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| Product Name | Pancreatic Polypeptide, humanAPLEPVYPGDNATPEQMAQYAADLRRYINMLTRPRY - NH2 |
| Size | 0.5 mg |
| Catalog # | AS-22866 |
| US$ | $125 |
| Purity | % Peak Area By HPLC ≥ 95% |
Pancreatic Polypeptide (PP) is a 36-amino acid anorexigenic peptide hormone secreted by the PP cells of pancreas. It is rapidly released postprandially and continues to remain elevated for approximately 4-6 hours after a meal. PP modulates food intake, and is absent in children with Prader-Willi syndrome. Secretion of PP can be accomplisehd through electrical stimulation of the vagus nerve. Cholecystokinin (CCK) and Gastrin appear to be involved in its secretion, while Ghrelin and Obestatin are reported to inhibit its release. PP is related to Peptide YY and Neuropeptide Y (NPY). | |
| Detailed Information |  Material Safety Data Sheets (MSDS) |
| Storage | -20°C |
| References | Williams, JA. Pancreapedia (2014), doi: 10.3998/panc.2014.4Khandekar, N. et al. Mol Cell Endocrinol (2015), doi: 10.1016/j.mce.2015.06.028 |
| Molecular Weight | 4181.8 |
| APLEPVYPGDNATPEQMAQYAADLRRYINMLTRPRY-NH2 | |
| Sequence(Three-Letter Code) | H - Ala - Pro - Leu - Glu - Pro - Val - Tyr - Pro - Gly - Asp - Asn - Ala - Thr - Pro - Glu - Gln - Met - Ala - Gln - Tyr - Ala - Ala - Asp - Leu - Arg - Arg - Tyr - Ile - Asn - Met - Leu - Thr - Arg - Pro - Arg - Tyr - NH2 |
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2021-08-24
技术文章：生物素标记试剂和试剂盒选择指南DNA 探针的发展更多标记试剂盒文章请点击：http://www.e1617.com/biaojishijihe-2268/... 查看更多
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2021-08-21
DIG DNA Labeling and Detection Kit地高辛DNA标记和检测试剂盒是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Roche品牌的试剂，产品来源于Roche。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的DIG DNA Labeling and Detection Kit地高辛DNA标记和检测试剂盒试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售DIG DNA Labeling and Detection Kit地高辛DNA标记和检测试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业DIG DNA Lab 查看更多
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2021-09-15
