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Uscnk/Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)/5mg/EPG975Hu61
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Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)
INFA5; LeIF G; Interferon alpha-G; Interferon alpha-61
- Product No.EPG975Hu61
- Organism SpeciesHomo sapiens (Human) Same name, Different species.
- All
- Human
- Mouse
- Rat
- Cavia
- Rabbit
- Simian
- Caprine
- Ovine
- Equine
- Bovine
- Porcine
- Gallus
- Canine
- Others
- Multi-species
- Pan-species
- SourceEukaryotic expression
- Host293F cell
- Endotoxin Level<1.0EU per 1ug (determined by the LAL method)
- Subcellular LocationSecreted
- Predicted Molecular Mass21.2kDa
- Accurate Molecular Mass21kDa(Analysis of differences refer to the manual)
- Residues & TagsLeu22~Glu189 with N-terminal His Tag
- Buffer Formulation20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300.
- TraitsFreeze-dried powder
- Purity> 95%
- Isoelectric Point5.4
- ApplicationsPositive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.If bio-activity of the protein is needed, please check active protein.
- DownloadInstruction Manual
- UOM10µg50µg200µg1mg5mg
- FOBUS$ 288 For more details, please contact local distributors!US$ 720 For more details, please contact local distributors!US$ 1440 For more details, please contact local distributors!US$ 4320 For more details, please contact local distributors!US$ 10800 For more details, please contact local distributors!
Packages (Simulation)- Packages (Simulation)
- Gene sequencing
- SDS-PAGE
- ISO9001: 2008, ISO13485: 2003 Registered
SEQUENCE of the Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)
USAGE of the Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)
Reconstitute in PBS or others.
STORAGE of the Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)
Avoid repeated freeze/thaw cycles. Store at 2-8°C for one month. Aliquot and store at -80°C for 12 months.
STABILITY of the Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5)
The thermal stability is described by the loss rate. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37°C for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. The loss rate is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
GIVEAWAYS
Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) Experiment Service
INCREMENT SERVICES
BCA Protein Quantification KitProtein Labeling Customized ServiceMolecular Mass Marker for ProteinMonoclonal Antibody Customized ServicePolyclonal Antibody Customized ServiceProtein Activity Test Experiment ServiceImmunoprecipitation (IP) Experiment ServiceElectrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) Experiment ServiceBufferLentivirus Packaging Experiment ServiceAdenovirus Packaging Experiment ServiceReal Time PCR Experimental ServiceSpike RBD Protein (S-RBD)Protein GProtein A
Related products
| Catalog No. | Organism species: Homo sapiens (Human) | Applications (RESEARCH USE ONLY!) |
| RPG975Hu01 | Recombinant Interferon Alpha 5 (IFNa5) | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
