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生物素(Biotin)和地高辛(digoxigenin)都是非放射性标记物是。二者都是半抗原。生物素是一种小分子水溶性维生素,对亲和素有独特的亲和力,两者能形成稳定的复合物,通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。地高辛是一种类固醇半抗原分子,可利用其抗体进行免疫检测,原理类似于生物素的检测。地高辛标记核酸探针的检测灵敏度可与放射性同位素标记的相当,而特异性优于生物素标记,其应用日趋广泛。
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先用限制性内切酶在DNA上切出两个粘性末端,然后在DNA连接酶的配合下用与这个粘性末端相配的有标志性的(可以是放射性和荧光性等同位素一般属于放射性)DNA片段标记出来,简单地说就是这样~
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