DIG Oligonucleotide Tailing Kit,寡核苷酸加尾地高辛标记试剂盒是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Roche品牌的试剂，产品来源于Roche。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的DIG Oligonucleotide Tailing Kit,寡核苷酸加尾地高辛标记试剂盒试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售DIG Oligonucleotide Tailing Kit,寡核苷酸加尾地高辛标记试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业DIG Oligonucleoti 查看更多
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2021-08-27
地高辛是在心血管内科应用最久的药物之一，传统上它用于心房颤动（AF）及心力衰竭（HF）患者。在过去 20 年里，该药的使用明显降低。而在 2012 年，欧洲心脏病学会（ESC）心力衰竭指南中指出，对于心力衰竭（HF）和左室射血分数（LVEF）≤40％的患者，如果维持在窦性心律，则 "地高辛可以使用"。这个推荐是基于洋地黄研究试验（DIG），其研究了 6800 例心力衰竭患 查看更多
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2021-09-06
正常心肌收缩的电活动起源于窦房结，其规律产生动作电位性收缩（正常 60～100bpm），并迅速经由心房传导至房室结，心房泵血而延迟后，激动电流由经希氏束下传至各束支，包括分别位于室间隔左室面的左束支和右室面的右束支，并终止于浦肯野纤维，再经大量细小纤维系统迅速传导递至心尖区，并由此扩散到心室肌全层。起搏细胞内外的这一过程的维持有赖 Na+, K+, Ca2+, Cl- 查看更多
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2021-09-16
10-D05C-1 mg1 mgfitzgeraldFitzgerald,Inc.Fitzgerald/Digoxin antibody/10-D05C/1 mg 查看更多
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2021-08-30
RA患者血清中抗RAN抗体的阳性率为93%～95%，明显高于其他各种类型关节炎的患者约19%及健康人约16%，可作为诊断的一项有力证据。... 查看更多
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2021-08-26
地高辛是在心血管内科应用最久的药物之一，传统上它用于心房颤动（AF）及心力衰竭（HF）患者。在过去 20 年里，该药的使用明显降低。而在 2012 年，欧洲心脏病学会（ESC）心力衰竭指南中指出，对于心力衰竭（HF）和左室射血分数（LVEF）≤40％的患者，如果维持在窦性心律，则 "地高辛可以使用"。这个推荐是基于洋地黄研究试验（DIG），其研究了 6800 例心力衰竭患 查看更多
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2021-08-25
地高辛抗体大全—原装进口酶标及各种荧光标记抗地高辛抗体 地高辛（Digoxin）是一种从洋地黄提取出的beta抑制剂性的药物，被广泛用于治疗高血压、瓣膜性心脏病、先天性心脏病等急性和慢性心功能不全的一种药物。由于地高辛的治疗指数狭窄，用药过量与用药不足时的症状相似，加之其个体差异大，故中毒的发生率高，是临床上最难掌握药物之一。目前解除地高辛毒性的最有效的方法是应用地高辛抗体。此外，采用抗地高辛抗体的免疫分析法监测血清/血浆地... 查看更多
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DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒是由北京鸿跃科技有限公司代理或销售的Roche品牌的试剂，产品来源于Roche。北京鸿跃科技有限公司是中国最权威的DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒试剂销售服务商之一，在北京等地方销售DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的DIG(地高辛)DNA标记及检测试剂盒产品 查看更多
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2021-08-13