| EPG975Hu61 | Eukaryotic Interferon Alpha 5 (IFNa5) | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
| APG975Hu01 | Active Interferon Alpha 5 (IFNa5) | Cell culture; Activity Assays. |
| RPG975Hu02 | Recombinant Interferon Alpha 5 (IFNa5) | Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
| PAG975Hu02 | Polyclonal Antibody to Interferon Alpha 5 (IFNa5) | WB; IHC; ICC; IP. |
| PAG975Hu06 | Polyclonal Antibody to Interferon Alpha 5 (IFNa5) | WB; IHC; ICC; IP. |
| PAG975Hu01 | Polyclonal Antibody to Interferon Alpha 5 (IFNa5) | WB; IHC; ICC; IP. |
| LAG975Hu71 | Biotin-Linked Polyclonal Antibody to Interferon Alpha 5 (IFNa5) | WB; IHC; ICC. |
| MAG975Hu22 | Monoclonal Antibody to Interferon Alpha 5 (IFNa5) | WB; IHC; ICC; IP. |
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2021-09-05
提供商：北京农业生物检测中心 查看更多
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BioLegend新产品—TNF家族新重组蛋白，&nbsp;<br><br><br><br><br><br>&nbsp;<br><br>&nbsp;<br><br>&nbsp; &nbsp; &nbsp;&nbsp;TNF家族新重组蛋白<br><br>& 查看更多
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2021-08-20
上海钰博生物科技有限公司在发布的轻肽铁蛋白(FTL)重组蛋白供应信息，浏览与轻肽铁蛋白(FTL)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与轻肽铁蛋白(FTL)重组蛋白相关的内容。 查看更多
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2021-09-20
上海沪震实业有限公司在发布的NPC2重组蛋白供应信息，浏览与NPC2重组蛋白相关的产品或在搜索更多与NPC2重组蛋白相关的内容。 查看更多
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2021-09-07
上海信裕生物科技有限公司在发布的AXL受体酪氨酸激酶(AXL)重组蛋白 供应信息，浏览与AXL受体酪氨酸激酶(AXL)重组蛋白 相关的产品或在搜索更多与AXL受体酪氨酸激酶(AXL)重组蛋白 相关的内容。 查看更多
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2017-01-29
默瑞（上海）生物科技有限公司在发布的五康 重组蛋白的纯化 WKS1-02-c供应信息，浏览与五康 重组蛋白的纯化 WKS1-02-c相关的产品或在搜索更多与五康 重组蛋白的纯化 WKS1-02-c相关的内容。 查看更多
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2021-09-16
上海钰博生物科技有限公司在发布的TGF-β1 重组蛋白供应信息，浏览与TGF-β1 重组蛋白相关的产品或在搜索更多与TGF-β1 重组蛋白相关的内容。 查看更多
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Gel-elongation assay for type II fatty acid synthesisSrinivas Kodali Andrew Galgoci Sheo Singh Dr. Jun Wang Dr., jun_wang2@merck.com, Merck Research Laboratori 查看更多
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2021-09-18
弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的重组蛋白大量发酵及制备生产服务供应信息，浏览与重组蛋白大量发酵及制备生产服务相关的产品或在搜索更多与重组蛋白大量发酵及制备生产服务相关的内容。 查看更多
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包涵体是外源基因在原核细胞中表达时，尤其在大肠杆菌中高效表达时，形成的由膜包裹的高密度、不溶性蛋白质颗粒，在显微镜下观察时为高折射区，与胞质中其他成分有明显区别。包涵体形成是比较复杂的，与胞质内蛋白质生成速率有关，新生成的多肽浓度较高，无充足的时间进行折叠，从而形成... 查看更多
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2016-11-21
重组蛋白A预装柱/填料（技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，4-12mg鼠血清IgG/ml填料，4-13是由广州洁特生物过滤股份有限公司代理或销售的JET BIOFIL品牌的试剂，产品来源于中国。广州洁特生物过滤股份有限公司是中国最权威的重组蛋白A预装柱/填料（技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，4-12mg鼠血清IgG/ml填料，4-13试剂销售服务商之一，在广州等地方 查看更多
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基因重组技术在疾病诊断和治疗中的应用123
2021-08-10
基因重组技术就是基因工程或叫转基因技术，主要在以下方面成果显著
植物：抗虫、抗病、抗除草剂植物培育、改良作物品质（富含赖氨酸的玉米）
动物：提高生长速度、生产药物蛋白、器官移植、乳腺生物反应器
微生物：疫苗
基因治疗等等
植物：抗虫、抗病、抗除草剂植物培育、改良作物品质（富含赖氨酸的玉米）
动物：提高生长速度、生产药物蛋白、器官移植、乳腺生物反应器
微生物：疫苗
基因治疗等等
维生素B7检测试剂盒|中药成分与营养素检测|产品应用|北京勤邦生物...123
agdhkll2021-08-24
维生素B7检测试剂盒环凯有吗
