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Sciencell/Recombinant Human IGF-BP3/105-01B3/1 Ea
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Sciencell/Recombinant Human IGF-BP3/105-01B3/1 Ea
品牌 / 
Sciencell
货号 / 
105-01B3
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IGF-BP3isa30kDacysteine-richsecretedprotein.ItisthemajorIGFbindingproteinpresentintheplasmaofhumanandanimalsanditisalsofoundinα-granulesofplatelets.InadditiontoitsABIlitytomodulatetheactivityofIGF-IandIGF-II,IGF-BP3exertsinhibitoryeffectsonfolliclestimulatinghormone(FSH)activity.DecreasedplasmalevelsofIGF-BP3oftenresultsindwarfism,whereaselevatedlevelsofIGF-BP3mayleadtoacromegaly.TheexpressionofIGF-BP3infibroblastsisstimulatedbymitogenicgrowthfactorssuchasBombesin,Vasopressin,PDGF,andEGF.

Specifications:

CatalogNo.105-01B3
CountryofManufactureUnitedStates
ProductCoderhIGF-BP3
Size/Quantity5μg
ProductUseThisproductisforresearchuseonly.Itisnotapprovedforuseinhumans,animals,orinvitrodiagnosticprocedures.
StorageStoreat-20°Cafterreceiving.UponReconstitution,storeat2-8°Cforuptooneweek.Formaximalstability,aliquotandstoreat-20°C.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.
ShippingInfoDryice
SynonymsGrowthhormonedependentbindingprotein,IBP3,BP-53
AASequenceGASSGGLGPVVRCEPCDARALAQCAPPPAVCAELVREPGCGCCLTCALSEGQPCGIYTERCGSGLRCQPSPDEARPLQALLDGRGLCVNASAVSRLRAYLLPAPPAPGNASESEEDRSAGEVESPSVSSTHRVSDPKFHPLHSKIIIIKKGHAKDSQRYKVDYESQSTDTQNFSSESKRETEYGPCRREMEDTLNHLKFLNVLSPRGVHIPNCDKKGFYKKKQCRPSKGRKRGFCWCVDKYGQPLPGYTTKGKEDVHCYSMQSK
SourceEscherichiacoli
MolecularWeightApproximately28.8kDaproteinconsistingof264aminoacidresidues.
Purity>98%bySDS-PAGEandHPLCanalyses.
BIOLOGicalActivityFullybiologicallyactive.TheED50is≤0.2μg/mlinpresenceof15ng/mlofhumanIGF-II,asdeterminedbyitsabilitytoinhibitIGF-IIinducedMCF-7proliferation
PhysicalAppearanceWhitelyophilizedpowder.
FormulationLyophilizedfroma0.2μmfilteredconcentratedsolutioninPBS,pH7.4.
Endotoxin
ReconstitutionReconstituteinsteriledistilledwatercontaining0.1%BSAtoaconcentrationof0.1-1.0mg/mL.
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一般认为,在几乎所有的后生动物(metazoans), 尤其是脊椎动物中,都普遍存在选择性剪接,这就为从单基因产生多种功能性多肤提供了一'条经济的途径。根据 EST(expressedsequencedtag,表达序列标签)序列定位和对合成的mRNA (resultant mRNA) 家族进行图谱分析的结果,估计约有 35% 的人类基因能产生多种不同的剪接产物。 查看更多>
EXTRACTION OF LIPIDS FROM LIPOPHORIN Since lipids are hydrophobic, they are better soluble in organic solvents than in water. Because the lipids are buried int 查看更多>
上海柯雷生物科技有限公司在发布的70kDa热休克蛋白14(HSPA14)重组蛋白供应信息,浏览与70kDa热休克蛋白14(HSPA14)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与70kDa热休克蛋白14(HSPA14)重组蛋白相关的内容。 查看更多>
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2012生物医药年会(疫苗&重组蛋白) 查看更多>
提供商:福因德科技(武汉)有限公司 查看更多>
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。目前,体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功... 查看更多>
上海信裕生物科技有限公司在发布的异连蛋白结合蛋白1(DTNBP1)重组蛋白 供应信息,浏览与异连蛋白结合蛋白1(DTNBP1)重组蛋白 相关的产品或在搜索更多与异连蛋白结合蛋白1(DTNBP1)重组蛋白 相关的内容。 查看更多>
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上海康朗生物科技有限公司在发布的内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)重组蛋白供应信息,浏览与内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)重组蛋白相关的内容。 查看更多>
Gel-elongation assay for type II fatty acid synthesisSrinivas Kodali Andrew Galgoci Sheo Singh Dr. Jun Wang Dr., jun_wang2@merck.com, Merck Research Laboratori 查看更多>
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知道的是ProspecPeproTech,还有其他品牌的吗,什么价格