DIG Luminescent Detection Kit 地高辛发光检测试剂盒是由上海前尘生物科技有限公司代理或销售的Roche品牌的试剂，产品来源于Roche。上海前尘生物科技有限公司是中国最权威的DIG Luminescent Detection Kit 地高辛发光检测试剂盒试剂销售服务商之一，在浦东新区等地方销售DIG Luminescent Detection Kit 地高辛发光检测试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业DIG Luminescent Detection Kit 地高辛发光 查看更多
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2021-08-29
JACC 杂志发表了一篇题为：“Increased Mortality Associated With Digoxin in Contemporary Patients With Atrial Fibrillation”的文章，本文为针对此文章的述评。虽然地高辛和相关强心苷类药物临床应用历史悠久，或者也正是因为历史悠久，这些药物对临床长期预后影响的证据相当有限。直至 20 世纪 90 年代后期才完成一项明确地高辛在心衰治疗中作用的大型随机试验，但该试验主要研究终点为心衰 查看更多
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飞利浦对数字化医用X射线摄影系统DuraDiagnost主动召回123
宁静晴天0072021-07-27
DIG-DNA标记与检测 一、探针DNA标记方法 步骤 ： 1．10ng~3ugDNA每管，双蒸水定量至总体积15ul 2．沸水水浴10分钟后迅速冰浴 3．加入 5号试剂 2ul ， 6号试剂 2ul ，7号试剂 1ul 4．37度1小时~20小时 5．中止反应 加2ul 0.2M EDTA (pH 8.0) 和/。
抗慢性心功能不全药物有哪些?__123
2018-02-10
近年对收缩性心力衰竭的防治有重大进展。评价疗效的方法除根据症状、血流动力效应、运动耐量和生活质量的改善外，还增加了长期治疗的安全性、病死率、生存期、神经激素系统激活 病因治疗程度等指标。在防治的对策上日益强调预防心力衰竭的形成和发展的重要性。对无症状的和轻度有症状的心力衰竭，慢性心功能不全的药物治疗是什么？主张用血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）治疗以改善预后；对重度有症状的心力衰竭亦宜用ACEI联合利尿剂和（或）地高辛治疗，以减轻症状、减少致残和延长生存期。具体防治措施包括：
慢性心功能不全的病因的防治
风湿性心瓣膜病在我国仍属慢性心力衰竭的常见病因。应用青霉素治疗链球菌感染，已使风湿热和风湿性心瓣膜病在发达国家基本绝迹。择期手术治疗风湿性心瓣膜病，有效地控制高血压以及积极防治冠脉病变与心肌缺血等病因治疗；消除心力衰竭的诱因如控制感染、避免体力过劳和精神应激等。可预防心力衰竭的发生。
收缩性心力衰竭的治疗
1、减轻心脏负荷包括减少体力活动和精神应激。严重者宜绝对卧床休息，在心功能逐步改善过程中，适当下床活动，以免卧床休息过久并发静脉血栓形成或肺炎。此外，应注意解除精神负担，必要时给予小量镇静剂。
2、限制钠盐摄入适当限制日常饮食中的钠盐摄入量，食盐量2～5g，忌盐腌制食物。应用利尿剂引起大量利尿时，钠盐限制不宜过严，以免发生低钠血症。
3、利尿剂的应用利尿剂通过抑制肾小管不同部位Na+重吸收，或增加肾小球Na+滤过，增进水、Na+排出，从而降低心室充盈压，减轻肺循环和（或）体循环瘀血所致临床症状，其疗效肯定，但对心力衰竭整体过程的影响（如生存率等）不明，长期应用利尿剂理论上可能产生下列不良作用：①降低心排血量，从而激活RAS，血浆肾素和醛固酮增高。②导致低钾血症。③降低糖耐量。④导致高尿酸血症。⑤导致高脂血症。⑥导致室性心律失常。目前利尿剂属治疗心力衰竭伴水、钠潴留患者的一线药物，大多与其他心力衰竭治疗药物（如地高辛、ACE抑制剂）联合应用，单纯舒张性心力衰竭者利尿剂宜慎用。
4、正性肌力药物的应用由于慢性心力衰竭患者心肌收缩性减弱，改善心肌收缩功能曾被认为是心力衰竭的首要治疗。正性肌力药物能使心室功能曲线左上移，增加每搏作功，降低心室充盈压，从而使扩大的心脏缩小。虽然在增加心肌收缩的同时也增加心肌能量消耗，但扩大的心脏缩小后，其心肌氧耗和冠脉血供分别较心脏扩大时降低和改善，心肌能量供需的不平衡因而并不加重，甚至有所减轻。正性肌力药减轻症状、改善运动耐量和心功分级的效果明显，但多中心随机对照慢性心力衰竭患者长期临床治疗试验结果表明除洋地黄外，大多具有增高病死率与室性心律失常发生率的倾向。ACEI则不仅减轻症状、改善运动耐量和心功分级的效果更显著，且能降低病死率和病残率。因而大多数临床医师选用ACEI作为与利尿剂联用，以治疗窦性心律的慢性心力衰竭患者。