【求助】?重组蛋白产品中的CF代表什么意思 蛋白质和糖学技术...123
2021-08-08
CF(carry free)，无携带其他蛋白
蛋白质工程的原理是什么?123
2018-03-21
求详细标准的解答
抗生素的发酵生产123
zcqh272021-08-01
1、2015版药典，”生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程“中指出，”用于生物制品细胞制备过程中不得使用青霉素或β-内酰胺(β-Lactam)类抗生素。配制各种溶液的化学药品应符合《中国药典》（二部）或其他相关国家标准的要求。“
生物制品细胞制备过程中不得使用青霉素或β-内酰胺(β-Lactam)类抗生素，明确表明不准使用青霉素。那么进行的重组蛋白类表达的微生物发酵，可以用青霉素吗？
2、2015版药典三部，各论中指出，”将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜培养基(可含适量抗生素）中培养“，”发酵用培养基（采用适宜的不含抗生素的培养基）“。
这里说明种子培养基中可以使用抗生素，而且也没有限定究竟是哪种抗生素。
3、关于发酵中使用的抗生素，不知大家一般用哪家的，一些常用的，氨苄西林钠，硫酸卡那霉素，氯霉素等，都是用的什么级别，那个厂家的呢？我现在生工的，阿拉丁的，生兴生物的都用过。主要还是用的生工生物的，但是生工生物的抗生素都是进口分装的，不仅仅抗生素，国内很多进口分装的试剂，都无法提供相应的产品质量检测证书。而且因为是分装的，基本也就属于只有销售，所以，以后真的生产了，原材料来源的稳定性也无法保证。请问这个问题，大家是怎么解决的，一般用的哪家的呢。
生物制品细胞制备过程中不得使用青霉素或β-内酰胺(β-Lactam)类抗生素，明确表明不准使用青霉素。那么进行的重组蛋白类表达的微生物发酵，可以用青霉素吗？
2、2015版药典三部，各论中指出，”将检定合格的工作种子批菌种接种于适宜培养基(可含适量抗生素）中培养“，”发酵用培养基（采用适宜的不含抗生素的培养基）“。
这里说明种子培养基中可以使用抗生素，而且也没有限定究竟是哪种抗生素。
3、关于发酵中使用的抗生素，不知大家一般用哪家的，一些常用的，氨苄西林钠，硫酸卡那霉素，氯霉素等，都是用的什么级别，那个厂家的呢？我现在生工的，阿拉丁的，生兴生物的都用过。主要还是用的生工生物的，但是生工生物的抗生素都是进口分装的，不仅仅抗生素，国内很多进口分装的试剂，都无法提供相应的产品质量检测证书。而且因为是分装的，基本也就属于只有销售，所以，以后真的生产了，原材料来源的稳定性也无法保证。请问这个问题，大家是怎么解决的，一般用的哪家的呢。
无细胞蛋白表达系统又称为体外翻译系统，是模拟生物细胞的生命现象，重现胞内蛋白转录翻译过程。无细胞蛋白质合成体系以外源目的mRNA或DNA为蛋白质合成模板，通过人工控制补加蛋白质合成所需的底物和转录、翻译相关蛋白因子等物质，能实现目的蛋白质的体外蛋白合成。
1. 金开瑞的与传统的蛋白表达系统相比，省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率；
2. 反应体系小，能同时平行合成多种不同的蛋白质；
3. 反应周期短，能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求；
4. 开放的反应体系，便于改变各项反应条件，有利于调控基因的转录，蛋白质的合成和翻译后修饰，避免包涵体的形成；
5. 稳定的反应体系，可以偶联其它工艺，形成自动化、程序化、规模化生产，加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析；
6. 无细胞结构限制，可用于生产对宿主有毒害作用的外源蛋白，避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用；
7. 添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸，表达特殊蛋白。
8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。
1. 金开瑞的与传统的蛋白表达系统相比，省略了耗时耗力的质粒转化、细胞培养、收集、破碎和离心等, 极大地提高了工作效率；
2. 反应体系小，能同时平行合成多种不同的蛋白质；
3. 反应周期短，能满足高通量配体筛选和蛋白质组学的科研要求；
4. 开放的反应体系，便于改变各项反应条件，有利于调控基因的转录，蛋白质的合成和翻译后修饰，避免包涵体的形成；
5. 稳定的反应体系，可以偶联其它工艺，形成自动化、程序化、规模化生产，加快重组蛋白的纯化、功能表征和后续的结构解析；
6. 无细胞结构限制，可用于生产对宿主有毒害作用的外源蛋白，避免蛋白表达对宿主细胞的致死作用；
7. 添加非天然氨基酸或同位素标记氨基酸，表达特殊蛋白。
8.对于多次跨膜或由于疏水性强导致的普通细胞系表达困难的项目有显著改善。
生物学凝胶作用和用途123
温存迷醉丶覫2018-03-23
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。
1.测定——分子量、PI
当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH。
2.选择——层析方法
若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：
一 使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份。
二 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
三 体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。
3.纯化——大量粗品
处理大量原液时，为避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大颗粒离子交换介质。扩张柱床吸附技术利用多种STREAMLINE介质，直接从含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高回收率，缩短纯化周期。
4.纯化——硫酸氨样品
硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品，经处理过的样本处于高盐状态下，很适合直接上疏水层析。若作离子交换，需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新技术，随着介质种类不断增多，渐被融入各生产工艺中。利用Hitrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析。
5.纯化——糖类分子
固化外源凝订素如刀豆球蛋白、花生、大麦等凝集素，可结合碳水化合物的糖类残基，很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚至亚细胞细胞器，纯化糖蛋白等。两种附上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介质，专为俘获整个细胞或大复合物，如膜囊等。