用E.coli重组表达了一种蛋白,现在想要大量表达纯化,开始用过滤的方法,因为所需的蛋白和细胞碎片分子量差别很大,但是发现有很多的DNA污染,用什么方法能去掉DNA,而不影响需要的蛋白呢?用Dnase可以吗?
应该是活性吧,武昊公司买了,还可以免费得
包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程,依赖于蛋白质的折叠速率和聚集速率,并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统,高的诱导剂浓度,相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。除了外界因素,包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为,而不是蛋白的通常特性,如大小,融合标签,相对的疏水性。尽管如此,限制折叠速率的结构特性,如二硫键的形成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤(并不绝对,因为有些蛋白质二硫键的破坏并不影响其功能),富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构,当高水平表达时,由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境,蛋白质容易形成错配的二硫键,这常常是包涵体形成的主要原因。膜蛋白具有暴露的疏水区,表达时易于聚集形成包涵体,也有可能由于降解或对细胞的毒性作用使得表达水平极低。蛋白质的糖基化可以影响到蛋白质的折叠行为和溶解性,当它们在原核系统进行表达时,也容易聚集。
防止包涵体常用的方法:使用中等强度或弱的启动子,低温培养,有限的诱导,优化培养基条件,进行融合表达,与伴侣分子和折叠酶共表达,表达定位于不同的空间,选择突变的菌株或其他的原核表达系统。
增加蛋白质折叠的添加剂:添加剂可能的作用机制甘油对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度L-精氨酸两亲分子/渗压剂甘氨酰甜菜碱/山梨糖醇 对蛋白质具有优先的水合作用阿拉伯聚糖 增加黏度木糖醇 增加黏度乙醇 调节极性DMSO 调节极性
两性离子表面活性剂(Zwitterionic detergents)保护非极性表面Triton X-100保护非极性表面硫代甜菜碱类物质(NDSBs)保护非极性表面蔗糖/海藻糖对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度N-氧化三甲胺(TMAO)对蛋白质具有优先的水合作用/渗压剂三氟乙醇(TFE)促进二级结构的形成低浓度盐酸胍使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性低浓度尿素使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性配体稳定天然结构状态聚乙二醇保护熔球体(molten globule)/增加黏度需要强调的是在培养细菌时,在培养基中加入5%的乙醇可以起到一定的防止包涵体产生的作用。
对比另外一篇文章:
减少包涵体形成的策略降低重组菌的生长温度,降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法,较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用,从而可减少包涵体的形成。2. 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂,培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应,在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输,其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇(诱导热休克蛋白的表达)、低分子量的巯基或二硫化合物(影响细胞周质的还原态,从而影响二硫键的形成)和NaCl。3. 供给丰富的培养基,创造最佳培养条件,如供氧、pH等。
重组蛋白多肽的分离纯化问题不管是对生产还是研究工作都是关键性的问题,这里给大家一点总结性的文章,希望能够抛砖引玉,欢迎热烈的讨论:)

理论总结.rar(116.67k)
希望能把问题写的更为明确一些。
你可以试着读一下看看。
牙周膜干细胞的培养和鉴定 123
我来看看862018-03-01
基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。
基因敲除除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因,也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的一门新技术。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中,基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。
基因敲除的技术路线如下:
(1)构建重组基因载体﹔
(2)用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
(3)用选择培养基筛选已击中的细胞﹔
(4)将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物,对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
基因敲除的靶细胞目前最常用的是小鼠ES细胞。基因敲除的技术路线虽不复杂,但由于高等真核细胞内外源DNA与靶细胞DNA序列自然发生同源重组的机率非常低,约为百万分之一,要把基因敲除成功的细胞筛选出来是一件非常困难的工作。因此,同源重组的筛选和检测就成了基因敲除技术所要解决的关键问题。目前已有多种筛
美迪西在做重组蛋白表达方面很有经验,
无细胞蛋白表达系统又称为体外翻译系统,是模拟生物细胞的生命现象,重现胞内蛋白转录翻译过程。无细胞蛋白质合成体系以外源目的mRNA或DNA为蛋白质合成模板,通过人工控制补加蛋白质合成所需的底物和转录、翻译相关蛋白因子等物质,能实现目的蛋白质的体外蛋白合成。
1. 金开瑞的与传统的蛋白表达系统相比,省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率;
2. 反应体系小,能同时平行合成多种不同的蛋白质;
3. 反应周期短,能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求;
4. 开放的反应体系,便于改变各项反应条件,有利于调控基因的转录,蛋白质的合成和翻译后修饰,避免包涵体的形成;
5. 稳定的反应体系,可以偶联其它工艺,形成自动化、程序化、规模化生产,加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析;
6. 无细胞结构限制,可用于生产对宿主有毒害作用的外源蛋白,避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用;
7. 添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸,表达特殊蛋白。
8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。
使用大动物血液生产血清白蛋白大概有五方面优点:技术要求较低; 产量大(如果养殖规模大的话); 可以反复生产(抽完一次血过一个时期又可以抽); 目的蛋白组分及结构较明确(相对于重组细菌发酵生产白蛋白来说);生产方法固定(参见药典,或相关生产GMP).
事实上,现在多数药用级别白蛋白都是用血清生产的.
白蛋白的销售方向若是面向实验室,可采用重组质粒转到微生物发酵的方法生产,对土地面积的要求小,更集约,成本效率更高.
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