西安医专附属医院 内科心血管专家杜志桢，1976年毕业于西安医科大学医疗系。2002年晋升为主任医师，从事内科心血管疾病临床工作30余年。对冠心病、心肌缺血、心绞痛及高血压病等治疗，积累了丰富的临床经验。对心脑血管相关疾病如高脂血症、心肾功能不全的治疗亦有较成熟经验。曾担任西安医学会心血管病学会委员。前列腺素E1治疗急性肾衰获市新技术项目奖(94年)。有关心血管病近10余篇论文公开发表。为东南大学《现代医学》杂志编委。
职称：主任医师
医院科室：西安医学专科学校附属医院心内科
擅长：冠心病、高血压病、心肌病、心肌炎、心力衰竭、心律失常、心肌梗塞、心肌缺血、心绞痛治疗。
治疗病名：冠心病、心梗、顽固心律失常、高血压心脏病、心衰、心绞痛、肺心病、风心病高脂血症、动脉硬化等。展开
慢性心功能不全的病因的防治
风湿性心瓣膜病在我国仍属慢性心力衰竭的常见病因。应用青霉素治疗链球菌感染，已使风湿热和风湿性心瓣膜病在发达国家基本绝迹。择期手术治疗风湿性心瓣膜病，有效地控制高血压以及积极防治冠脉病变与心肌缺血等病因治疗；消除心力衰竭的诱因如控制感染、避免体力过劳和精神应激等。可预防心力衰竭的发生。
收缩性心力衰竭的治疗
1、减轻心脏负荷包括减少体力活动和精神应激。严重者宜绝对卧床休息，在心功能逐步改善过程中，适当下床活动，以免卧床休息过久并发静脉血栓形成或肺炎。此外，应注意解除精神负担，必要时给予小量镇静剂。
2、限制钠盐摄入适当限制日常饮食中的钠盐摄入量，食盐量2～5g，忌盐腌制食物。应用利尿剂引起大量利尿时，钠盐限制不宜过严，以免发生低钠血症。
3、利尿剂的应用利尿剂通过抑制肾小管不同部位Na+重吸收，或增加肾小球Na+滤过，增进水、Na+排出，从而降低心室充盈压，减轻肺循环和（或）体循环瘀血所致临床症状，其疗效肯定，但对心力衰竭整体过程的影响（如生存率等）不明，长期应用利尿剂理论上可能产生下列不良作用：①降低心排血量，从而激活RAS，血浆肾素和醛固酮增高。②导致低钾血症。③降低糖耐量。④导致高尿酸血症。⑤导致高脂血症。⑥导致室性心律失常。目前利尿剂属治疗心力衰竭伴水、钠潴留患者的一线药物，大多与其他心力衰竭治疗药物（如地高辛、ACE抑制剂）联合应用，单纯舒张性心力衰竭者利尿剂宜慎用。
4、正性肌力药物的应用由于慢性心力衰竭患者心肌收缩性减弱，改善心肌收缩功能曾被认为是心力衰竭的首要治疗。正性肌力药物能使心室功能曲线左上移，增加每搏作功，降低心室充盈压，从而使扩大的心脏缩小。虽然在增加心肌收缩的同时也增加心肌能量消耗，但扩大的心脏缩小后，其心肌氧耗和冠脉血供分别较心脏扩大时降低和改善，心肌能量供需的不平衡因而并不加重，甚至有所减轻。正性肌力药减轻症状、改善运动耐量和心功分级的效果明显，但多中心随机对照慢性心力衰竭患者长期临床治疗试验结果表明除洋地黄外，大多具有增高病死率与室性心律失常发生率的倾向。ACEI则不仅减轻症状、改善运动耐量和心功分级的效果更显著，且能降低病死率和病残率。因而大多数临床医师选用ACEI作为与利尿剂联用，以治疗窦性心律的慢性心力衰竭患者。
西安医专附属医院 内科心血管专家杜志桢，1976年毕业于西安医科大学医疗系。2002年晋升为主任医师，从事内科心血管疾病临床工作30余年。对冠心病、心肌缺血、心绞痛及高血压病等治疗，积累了丰富的临床经验。对心脑血管相关疾病如高脂血症、心肾功能不全的治疗亦有较成熟经验。曾担任西安医学会心血管病学会委员。前列腺素E1治疗急性肾衰获市新技术项目奖(94年)。有关心血管病近10余篇论文公开发表。为东南大学《现代医学》杂志编委。
职称：主任医师
医院科室：西安医学专科学校附属医院心内科
擅长：冠心病、高血压病、心肌病、心肌炎、心力衰竭、心律失常、心肌梗塞、心肌缺血、心绞痛治疗。
治疗病名：冠心病、心梗、顽固心律失常、高血压心脏病、心衰、心绞痛、肺心病、风心病高脂血症、动脉硬化等。展开
如何选择第二抗体123
小明x12m2021-07-20
老年人怎样吃地高辛不中毒
【抗心率失常】抗心律失常药主要有哪几类?各有什么代表..._有问必答123
2018-02-05
第一类物：Ⅰa组代表物奎尼丁、普卡因胺、N-乙酰普鲁卡因、吡二丙胺等；Ⅰb组代表物利多卡因、苯妥英钠、美西律、安博律定、妥卡胺、乙吗噻嗪等；Ⅰc组代表物恩卡胺、氟卡胺、乙吗胺、普罗帕酮等。 第二类物：代表物心得安、氨酰心安、美多心安，心得平、心得舒、心得静等。 第三类物：代表物溴苄铵、乙胺碘呋酮等。 第四类物：代表物异搏定、硫氮艹卓酮、心可定、苄丙洛等。 第五类物：洋地黄类物如西地兰、毒毛旋花子甙K、地高辛等。
单项选择题:不宜用肝素抗凝血进行TDM的药物是() A.苯妥英钠 B...123
2011LJ20112018-02-09
很多年前, 一个爸爸和一个妈妈想休假，所以他们决定晚上去城镇。他们叫来最信任一个人来照看孩子。当保姆来的时候，他们的连个孩子已经在床上睡着了。所以保姆只是看了看孩子是否睡的好，就坐下了。