6.纯化——膜蛋白
膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者，避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质，藉此除去去污剂。非离子性去污剂可以疏水层析除去。
7.纯化——单抗、抗原
单抗多为IgG.来源主要是腹水和融合瘤培养上清液。在培养前除去IgG.重组蛋白A介质Mabselect和rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的载量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose HP或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。
疏水层析Phenyl Sepharose HP亦很适合纯化IgG.宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。
纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG，再进一步获取IgG抗原。
HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM，结合量达5mg IgM.HiTrap IgY是专门用来纯化IgY，结合量达100mg纯IgY.
8.纯化——重组蛋白
重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物，扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分离。Amersham biosciences提供三个快速表达、一步纯化的融合系统。
一 GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽S转移酶一起表达，然后利用Glutathione Sepharose 4B作亲和层析纯化，再利用凝血酶或因子Xa切开。
2. 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A的IgG结合部位融合在一起表达，以IgG Sepharose 6 FF纯化。
二 含组氨酸标记（Histidine-tagged）的融合蛋白可用Chelating Sepharose FF螯合Ni2+金属，在一般或变性条件（8M尿素）下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。
9.纯化——包涵体蛋白
包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质很适合纯化复性前的粗品，并可以1MnaOH重生。此方法纯化后的包涵体蛋白，复性回收率明显提高。
10.包涵体蛋白固相复性
许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定（吸附）在层析介质上，一般用各种Sepharose FF离子交换层析介质。而且无需大量稀释样品，并将复性和初纯化合二为一，大大节省时间及提高回收率。
固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白；以HiTrap Heparin肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用，比一般试剂盒更方便、耐用。
11.纯化——中草药有效成分
中药的化学成分极其复杂。例：如用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。
生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。
一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex，Sephacryl.若分子量在600KD以下，并需更高分辨率，可选择新一代的Superdex.一般植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多糖。SOURCE5、15、30RPC反相层析也很适合各种中药有效成分的检测、分离和放大制备。由于中药的成分非常复杂，SOURCE反相层析可用范围为PH1-14 ，并可用1M NaOH，1M HCL清洗、再生。比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗，寿命也更长。
12.纯化——肽类
肽类的来源有天然萃取，合成肽和重组肽三种。肽容易被酶降解，但可从有机溶剂或促溶剂中复性，所以多以高选择性的反相层析如SOURCE 30RPC、SOURCE 15RPC、SOURCE 5RPC或离子交换Minibeads、Monobeads作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱，能配合反相层析做出更精美的肽图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤Superdex 30 PG。医学都市多功能
13.纯化——核酸、病毒
核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Sephacry S-1000 SF、Superose或Sepharoce 4FF凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换如Mono Q、 SOURCE Q分离核酸。
14.纯化——寡核苷酸寡酸苷酸
多应用在反义（anti-sense）DNA、RNA测序、PCR和cDNA合成等研究。合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的Mono Q或快速低反压的SOURCE Q在PH12下可除副产物，并避免凝集和保护基的脱落。载量大大高过反相层析，可用做大量制备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱ProRPC去除。
15.脱盐、小分子去除
使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%.只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，HiPrep Desalting（26ml）可在数分钟为多至10ml样品脱盐。
16.疫苗纯化
使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%.柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。
17.抗生素聚合物分析
