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ZYMO RESEARCH/Zymoprep-96 Yeast Plasmid Miniprep/8 x 96 Preps/D2007
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ZYMO RESEARCH/Zymoprep-96 Yeast Plasmid Miniprep/8 x 96 Preps/D2007
品牌 / 
ZYMO RESEARCH
货号 / 
D2007
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Simple solution for yeast plasmid DNA isolation using Zymolyase
Highlights

  • Simple: Quickly and easily rescue plasmid from yeast.
  • Efficient Isolation: Works well with low-copy and hard-to-isolate plasmids.
  • High-Quality: Isolated plasmid DNA is ideal for molecular biology techniques, such as PCR, transformation, hybridization, etc.
Description

The Zymoprep-96 Yeast Plasmid Miniprep kit provides all the necessary reagents for high-throughput plasmid isolation from S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe and any fungi whose cell walls are susceptible to yeast lytic enzyme lysis. The Zymoprep-96 is a simple and efficient yeast plasmid miniprep kit that is based on the classic E. coli alkaline lysis method with our Zymolyase added in the first solution. There is no need for glass beads or phenol. The Zymoprep-96 incorporates our Zymoprep II kit into a 96-well format resulting in a high-throughput method that recovers about 5 fold more plasmid DNA compared to Zymoprep I and eliminates the isopropanol precipitation step. Reliably recover plasmid DNA from yeast colonies, patches on plates, or as liquid cultures. The system is ideal for low-copy number and hard-to-isolate plasmids. Eluted plasmid DNA can be used directly for E. Coli transformation, PCR, and Southern blot analysis.


Applicable ForPlasmid DNA is well suited for downstream applications such as PCR, transformation, hybridization and other sensitive applications
Elution Volume≥ 10 µl per well
EquipmentCentrifuge with microplate carriers
Processing Volume≤ 1.5 ml of Culture
Sample SourceCell Culture (Colonies/Patches or Liquid Culture)
Size RangeUp to 25 kb.
YieldTypically between 0.01-0.3 ng for most 2 µ based plasmids from 1.5 ml overnight cultures

Q1: What is the difference between Zymoprep Yeast Plasmid Miniprep I and Miniprep II?

Both the Zymoprep Yeast Plasmid Miniprep I and II utilize the same chemistry for lysis; however, Miniprep I uses isopropanol precipitation and Miniprep II utilizes a column for purification. The Miniprep II allows for consistent yield and purity; and samples can be concentrated to a low elution volume.

Q2: What is the typical plasmid yield?

Typically, between 0.01 - 0.3 ng for most 2 µ based plasmid from 1.5 ml overnight cultures.In order to generate more plasmid, the plasmid is typically transformed into E. Coli, cultured, and isolated using a traditional E. Coli plasmid prep.

Q3: Can this kit be used to isolate linear plasmid DNA?

Yes

Q4: If I’m using stationary phase yeast cells, what can I do to improve sample lysis?

We generally recommend working with fresh or early log phase cells, which are easier to lyse. For stationary phase cells, user optimization is necessary, and we recommend increasing digestion to > 1 hour and/ or increasing the amount of Zymolyase.

Q5: What yeast strains are these kits compatible with?

Any strains susceptible to Zymolyase, which includes the following fungal genera: Asbya KloekeraCandidaKluyveromycesDebaryomycesLipomycesEremotheciumMetschikowiaEndomycesPichiaHansenulaPullulariaHanseniasporaSaccharomycesSaccaromycodesSaccharomycopsisSchizosaccahromycesTorulopsis



