Catalogue number
PRO-770
Introduction
Trypsin (EC3.4.21.4) is part of the serine protease family. Trypsin cleaves lysine and arginine at the C-terminal side of the peptide. The hydrolysis rate is slower if an acidic residue is on either sides of the cleavage site and no cleavage occurs if a proline residue is on the carboxyl side of the cleavage site. Trypsin optimum pH is pH-7 to 9. Trypsin will also hydrolyze ester and amide linkages of synthetic derivatives of amino acids such as: benzoyl L-arginine ethyl ester (BAEE), p-toluenesulfonyl- L-arginine methyl ester (TAME), tosyl-L-arginine methyl ester, N-α-benzoyl-L-arginine p-nitroanilide (BAPNA), L-lysyl-p-nitroanilide, and benzoyl-L-tyrosine ethyl ester (BTEE). Serine protease inhibitors that inhibit recombinant trypsin include TLCK (N-p-tosyl-L-lysine chloromethyl ketone), PMSF (phenylmethanesulfonyl fluoride), benzamidine, soybean trypsin inhibitor, and ovomucoid.
Description
Recombinant Human Trypsin-2 expressed in E.Coli having an Mw of 24kDa is purified by standard chromatography techniques.
Source
Escherichia Coli.
Physical Appearance
Sterile Filtered lyophilized powder.
Formulation
The protein was lyophilized without any additives.
Solubility
It is recommended to reconstitute the lyophilized Human Trypsin in sterile 1mM HCl or 50mM HAC not less than 100µg/ml, which can then be further diluted to other aqueous solutions.
Stability
Recombinant Human Trypsin although stable at room temp for 1 week, should be stored desiccated below -18°C. For long term storage it is recommended to add a carrier protein (0.1% HSA or BSA). Please prevent freeze-thaw cycles.
Purity
Greater than 90% as determined by SDS-PAGE.
Unit Definition
One USP unit of trypsin activity will produce a Delta A253 of 0.003 per minute in a reaction volume of 3.0ml at pH7.6 and 25°C, with BAEE as a substrate (1cm light path).
Biological Activity
Applications
Trypsin digestion: the suggested ratio is 1:50 to 1:1000 (w/w).
Safety Data Sheet
Usage
ProSpec's products are furnished for LABORATORY RESEARCH USE ONLY. The product may not be used as drugs, agricultural or pesticidal products, food additives or household chemicals.
ProSpec是一家全球著名细胞因子蛋白及相关抗体生产和研发品牌。ProSpec的生产和研发工厂位于以色列，专注于蛋白（重组及合成）生产研发，其独有的细菌和哺乳动物表达和蛋白折叠技术使其能在17年内成长为国际一流的科研级蛋白供应商。目前ProSpec可以提供细胞因子，生长因子，激素，信号蛋白，病毒抗原等近800种重组蛋白和100多种抗体，是世界上提供蛋白品种最多的公司之一，领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白，价格优于同类公司。绝大部分产品是天然成熟型蛋白，而不含有标签蛋白。考虑到大部分研究者希望能更灵活地配制蛋白溶液，ProSpec-Tany绝大部分产品没有添加保护剂或盐，这就对工艺提出了更高的要求。同时，ProSpec-Tany绝大部分产品为冻干粉，因此易于运输和保存。