中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比，规定使用Sephadex G10凝胶过滤法测定。
18.纯化-基因治疗用病毒载体
SORRCE 15Q
19.纯化-基因治疗用质粒
Q Sepharose XL，SOURCE 15Q，STREAMLINE Q，Sephacryl S500，Plasmidselect 在下游纯化中，可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时，去除各种污染物。 1.去除——内毒素
内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白，是带负电的复合大分子。
内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集，无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒（17-1349-01）可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。
内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。
利用CNBr或NHS Sepharose FF可偶联内毒素底物如LAL，PMB，自动成亲合层析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚体，凝胶过滤层析可有效地将之去除。
2.去除——蛋白中的核酸
大量核酸增加样本黏度，令区带扩张，反压增加，降低分辨率和流速。药审和食检对核酸含量也有严格限制。
胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如STREAMLINESP，SP Sepharose Big Beads，SP或CM Sepharose FF，SP SepharoseXL结合目标蛋白，可除去大量核酸。
核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。
利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。
3.去除——病毒和微生物
病毒和微生物可成为病原，应尽量减除。结合不同层析技术，使用注射用水，用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗，皆可避免污染物增加。
病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋白电荷相反的S/D（solvent/detergent）处理，使病毒失活，如Triton和Tween.再用适当的离子交换介质如CM Sepharose FF结合目标蛋白，去除S/D.
其它污染物可以改变pH和离子强度使其从目标分子中解离或失活，凝胶过滤介质Superdex及多种吸附性介质，SOURCE都是很好的精细纯化介质，可去除多种微量污染物。 凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶胶，在适当的条件下，整个体系会转变成一种弹性的半固体状态的稠厚物质，失去流动性。这种现象称为胶凝作用,所形成的产物叫做凝胶或冻胶.
“气凝胶”是指分散系为气态的，如：云，雾等，“固凝胶”有烟水晶等，“液凝胶”就是呈液态的胶体，如氢氧化铁胶体 。向左转|向右转
1.测定——分子量、PI
当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH。
2.选择——层析方法
若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：
一 使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份。
二 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
三 体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。
3.纯化——大量粗品
处理大量原液时，为避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大颗粒离子交换介质。扩张柱床吸附技术利用多种STREAMLINE介质，直接从含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高回收率，缩短纯化周期。
4.纯化——硫酸氨样品
硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品，经处理过的样本处于高盐状态下，很适合直接上疏水层析。若作离子交换，需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新技术，随着介质种类不断增多，渐被融入各生产工艺中。利用Hitrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析。
5.纯化——糖类分子
固化外源凝订素如刀豆球蛋白、花生、大麦等凝集素，可结合碳水化合物的糖类残基，很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚至亚细胞细胞器，纯化糖蛋白等。两种附上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介质，专为俘获整个细胞或大复合物，如膜囊等。
6.纯化——膜蛋白
膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者，避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质，藉此除去去污剂。非离子性去污剂可以疏水层析除去。
7.纯化——单抗、抗原
单抗多为IgG.来源主要是腹水和融合瘤培养上清液。在培养前除去IgG.重组蛋白A介质Mabselect和rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的载量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose HP或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。
疏水层析Phenyl Sepharose HP亦很适合纯化IgG.宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。
纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG，再进一步获取IgG抗原。
HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM，结合量达5mg IgM.HiTrap IgY是专门用来纯化IgY，结合量达100mg纯IgY.