深夜，保姆觉得无聊就想去楼下看电视。但是她看不了，因为楼下没有电视（因为孩子的父母不希望他们的孩子看太多垃圾）。她就打电话给孩子的父母，问是否可以在他们的卧室看电视，当然孩子的父母同意了。
但保姆又想要最后一个请求。
她问是否可以用毯子或者衣服盖住那小丑雕像，因为那使她感到很害怕。
电话沉默了一会。
（此时爸爸在和保姆通话）
他说：带孩子离开房间……
我们将会叫警察……我们从来没有什么小丑雕像。
那小丑很可能是一个从监狱逃出来的杀人犯。
电话里沉默了一会儿。
（正在跟保姆通话的孩子的父亲）说：带上孩子们，离开房子……我们会通知警察……我们没有一个小丑雕像……
孩子们和保姆被小丑谋杀了。
结果是，小丑是一个从监狱里逃出来的杀人犯。
如果你不在5分钟内转发这个贴子，这个小丑在凌晨3点时将会拿着刀站在你的床前。
我在这里发了，这就是恶魔般的小丑没有杀我的原因
深夜，保姆觉得无聊就想去楼下看电视。但是她看不了，因为楼下没有电视（因为孩子的父母不希望他们的孩子看太多垃圾）。她就打电话给孩子的父母，问是否可以在他们的卧室看电视，当然孩子的父母同意了。
但保姆又想要最后一个请求。
她问是否可以用毯子或者衣服盖住那小丑雕像，因为那使她感到很害怕。
电话沉默了一会。
（此时爸爸在和保姆通话）
他说：带孩子离开房间……
我们将会叫警察……我们从来没有什么小丑雕像。
那小丑很可能是一个从监狱逃出来的杀人犯。
电话里沉默了一会儿。
（正在跟保姆通话的孩子的父亲）说：带上孩子们，离开房子……我们会通知警察……我们没有一个小丑雕像……
孩子们和保姆被小丑谋杀了。
结果是，小丑是一个从监狱里逃出来的杀人犯。
如果你不在5分钟内转发这个贴子，这个小丑在凌晨3点时将会拿着刀站在你的床前。
我在这里发了，这就是恶魔般的小丑没有杀我的原因
磁力搅拌器中,搅拌子造成的漩涡是否会吸引搅拌子.如果不是,搅拌子...123
2018-02-08
其中普罗帕酮对地高辛和倍他乐克均有影响，应避免同时使用或调整剂量。
不宜与地高辛联用的药物123
山丘之王10212018-01-31
孩子心脏患病，要吃这三样药，强的松特别苦，能不能加糖混在一起吃？
这三样药是能混合在一起吃？
谢谢。
这三样药是能混合在一起吃？
谢谢。
抗心力衰竭药物有哪些,阐述其作用特点并举例 123
悠悠qVfg徎2018-01-30
主要为一些强心苷类正性肌力药物和非强心苷类。强心苷类中以地高辛最为常用。此药中毒剂量与治疗剂量极为相近。
地高辛有什么禁忌症吗?为什么?__123
2021-07-22
哪种情况是应用地高辛的禁忌症
生物素化鼠抗地高辛(ISH)123
蘑菇神k332021-07-25
生物素(Biotin)和地高辛(digoxigenin)都是非放射性标记物是。二者都是半抗原。生物素是一种小分子水溶性维生素，对亲和素有独特的亲和力，两者能形成稳定的复合物，通过连接在亲和素或抗生物素蛋白上的显色物质(如酶、荧光素等)进行检测。地高辛是一种类固醇半抗原分子，可利用其抗体进行免疫检测，原理类似于生物素的检测。地高辛标记核酸探针的检测灵敏度可与放射性同位素标记的相当，而特异性优于生物素标记，其应用日趋广泛。
实验九凋亡细胞的诱导及形态学观察123
小灰机5952018-01-19
1、普通光学显微镜观察
2、透射电子显微镜观察
3、荧光显微镜观察 1）用苏木素-伊红（HE）染色：细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色（凋亡细胞），正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色，坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失
2)Giemsa染色法、瑞氏染色法等，正常细胞核的色泽均一，凋亡细胞染色变深，坏死细胞染色浅或没染上颜色 1）细胞体积变小，全面皱缩；
2）凋亡小体为数个圆形小体围绕在细胞周围。 凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。
细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状或呈折缝样，部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。 常用的荧光染料：丫啶橙、 PI 、DAPI、Hoechst33258 和Hoechst33342、EB等
Hoechst 33342、Hoechst 33258、 DAPI三种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
1)PI双染色法基本原理
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，能进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高。
DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。
碘化丙啶（PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。 原理：脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反应，特异准确的定位出正在凋亡的细胞，因而可在普通光学显微镜下进行观察。
毛地黄植物是地高辛的唯一来源。在所有动物组织中几乎不存在能与抗地高辛杭体结合的配体，因而非特异性反应很低。抗地高辛的特异性抗体与脊椎动物甾体激素的交叉反应不到1%，若此抗体的Fc部分通过蛋白酶水解的方法除去后，则可完全排除细胞Fc受体非特异性的吸附作用。
该方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。 1、磷酸缓冲液PBS（pH7.4）：磷酸钠盐 50mM，NaCl 200mM。
2、蛋白酶K(200μg/ml，pH7.4）：蛋白酶K 0.02g；PBS 100ml。
3、含2%H2O2的PBS缓冲液（pH7.4）：H2O2 2.0ml；PBS缓冲液 98.0ml。
4、TdT酶缓冲液（新鲜配）：Trlzma碱 3.63g用 0.1N HCl调节pH至 7.2，加ddH2O定容到1000ml；再加入二甲砷酸钠 29．96g和氯化钴0.238g。
5、TdT酶反应液：TdT酶32μl；TdT酶缓冲液 76μl，混匀，置于冰上备用。
6、洗涤与终止反应缓冲液：氯化钠 17. 4g；柠檬酸钠 8.82g；ddH2O 1000ml
7、0.05%二氨基联苯（DAB）溶液：DAB 5mg；PBS 10ml，pH7.4，临用前过滤后，加过氧化氢至0.02%。
8、0.5%甲基绿（pH4.0）：甲基绿0.5g；0.1M乙酸钠100ml。
9、100%丁醇，100%、95%、90%、80%和70%乙醇，二甲苯，10%中性甲醛溶液，乙酸，松香水等。
10、过氧化物酶标记的抗地高辛抗体（ONCOR） 1、标本预处理：
⑴石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中，用二甲苯洗两次，每次5min。用无水乙醇洗两次，每次3min。用95%和75%乙醇各洗一次，每次3min。用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug/ml），于室温水解15min，去除组织蛋白。用蒸馏水洗4次，每次2min，然后按下述步骤2进行操作。
⑵冰冻组织切片预处理：将冰冻组织切片置10%中性甲醛中，于室温固定10min后，去除多余液体。用PBS洗两次，每次5min。置乙醇：乙酸（2：1）的溶液中，于-20℃处理5min，去除多余液体。用PBS洗两次，每次5min，然后按下述步骤2进行操作。
⑶培养的或从组织分离的细胞的预处理：将约 5 × 107个/ml细胞于 4%中性甲醛室温中固定 10min。在载玻片上滴加 50～100μl细胞悬液并使之干燥。用PBS洗两次，每次5min，然后按下述步骤2进行操作。
2、色缸中加入含2%过氧化氢的PBS，于室温反应5min。用PBS洗两次，每次5min。
3、用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，立即在切片上加2滴 TdT酶缓冲液，置室温1～5min。
4、用滤纸小心吸去切片周围的多余液体，立即在切片上滴加 54μl TdT酶反应液，置湿盒中于37C反应 1hr（注意：阴性染色对照，加不含TdT酶的反应液）。
5、将切片置于染色缸中，加入已预热到37℃的洗涤与终止反应缓冲液，于37℃保温30min，每10min将载玻片轻轻提起和放下一次，使液体轻微搅动。
6、组织切片用PBS洗 3次，每次 5min后，直接在切片上滴加两滴过氧化物酶标记的抗地高辛抗体，于湿盒中室温反应30min。
7、用PBS洗4次，每次5min。
8、在组织切片上直接滴加新鲜配制的0.05%DAB溶液，室温显色3～6min。
9、用蒸馏水洗4次，前3次每次1min，最后1次5min。
10、于室温用甲基绿进行复染10min。用蒸馏水洗3次，前两次将载玻片提起放下10次，最后1次静置30s。依同样方法再用100%正丁醇洗三次。
11、用二甲苯脱水3次，每次2min，封片、干燥后，在光学显微镜下观察并记录实验结果。 一定要设立阳性和阴性细胞对照。阳性对照的切片可使用DNaseI部分降解的标本，阳性细胞对照可使用地塞米松（1μM）处理3-4hr的大、小鼠胸腺细胞或人外周血淋巴细胞。阴性对照不加TdT酶，其余步骤与实验组相同。
细胞产生不可修复的DNA损伤后通常会程序性死亡，或称凋亡。然而在肿瘤细胞中这一机制失去作用，所以它能够肆意增殖，拒绝接受“自杀”的命令。德国科学家发现了其中的可能原因——肿瘤细胞会降解一种能触发凋亡的蛋白。抑制这种蛋白的降解能够使凋亡机制恢复作用，并将提升放疗和化疗的效力。相关论文发表在《自然—细胞生物学》（Nature Cell Biology）上。
