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ZYMO RESEARCH/Zymoprep-96 Yeast Plasmid Miniprep/8 x 96 Preps/D2007
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Highlights
- Simple: Quickly and easily rescue plasmid from yeast.
- Efficient Isolation: Works well with low-copy and hard-to-isolate plasmids.
- High-Quality: Isolated plasmid DNA is ideal for molecular biology techniques, such as PCR, transformation, hybridization, etc.
Description
| Applicable For | Plasmid DNA is well suited for downstream applications such as PCR, transformation, hybridization and other sensitive applications |
|---|---|
| Elution Volume | ≥ 10 µl per well |
| Equipment | Centrifuge with microplate carriers |
| Processing Volume | ≤ 1.5 ml of Culture |
| Sample Source | Cell Culture (Colonies/Patches or Liquid Culture) |
| Size Range | Up to 25 kb. |
| Yield | Typically between 0.01-0.3 ng for most 2 µ based plasmids from 1.5 ml overnight cultures |
Q1: What is the difference between Zymoprep Yeast Plasmid Miniprep I and Miniprep II?
Both the Zymoprep Yeast Plasmid Miniprep I and II utilize the same chemistry for lysis; however, Miniprep I uses isopropanol precipitation and Miniprep II utilizes a column for purification. The Miniprep II allows for consistent yield and purity; and samples can be concentrated to a low elution volume.
Q2: What is the typical plasmid yield?
Typically, between 0.01 - 0.3 ng for most 2 µ based plasmid from 1.5 ml overnight cultures.In order to generate more plasmid, the plasmid is typically transformed into E. Coli, cultured, and isolated using a traditional E. Coli plasmid prep.
Q3: Can this kit be used to isolate linear plasmid DNA?
Yes
Q4: If I’m using stationary phase yeast cells, what can I do to improve sample lysis?
We generally recommend working with fresh or early log phase cells, which are easier to lyse. For stationary phase cells, user optimization is necessary, and we recommend increasing digestion to > 1 hour and/ or increasing the amount of Zymolyase.
Q5: What yeast strains are these kits compatible with?
Any strains susceptible to Zymolyase, which includes the following fungal genera: Asbya KloekeraCandidaKluyveromycesDebaryomycesLipomycesEremotheciumMetschikowiaEndomycesPichiaHansenulaPullulariaHanseniasporaSaccharomycesSaccaromycodesSaccharomycopsisSchizosaccahromycesTorulopsis
| Cat # | Name | Size | Price | |
|---|---|---|---|---|
| D2004-1-45 | Solution 1 Digestion Buffer | 45 ml | $88.00 | |
| D2004-1-90 | Solution 1 Digestion Buffer | 90 ml | $146.00 | |
| D2004-2-45 | Solution 2 Lysis Buffer | 45 ml | $88.00 | |
| D2004-2-90 | Solution 2 Lysis Buffer | 90 ml | $146.00 | |
| D2004-3-180 | Solution 3 Neutralizing Buffer | 180 ml | $146.00 | |
| D2004-3-90 | Solution 3 Neutralizing Buffer | 90 ml | $88.00 | |
| D4003-2-24 | DNA Wash Buffer (Concentrate) | 24 ml | $33.00 | |
| D4003-2-48 | DNA Wash Buffer (Concentrate) | 48 ml | $60.00 | |
| C1001-50 | Collection Tubes | 50 Pack | $15.00 | |
| C2002 | Collection Plate | 2 Plates | $22.00 | |
| C2003 | Elution Plate | 2 Plates | $19.00 | |
| C2004 | Zymo-Spin I-96 Plate | 2 Plates | $142.00 | |
| P1001-2 | 96-Well Block | 2 Blocks | $18.00 | |
| C2007-8 | 96-Well Plate Cover Foil | 8 Foils | $18.00 | |
| C2011-2 | Air Permeable Sealing Cover | 2 Pack | $12.00 | |
| C2011-4 | Air Permeable Sealing Cover | 4 Pack | $24.00 | |
| C2011-8 | Air Permeable Sealing Cover | 8 Pack | $42.00 |
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-09-06
浙江圣氏生物科技有限公司在发布的葛根提取物 现货供应葛根素10%供应信息，浏览与葛根提取物 现货供应葛根素10%相关的产品或在搜索更多与葛根提取物 现货供应葛根素10%相关的内容。 查看更多
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2017-09-13
北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)在发布的小鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)供应信息，浏览与小鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)相关的产品或在搜索更多与小鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (变性)相关的内容。 查看更多
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2018-04-25