8.纯化——重组蛋白
重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物，扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分离。Amersham biosciences提供三个快速表达、一步纯化的融合系统。
一 GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽S转移酶一起表达，然后利用Glutathione Sepharose 4B作亲和层析纯化，再利用凝血酶或因子Xa切开。
2. 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A的IgG结合部位融合在一起表达，以IgG Sepharose 6 FF纯化。
二 含组氨酸标记（Histidine-tagged）的融合蛋白可用Chelating Sepharose FF螯合Ni2+金属，在一般或变性条件（8M尿素）下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。
9.纯化——包涵体蛋白
包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质很适合纯化复性前的粗品，并可以1MnaOH重生。此方法纯化后的包涵体蛋白，复性回收率明显提高。
10.包涵体蛋白固相复性
许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定（吸附）在层析介质上，一般用各种Sepharose FF离子交换层析介质。而且无需大量稀释样品，并将复性和初纯化合二为一，大大节省时间及提高回收率。
固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白；以HiTrap Heparin肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用，比一般试剂盒更方便、耐用。
11.纯化——中草药有效成分
中药的化学成分极其复杂。例：如用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。
生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。
一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex，Sephacryl.若分子量在600KD以下，并需更高分辨率，可选择新一代的Superdex.一般植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多糖。SOURCE5、15、30RPC反相层析也很适合各种中药有效成分的检测、分离和放大制备。由于中药的成分非常复杂，SOURCE反相层析可用范围为PH1-14 ，并可用1M NaOH，1M HCL清洗、再生。比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗，寿命也更长。
12.纯化——肽类
肽类的来源有天然萃取，合成肽和重组肽三种。肽容易被酶降解，但可从有机溶剂或促溶剂中复性，所以多以高选择性的反相层析如SOURCE 30RPC、SOURCE 15RPC、SOURCE 5RPC或离子交换Minibeads、Monobeads作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱，能配合反相层析做出更精美的肽图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤Superdex 30 PG。医学都市多功能
13.纯化——核酸、病毒
核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Sephacry S-1000 SF、Superose或Sepharoce 4FF凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换如Mono Q、 SOURCE Q分离核酸。
14.纯化——寡核苷酸寡酸苷酸
多应用在反义（anti-sense）DNA、RNA测序、PCR和cDNA合成等研究。合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的Mono Q或快速低反压的SOURCE Q在PH12下可除副产物，并避免凝集和保护基的脱落。载量大大高过反相层析，可用做大量制备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱ProRPC去除。
15.脱盐、小分子去除
使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%.只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，HiPrep Desalting（26ml）可在数分钟为多至10ml样品脱盐。
16.疫苗纯化
使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%.柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。
17.抗生素聚合物分析
中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比，规定使用Sephadex G10凝胶过滤法测定。
18.纯化-基因治疗用病毒载体
SORRCE 15Q
19.纯化-基因治疗用质粒
Q Sepharose XL，SOURCE 15Q，STREAMLINE Q，Sephacryl S500，Plasmidselect 在下游纯化中，可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时，去除各种污染物。 1.去除——内毒素
内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白，是带负电的复合大分子。
内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集，无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒（17-1349-01）可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。
内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。
利用CNBr或NHS Sepharose FF可偶联内毒素底物如LAL，PMB，自动成亲合层析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚体，凝胶过滤层析可有效地将之去除。
2.去除——蛋白中的核酸
大量核酸增加样本黏度，令区带扩张，反压增加，降低分辨率和流速。药审和食检对核酸含量也有严格限制。
胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如STREAMLINESP，SP Sepharose Big Beads，SP或CM Sepharose FF，SP SepharoseXL结合目标蛋白，可除去大量核酸。
核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。
利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。
3.去除——病毒和微生物
病毒和微生物可成为病原，应尽量减除。结合不同层析技术，使用注射用水，用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗，皆可避免污染物增加。
病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋白电荷相反的S/D（solvent/detergent）处理，使病毒失活，如Triton和Tween.再用适当的离子交换介质如CM Sepharose FF结合目标蛋白，去除S/D.