严重DNA损伤后触发凋亡的其中一类蛋白是HIPK2分子。德国癌症研究中心的Thomas Hofmann和同事研究发现，HIPK2不断在健康细胞中产生，但一种名为Siah-1的酶将它标记为“垃圾”，所以它又立刻被降解。
轻微损伤的细胞会进入一种低级警戒状态——短时间内抑制HIPK2的降解。一旦损伤得到修复，细胞会立即恢复对HIPK2的降解。只有在严重损伤（比如DNA双链均遭破坏）的细胞中，HIPK2的降解才被永久性地抑制。结果HIPK2不断积累，触发凋亡，细胞自杀。
研究人员推测，这可能就是放疗和化疗有时失效的原因。这两种治疗方法都会严重损伤肿瘤细胞，最终导致它们的程序性死亡。Thomas Hofmann说：“如果有抵抗发生，经常是由于肿瘤细胞‘拒绝’执行自杀的命令。”
研究人员在实验中抑制了Siah-1酶，结果发现，即使在轻微损伤的细胞中，HIPK2也能够积聚，凋亡也被触发。Hofmann推测，“癌医学将可能利用这一发现。比如，我们可以将Siah-1抑制剂与放疗或化疗结合使用，从而将细胞拉回到凋亡机制中来。向左转|向右转
2、透射电子显微镜观察
3、荧光显微镜观察 1）用苏木素-伊红（HE）染色：细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色（凋亡细胞），正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色，坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失
2)Giemsa染色法、瑞氏染色法等，正常细胞核的色泽均一，凋亡细胞染色变深，坏死细胞染色浅或没染上颜色 1）细胞体积变小，全面皱缩；
2）凋亡小体为数个圆形小体围绕在细胞周围。 凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。
细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状或呈折缝样，部分染色质出现浓缩状态；Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；Ⅱb期的细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。 常用的荧光染料：丫啶橙、 PI 、DAPI、Hoechst33258 和Hoechst33342、EB等
Hoechst 33342、Hoechst 33258、 DAPI三种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。
1)PI双染色法基本原理
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，能进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高。
DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。
碘化丙啶（PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而将细胞核染红。因此将Annexin-V与PI匹配使用，就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。 原理：脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶（过氧化物酶或碱性磷酸酶）的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下，过氧化物酶可产生很强的颜色反应，特异准确的定位出正在凋亡的细胞，因而可在普通光学显微镜下进行观察。
毛地黄植物是地高辛的唯一来源。在所有动物组织中几乎不存在能与抗地高辛杭体结合的配体，因而非特异性反应很低。抗地高辛的特异性抗体与脊椎动物甾体激素的交叉反应不到1%，若此抗体的Fc部分通过蛋白酶水解的方法除去后，则可完全排除细胞Fc受体非特异性的吸附作用。
该方法可以用于福尔马林固定的石蜡包埋的组织切片、冰冻切片和培养的或从组织中分离的细胞凋亡测定。 1、磷酸缓冲液PBS（pH7.4）：磷酸钠盐 50mM，NaCl 200mM。
2、蛋白酶K(200μg/ml，pH7.4）：蛋白酶K 0.02g；PBS 100ml。
3、含2%H2O2的PBS缓冲液（pH7.4）：H2O2 2.0ml；PBS缓冲液 98.0ml。
4、TdT酶缓冲液（新鲜配）：Trlzma碱 3.63g用 0.1N HCl调节pH至 7.2，加ddH2O定容到1000ml；再加入二甲砷酸钠 29．96g和氯化钴0.238g。