桂林创盈生物技术有限公司在发布的罗汉果提取物罗汉果总苷罗汉果甜苷V20%25%30%50%80%供应信息，浏览与罗汉果提取物罗汉果总苷罗汉果甜苷V20%25%30%50%80%相关的产品或在搜索更多与罗汉果提取物罗汉果总苷罗汉果甜苷V20%25%30%50%80%相关的内容。 查看更多
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2018-04-24
上海研生实业有限公司所提供的红细胞裂解液质量可靠、规格齐全,上海研生实业有限公司不仅具有精湛的技术水平,更有良好的售后服务和优质的解决方案,欢迎您来电咨询此产品具体参数及价格等详细信息！ 查看更多
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2018-04-18
南京道斯夫生物科技有限公司在发布的菠菜提取物供应信息，浏览与菠菜提取物相关的产品或在搜索更多与菠菜提取物相关的内容。 查看更多
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2018-02-10
人脑膜细胞裂解液是由上海中乔新舟生物科技有限公司代理或销售的sciencell品牌的试剂，产品来源于美国。上海中乔新舟生物科技有限公司是中国最权威的人脑膜细胞裂解液试剂销售服务商之一，在上海等地方销售人脑膜细胞裂解液试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业人脑膜细胞裂解液仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的人脑膜细胞裂解液产品 查看更多
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长沙祯祥生物科技有限公司在发布的川贝母提取物供应信息，浏览与川贝母提取物相关的产品或在搜索更多与川贝母提取物相关的内容。 查看更多
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2018-06-19
济南嘉格生物科技有限公司在发布的天然扇贝提取物供应信息，浏览与天然扇贝提取物相关的产品或在搜索更多与天然扇贝提取物相关的内容。 查看更多
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2021-07-31
西安昌岳生物科技有限公司在发布的绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料供应信息，浏览与绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料相关的产品或在搜索更多与绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料相关的内容。 查看更多
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2018-05-08
桂林创盈生物技术有限公司在发布的番泻叶提取物番泻甙番泻甙A8%9%10%,A+B20%供应信息，浏览与番泻叶提取物番泻甙番泻甙A8%9%10%,A+B20%相关的产品或在搜索更多与番泻叶提取物番泻甙番泻甙A8%9%10%,A+B20%相关的内容。 查看更多
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2018-01-12
长沙祯祥生物科技有限公司在发布的川贝母提取物供应信息，浏览与川贝母提取物相关的产品或在搜索更多与川贝母提取物相关的内容。 查看更多
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2021-08-12
长沙祯祥生物科技有限公司在发布的艾叶提取物供应信息，浏览与艾叶提取物相关的产品或在搜索更多与艾叶提取物相关的内容。 查看更多
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【求助】细胞裂解液能否用于组织提取总蛋白 蛋白质和糖学...123
廖小明83jE2017-10-03
不是用的试剂盒吗？
请教请问碧云天的细胞裂解液提膜蛋白谁用过– 960问答123
仔爱鬼840122017-10-03
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂.这两种方法（包括SDS 和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法.机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性.机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
【求助】线粒体蛋白提取蛋白中遇到的困惑 细胞技术讨论版...123
ccy_sna2021-08-01
我想问一下我提出大鼠脑线粒体后提线粒体蛋白的方法：用常规细胞裂解液【7mmol/L尿素（urea）、2mmol/L硫脲(thiourea)、4％CHAPS、10mmol/L硫苏糖醇（DTT）、pharmalyte（载体两性电介质就是IPG的buffer）pH3-10(1:50稀释)】60－100ul，吹打并振荡使蛋白尽量溶解。12000g离心10min。收集上清即为蛋白质提取物。
这样可不可以？
另还有几个问题：1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
这样可不可以？
另还有几个问题：1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
【求助】急, !!!请教下细胞裂解的方法 蛋白质和糖学技术讨论版...123
小时候的梦想家2021-07-26
各位大虾，我想请教下，本人试验作香烟烟雾提取物（CSE）对细胞色素C氧化酶（COX）活性的影响，采用ECV304，拟将细胞破碎后用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，用GENMED细胞/组织悬液细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒测定COX活性，但是我不知该选用和种方法裂解细胞，请各位多多指导，小妹万分感谢，
不知单纯使用冰浴中超声裂解够了吗？还是说要选用裂解液呢？最主要的就是我不知道该怎么赔这个裂解液，使其COX活性不产生影响
不知单纯使用冰浴中超声裂解够了吗？还是说要选用裂解液呢？最主要的就是我不知道该怎么赔这个裂解液，使其COX活性不产生影响
最近在做Nrf2信号通路,跑western结果很不好,科研小白求助。 ...123
猴孜炎162021-07-25
蛋白提取时使用蛋白裂解液将细胞裂解，然后离心分为上清液和下层沉淀，如果你说的是这个上清液的话，那么这个上清液是细胞中的可溶性蛋白，一般包括细胞质的蛋白和细胞核的可溶性蛋白，下层沉淀主要是细胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色质之类的。
求助白细胞的提取方法 细胞生物学123
峥嵘岁月71cd2021-07-21
如果要培养，用淋巴细胞分离液。如果只是用于检测，用红细胞裂解液
基因组DNA提取中细胞裂解液怎么配制_问答详情_细胞裂解和提取物_...123
血刺裁决04K2021-07-27
用SDS裂解，RNA酶降解，在过柱，后洗脱
RNA提取的流毒非浅的经典误区（RNA提取的实践指南） RNA提取 ...123
2017-10-03
有多大，会不会引起基因突变，甚是惶恐，求解答
有哪位知道哪种细胞裂解液比较好,需要保持细胞内蛋白活性123
你大爷NeSs2017-10-03
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂.这两种方法（包括SDS 和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法.机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性.机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
细胞总蛋白提取方法123
coollanlan2021-08-04
最近将长满的100毫升的细胞培养瓶的细胞进行总蛋白的提取，每次只加了100微升的三去污溶液，最后测的溶度还是比较低，5微升里最多只有十几微克的总蛋白。不知道大家的经验是什么？如何提高细胞总蛋白的浓度？
(推荐)细胞组织裂解(提蛋白)方法123
小小V冣6932017-10-03
蛋白在细胞内，需要把细胞裂解才能提出
RNA提取时的一些常见问题分析 实验方法123
niupiye32004-11-07
请教各位高手一下，我收集细胞后，因为不能马上做实验，就把细胞加了Trizol保存在－８０度，我想请教一下，是先在室温放５分钟后再冻存还是直接放置于－８０度，用时再取出，放置室温５分钟（说明书上说加了Ｔrizol后一定要置于室温５分钟）．很菜的问题，请各位不要见笑．谢谢！
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