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士诚小人也
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6xHis标签可用一些酶,譬如TAGZyme去除
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法师药材店
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PET-32a的Histag分别在前面的trx蛋白C端以及你的目标蛋白C端,如果你的目的蛋白在构建载体的时候自己加了终止子,那么你的目的蛋白C端是没有Histag的,也就是说唯一一个histag在trx与你的蛋白之间(PET32a是融合蛋白),这样,PET-32a提供的两个肽链内切酶(凝血酶和肠激酶)都是可以切掉的,当然,个人建议你用肠激酶,因为肠激酶酶切位点更贴近你的目的蛋白,而用凝血酶的话还有一个Stag。如果你在构建载体的时候,下游引物没有加终止子,那么你的蛋白的N端也会有一个HisTag,这时候你需要用TAGZyme了,这个酶专一性去除histag的。
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xiaoyuankm11
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用吹风机吹,然后轻轻的用之家扣掉~OK
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