5、TdT酶反应液：TdT酶32μl；TdT酶缓冲液 76μl，混匀，置于冰上备用。
6、洗涤与终止反应缓冲液：氯化钠 17. 4g；柠檬酸钠 8.82g；ddH2O 1000ml
7、0.05%二氨基联苯（DAB）溶液：DAB 5mg；PBS 10ml，pH7.4，临用前过滤后，加过氧化氢至0.02%。
8、0.5%甲基绿（pH4.0）：甲基绿0.5g；0.1M乙酸钠100ml。
9、100%丁醇，100%、95%、90%、80%和70%乙醇，二甲苯，10%中性甲醛溶液，乙酸，松香水等。
10、过氧化物酶标记的抗地高辛抗体（ONCOR） 1、标本预处理：
⑴石蜡包埋的组织切片预处理：将组织切片置于染色缸中，用二甲苯洗两次，每次5min。用无水乙醇洗两次，每次3min。用95%和75%乙醇各洗一次，每次3min。用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug/ml），于室温水解15min，去除组织蛋白。用蒸馏水洗4次，每次2min，然后按下述步骤2进行操作。
⑵冰冻组织切片预处理：将冰冻组织切片置10%中性甲醛中，于室温固定10min后，去除多余液体。用PBS洗两次，每次5min。置乙醇：乙酸（2：1）的溶液中，于-20℃处理5min，去除多余液体。用PBS洗两次，每次5min，然后按下述步骤2进行操作。
⑶培养的或从组织分离的细胞的预处理：将约 5 × 107个/ml细胞于 4%中性甲醛室温中固定 10min。在载玻片上滴加 50～100μl细胞悬液并使之干燥。用PBS洗两次，每次5min，然后按下述步骤2进行操作。
2、色缸中加入含2%过氧化氢的PBS，于室温反应5min。用PBS洗两次，每次5min。
3、用滤纸小心吸去载玻片上组织周围的多余液体，立即在切片上加2滴 TdT酶缓冲液，置室温1～5min。
4、用滤纸小心吸去切片周围的多余液体，立即在切片上滴加 54μl TdT酶反应液，置湿盒中于37C反应 1hr（注意：阴性染色对照，加不含TdT酶的反应液）。
5、将切片置于染色缸中，加入已预热到37℃的洗涤与终止反应缓冲液，于37℃保温30min，每10min将载玻片轻轻提起和放下一次，使液体轻微搅动。
6、组织切片用PBS洗 3次，每次 5min后，直接在切片上滴加两滴过氧化物酶标记的抗地高辛抗体，于湿盒中室温反应30min。
7、用PBS洗4次，每次5min。
8、在组织切片上直接滴加新鲜配制的0.05%DAB溶液，室温显色3～6min。
9、用蒸馏水洗4次，前3次每次1min，最后1次5min。
10、于室温用甲基绿进行复染10min。用蒸馏水洗3次，前两次将载玻片提起放下10次，最后1次静置30s。依同样方法再用100%正丁醇洗三次。
11、用二甲苯脱水3次，每次2min，封片、干燥后，在光学显微镜下观察并记录实验结果。 一定要设立阳性和阴性细胞对照。阳性对照的切片可使用DNaseI部分降解的标本，阳性细胞对照可使用地塞米松（1μM）处理3-4hr的大、小鼠胸腺细胞或人外周血淋巴细胞。阴性对照不加TdT酶，其余步骤与实验组相同。
细胞产生不可修复的DNA损伤后通常会程序性死亡，或称凋亡。然而在肿瘤细胞中这一机制失去作用，所以它能够肆意增殖，拒绝接受“自杀”的命令。德国科学家发现了其中的可能原因——肿瘤细胞会降解一种能触发凋亡的蛋白。抑制这种蛋白的降解能够使凋亡机制恢复作用，并将提升放疗和化疗的效力。相关论文发表在《自然—细胞生物学》（Nature Cell Biology）上。
严重DNA损伤后触发凋亡的其中一类蛋白是HIPK2分子。德国癌症研究中心的Thomas Hofmann和同事研究发现，HIPK2不断在健康细胞中产生，但一种名为Siah-1的酶将它标记为“垃圾”，所以它又立刻被降解。
轻微损伤的细胞会进入一种低级警戒状态——短时间内抑制HIPK2的降解。一旦损伤得到修复，细胞会立即恢复对HIPK2的降解。只有在严重损伤（比如DNA双链均遭破坏）的细胞中，HIPK2的降解才被永久性地抑制。结果HIPK2不断积累，触发凋亡，细胞自杀。
研究人员推测，这可能就是放疗和化疗有时失效的原因。这两种治疗方法都会严重损伤肿瘤细胞，最终导致它们的程序性死亡。Thomas Hofmann说：“如果有抵抗发生，经常是由于肿瘤细胞‘拒绝’执行自杀的命令。”
研究人员在实验中抑制了Siah-1酶，结果发现，即使在轻微损伤的细胞中，HIPK2也能够积聚，凋亡也被触发。Hofmann推测，“癌医学将可能利用这一发现。比如，我们可以将Siah-1抑制剂与放疗或化疗结合使用，从而将细胞拉回到凋亡机制中来。向左转|向右转
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疲惫模糊2018-01-14
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