Cat #NameSizePrice
D2004-1-45Solution 1 Digestion Buffer45 ml$88.00
D2004-1-90Solution 1 Digestion Buffer90 ml$146.00
D2004-2-45Solution 2 Lysis Buffer45 ml$88.00
D2004-2-90Solution 2 Lysis Buffer90 ml$146.00
D2004-3-180Solution 3 Neutralizing Buffer180 ml$146.00
D2004-3-90Solution 3 Neutralizing Buffer90 ml$88.00
D4003-2-24DNA Wash Buffer (Concentrate)24 ml$33.00
D4003-2-48DNA Wash Buffer (Concentrate)48 ml$60.00
C1001-50Collection Tubes50 Pack$15.00
C2002Collection Plate2 Plates$22.00
C2003Elution Plate2 Plates$19.00
C2004Zymo-Spin I-96 Plate2 Plates$142.00
P1001-296-Well Block2 Blocks$18.00
C2007-896-Well Plate Cover Foil8 Foils$18.00
C2011-2Air Permeable Sealing Cover2 Pack$12.00
C2011-4Air Permeable Sealing Cover4 Pack$24.00
C2011-8Air Permeable Sealing Cover8 Pack$42.00
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10ml 三去污裂解液配方如下:50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g 150 mmol/L NaCl: 0.08775g0.2 g/L叠氮钠: 0.002g 1 g/LSDS 0.01g100 mg/L Aprotin 0.001g10 g/L NP-40 0.1g 5 g/L去氧 查看更多>
单细胞凝胶电泳分析 (singlecellgelelectrophoresis,SCGE) 是 Ostling 等 (1984) 首创的, 以后经 Singh 等 (1988) 进一步完善而逐渐发展起来的一种快速检测单细胞 DNA 损伤的实验技术。 SCGE 是目前细胞水平显示与评价 DNA 毒性与损害的一个非常敏感的检测技术,其特点是在一块经过琼脂糖包被(coating)玻璃片上,将实验细胞与低熔点琼脂糖混匀后,再“涂布”在其上面,此后再经细胞裂解,DN 查看更多>
货号:EH0024 查看更多>
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蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外 查看更多>
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Home-made Taq Polymerase PurificationI also have the bacteria containing the clone. It appears to produce lots of Taq and is quite stable.The proceedure takes 查看更多>
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可以用温和的红细胞裂解液,和外周血一样,裂解液不会对单个核细胞有影响,HY StemCell是一家为干细胞研究服务的知名公司,有各种生化试剂供客户选择,可以查询各大品牌红细胞裂解液,供参考
磷酸酶活性测定123
greenfish19742021-08-02
我是新手,请问如何检测的活性。请各位大侠指导,谢了
我的邮箱:maoyuanqing@citiz.net
蛋白提取时使用蛋白裂解液将细胞裂解,然后离心分为上清液和下层沉淀,如果你说的是这个上清液的话,那么这个上清液是细胞中的可溶性蛋白,一般包括细胞质的蛋白和细胞核的可溶性蛋白,下层沉淀主要是细胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色质之类的。
提取DNA时裂解液的配制方法应该是怎样的
用SDS裂解,RNA酶降解,
在过柱,后洗脱
用SDS裂解,RNA酶降解,在过柱,后洗脱
有多大,会不会引起基因突变,甚是惶恐,求解答
各位大侠:俺在提取细胞总蛋白时,蛋白质提取出像果冻一样的东西,俺的步骤如下:
1细胞用冷PBS洗两遍,离心,去除上清;
2加50~100ul三去污细胞裂解液;
3加PMSF,AP各1ul;
4用100ulTIp头吹打数次;
5置冰上15分钟
612000rpm,15min,4度
7取上清。这时,上清呈黏液状,用枪头吸时会将细胞碎片一起吸出。拉丝度很长,测蛋白浓度显示有,各位,这是怎么回事?做WB会影响结果吗?这种蛋白质在保存过程中会容易降解吗?
有的资料上显示第四步,不是用Tip头吹打,而是将EP管在桌上猛敲击几下,这个方法我也试过,但是结果蛋白浓度很低,没有出现上述现象,这是怎么回事呀?
细胞总蛋白提取方法123
coollanlan2021-08-04
最近将长满的100毫升的细胞培养瓶的细胞进行总蛋白的提取,每次只加了100微升的三去污溶液,最后测的溶度还是比较低,5微升里最多只有十几微克的总蛋白。不知道大家的经验是什么?如何提高细胞总蛋白的浓度?
从细胞中提取RNA的方法123
陌语哲俀2021-07-22
操作步骤:
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。

注意事项:
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]是存在于真核细胞中催化聚ADP核糖化的细胞核酶,其参与的聚ADP核糖化是真核细胞中蛋白质翻译后的重要修饰方式之一。PARP-1在DNA修复和细胞凋亡中发挥至关重要的作用。在凋亡过程中,PARP-1由116kDa被切割成85kDa,催化NAD-依赖的多聚(ADP-核糖)(PAR)往各自质膜以及核蛋白上的聚合。总而言之,PARP在DNA损伤修复与细胞凋亡中发挥着重要作用。
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通量PARP/凋亡分析试剂盒可广泛应用于1)检测原代、肿瘤等细胞的PARP活性;2)检测凋亡前后的PARP活性;3)利用细胞裂解液筛选PARP抑制剂。
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我想问一下我提出大鼠脑线粒体后提线粒体蛋白的方法:用常规细胞裂解液【7mmol/L尿素(urea)、2mmol/L硫脲(thiourea)、4%CHAPS、10mmol/L硫苏糖醇(DTT)、pharmalyte(载体两性电介质就是IPG的buffer)pH3-10(1:50稀释)】60-100ul,吹打并振荡使蛋白尽量溶解。12000g离心10min。收集上清即为蛋白质提取物。

这样可不可以?

另还有几个问题:1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别