ProSpec-TanyTechnoGeneLtd.公司创立人Dr.Tanchum(Tany)Amarant主要致力于蛋白生物化学方面的研究工作，1947年出生于以色列。1991-1997创建ReProGen公司，从事细胞因子和趋化因子的大量生产及纯化；1997-2000创建ProSpec-TechnoGene，主要生产用于生命科学研究的各种重组蛋白及相关抗体。拥有专利UnitedStatesPatent5434135。
ProSpec的生产和研发工厂位于以色列雷霍沃特（Rehovot），专注于蛋白（重组及合成）生产研发。目前ProSpec可以提供细胞因子，生长因子，激素，信号蛋白，病毒抗原等近800种重组蛋白和100多种抗体，是世界上提供蛋白品种最多的公司之一，领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白，价格优于同类公司。
欢迎各位ProSpec客户及合作伙伴拨打全国免费电话400-6800-868转801/802/803垂询蚂蚁淘科技问询相关产品及解决方案！
代理ProSpec细胞因子、生长因子、激素、病毒抗原等重组蛋白产品简介
为便于客户选购ProSpec公司的各种重组蛋白，特将选购及使用注意事项列举如下：
1、需要考虑细胞因子、生长因子的种属来源和表达细胞选择
ProSpec可以提供多种不同种属来源的细胞因子等重组蛋白，如白介素-3，可以提供人白介素-3、小鼠白介素-3、大鼠白介素-3；而瘦蛋白Leptin则有人源、小鼠源、大鼠源、绵羊源、猪源、河豚源、马源、鸡源、狗源、兔源等十多种不同Leptin。蚂蚁淘科技推荐，建议按照作用的细胞选择相同种属的细胞因子。不过不同种属之间，蛋白同源性（序列一致性）在80%以上的基本上就可确定为有交叉活性，可推荐使用。另外，蚂蚁淘还可以向您提供ProSpec不同种属细胞表达的细胞因子，以重组人血管内皮生长因子(rVEGF)为例，ProSpec可以提供大肠杆菌表达的、酵母Yeast表达的、中国仓鼠卵巢CHO细胞、人胚肾HEK细胞表达的VEGF。可以根据您的实验需求，垂询蚂蚁淘科技有限公司为您推荐不同细胞表达的细胞因子产品。
2、ProSpec细胞因子的溶解和保存建议
ProSpec绝大部分细胞因子产品是天然成熟型蛋白，而不含有载体蛋白（CarrierProtein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等）。同时，ProSpec-Tany绝大部分产品通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此易于运输和保存。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底（此时能否见到白色沉淀均属正常现象）。为获得更好生物活性和保存稳定性，请联系蚂蚁淘科技垂询相关的溶解以保存建议。
领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白，价格优于同类公司，而小包装形式的细胞因子也受广大研究生客户喜爱。作为ProSpec的中国总代理，蚂蚁淘科技有限公司为客户精选真核细胞表达、高活性的几十多种常用现货ProSpec细胞因子。更多细胞因子产品请查询蚂蚁淘网站或垂询蚂蚁淘科技有限公司。
ProSpec是一家全球著名细胞因子蛋白及相关抗体生产和研发品牌。ProSpec的生产和研发工厂位于以色列，专注于蛋白（重组及合成）生产研发，其独有的细菌和哺乳动物表达和蛋白折叠技术使其能在17年内成长为国际一流的科研级蛋白供应商。目前ProSpec可以提供细胞因子，生长因子，激素，信号蛋白，病毒抗原等近800种重组蛋白和100多种抗体，是世界上提供蛋白品种最多的公司之一，领先的生产工艺和规模使其可以提供毫克到克级蛋白，价格优于同类公司。绝大部分产品是天然成熟型蛋白，而不含有标签蛋白。考虑到大部分研究者希望能更灵活地配制蛋白溶液，ProSpec-Tany绝大部分产品没有添加保护剂或盐，这就对工艺提出了更高的要求。同时，ProSpec-Tany绝大部分产品为冻干粉，因此易于运输和保存。
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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Western Blotting依然是目前分离和检测蛋白最常用到的一种技术方法，但是要将这种技术变成你的有利手段，并不容易。因此优化实验操作手册至关重要，但是，正如Bio-Rad成像系统市场经理Ryan Short所说的，“大多数研究人员并不是Western blot技术专家——他们要解答的是更大的问题”，Ryan继续说道，“问题是大多数人都不知道何处需要优化。坦率地说，Western blot检测过程耗时太长
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黄病毒科病毒(Flaviviridae) 是一类通过吸血的节肢动物（蚊、蜱、白蛉等）传播的病毒，可以引起一些对人类危害极大的病毒性传染性疾病，主要包括登革热病毒，流行性乙型脑炎病毒，西尼罗河病毒和森林脑炎病毒等。苏州杰恩生物技术有限公司针对国内流行病毒的情况，和国际上常用的检测黄病毒科病毒的最新方法，提供西尼罗病毒、登革热病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒的共40多种NS1单克隆抗体，可用于WB、ELISA,、IP,、IF实验，同时提供NS1...
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Abnova是做什么的 Abnova 的使命是成为高通量抗体和蛋白生产的领导者。透过建立完整的蛋白质与抗体库，集合人体重要的蛋白质与对应抗体，Abnova 要成为世界上目录内容最丰富的蛋白质和抗体公司。 选择Abnova的理由 Abnova 提供客户独特而完整的单克隆抗体和蛋白质的经验，不同于传统客制生产公司和实验室。 工业化规模的基础设施: Abnova保持一个有效的单克隆流线生产设施，每个月的生产能力最大可以到 500 次动物...
