统免疫组化方法,应该是称为二步法,是以高分子的葡聚糖为载体将多个二抗分子和酶结合在一起,代替了传统的二抗和三抗,是检测变得简单而且增加了敏感性。