其它污染物可以改变pH和离子强度使其从目标分子中解离或失活，凝胶过滤介质Superdex及多种吸附性介质，SOURCE都是很好的精细纯化介质，可去除多种微量污染物。 凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶胶，在适当的条件下，整个体系会转变成一种弹性的半固体状态的稠厚物质，失去流动性。这种现象称为胶凝作用,所形成的产物叫做凝胶或冻胶.
“气凝胶”是指分散系为气态的，如：云，雾等，“固凝胶”有烟水晶等，“液凝胶”就是呈液态的胶体，如氢氧化铁胶体 。向左转|向右转
HPLC测定蛋白质含量方法验证123
hmj_nju2017-11-13
江苏省南通市、泰州市20192020学年高三第一次调研测试生物试题(...123
凹凸曼慢1522021-07-24
重组蛋白的话，一般在蛋白冻干或最终制得之前，都会进行纯化，一般的生物公司可以纯化纯度到达90%，就是不会有其他的杂蛋白存在。做抗体或者抗原等都不会对免疫有影响的，如有你的里面其他杂蛋白多的话，建议先做蛋白纯化（亲和纯化，分子筛都可，一般的亲和纯化，带有his标签或者GST标签都可到达最少85%以上的纯度）
提供亲和纯化相关资料：http://wenku.baidu.com/view/ef8f3831f8c75fbfc67db276
如有帮助，请采纳，谢谢~
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如有帮助，请采纳，谢谢~
浅论抗重组蛋白rVVC多克隆抗体的制备及其保护作用的鉴定123
浮云3945452021-08-13
可以跑SDS-PAGE电泳，不插梳子，每次一块板子点样200ul，跑完了切胶，攒几次之后，用灭菌的研钵研磨，边磨边加PBS，注意不要加多了，一定要研磨得很细，研磨之后用1ml的注射器过一边，不堵塞说明就可以打兔子了。每次打兔子的胶不超过1.5ml，首次蛋白的量要高一些，400-500ug，以后两次减半，一般三次就可以了。我们实验室有人做过。
或者可以过柱纯化，过柱纯化要加一半的佐剂，所以纯化后浓度要高于500ug/ml为宜，否则要增加免疫的次数。
或者可以过柱纯化，过柱纯化要加一半的佐剂，所以纯化后浓度要高于500ug/ml为宜，否则要增加免疫的次数。
请教一下 灭活和重组蛋白疫苗有啥区别 123
tpytl2021-08-19
疫苗与重组蛋白有何本质区别和工艺区别
精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液(优泌林70/30)详细说明书注意事项不...123
2021-08-23
当然可以。精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液是30%短效的和70%中效的混合制剂诺和灵30、50、优泌林30、甘舒霖30等都就是这种药。在应用的过程中，胰岛素的注射模式是多样化的。可以一针一药（格列美脲+长效胰岛素）、一针三药（诺和龙+长效胰岛素）、每天2针（精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液是30%短效的和70%中效的混合制剂 ）、每天三针（诺和锐30强化治疗时）、每天四针【短效（速效）胰岛素+中效（长效）胰岛素】、胰岛素持续皮下注射（胰岛素泵）。这些治疗模式可以根据病情进行调换。希望对你有帮助并请您采纳。
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