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Biolegend高品质重组蛋白，Biolegend高品质重组蛋白
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一般认为，在几乎所有的后生动物（metazoans), 尤其是脊椎动物中，都普遍存在选择性剪接，这就为从单基因产生多种功能性多肤提供了一'条经济的途径。根据 EST(expressedsequencedtag，表达序列标签）序列定位和对合成的mRNA (resultant mRNA) 家族进行图谱分析的结果，估计约有 35% 的人类基因能产生多种不同的剪接产物。
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商品咨询
我想在体外培养的细胞中，加入PD-L1重组蛋白，激活PD-L1:PD-1通路，但我没能查到相关的文献，不清楚PD-L1重组蛋白的用量。请问各位有相关的经验吗？或者阅读过相关的文献？
基因重组技术就是基因工程或叫转基因技术，主要在以下方面成果显著
植物：抗虫、抗病、抗除草剂植物培育、改良作物品质（富含赖氨酸的玉米）
动物：提高生长速度、生产药物蛋白、器官移植、乳腺生物反应器
微生物：疫苗
基因治疗等等
蛋白质重组，先要全部水解为氨基酸，蛋白质的种类多就是因为它的数量大，结构复杂，空间结构千变万化。而基本的氨基酸只有20中，所以它重组以后就可能变成完全不同的东西，控制和以前完全无关的代谢过程。
基因重组只是控制同一性状表达不同而已，但是它不会改变性状的基本情况。如：控制眼睛颜色的基因，亲本的基因重组之后可能亲本为黑色，子代便为蓝色。但绝对不会控制眼睛颜色的基因在重组之后就变成控制耳朵的基因。
各位业内前辈，我们正在考虑引进符合GMP认证标准的CHO细胞系，用于表达可做疫苗生产的重组蛋白类。目前已有符合标准信息的是Thermofisher的CHO-S悬浮培养细胞资料，希望能再多了解一些和这株细胞类似的其他公司符合GMP标准的生产株细胞做个比较。谢谢指教！
His-Tag作为一种标签，对以后蛋白的分离纯化及检测鉴定都有好处。不含His-Tag的蛋白只能使用，如要检测，则需要购买专门的抗体。
HEK293细胞表达系统，瞬时转染的话 3天左右可以初步检测表达效果，可以14天内优化表达效果。关于这个系统，有任何疑问可以咨询我 4008909989
包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程，依赖于蛋白质的折叠速率和聚集速率，并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统，高的诱导剂浓度，相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。除了外界因素，包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为，而不是蛋白的通常特性，如大小，融合标签，相对的疏水性。尽管如此，限制折叠速率的结构特性，如二硫键的形成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤（并不绝对，因为有些蛋白质二硫键的破坏并不影响其功能），富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构，当高水平表达时，由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境，蛋白质容易形成错配的二硫键，这常常是包涵体形成的主要原因。膜蛋白具有暴露的疏水区，表达时易于聚集形成包涵体，也有可能由于降解或对细胞的毒性作用使得表达水平极低。蛋白质的糖基化可以影响到蛋白质的折叠行为和溶解性，当它们在原核系统进行表达时，也容易聚集。
防止包涵体常用的方法：使用中等强度或弱的启动子，低温培养，有限的诱导，优化培养基条件，进行融合表达，与伴侣分子和折叠酶共表达，表达定位于不同的空间，选择突变的菌株或其他的原核表达系统。
增加蛋白质折叠的添加剂：添加剂可能的作用机制甘油对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度L-精氨酸两亲分子/渗压剂甘氨酰甜菜碱/山梨糖醇 对蛋白质具有优先的水合作用阿拉伯聚糖 增加黏度木糖醇 增加黏度乙醇 调节极性DMSO 调节极性
两性离子表面活性剂（Zwitterionic detergents）保护非极性表面Triton X-100保护非极性表面硫代甜菜碱类物质（NDSBs）保护非极性表面蔗糖/海藻糖对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度N-氧化三甲胺（TMAO）对蛋白质具有优先的水合作用/渗压剂三氟乙醇（TFE）促进二级结构的形成低浓度盐酸胍使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性低浓度尿素使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性配体稳定天然结构状态聚乙二醇保护熔球体（molten globule）/增加黏度需要强调的是在培养细菌时，在培养基中加入5％的乙醇可以起到一定的防止包涵体产生的作用。
对比另外一篇文章：
减少包涵体形成的策略降低重组菌的生长温度，降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法，较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用，从而可减少包涵体的形成。2. 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂，培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应，在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输，其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇（诱导热休克蛋白的表达）、低分子量的巯基或二硫化合物（影响细胞周质的还原态，从而影响二硫键的形成）和NaCl。3. 供给丰富的培养基，创造最佳培养条件，如供氧、pH等。
怎么好多只有题
而没答案
帮帮我
给我提供答案
考研细胞的题答案
重组蛋白和多肽的分离纯化问题不管是对生产还是研究工作都是关键性的问题，这里给大家一点总结性的文章，希望能够抛砖引玉，欢迎热烈的讨论:)理论总结.rar(116.67k)
美迪西生物医药在重组蛋白表达与纯化服务方面有10余年经验积累，拥有多种蛋白表达系统。
