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| Formulation | 50%glycerol/water(v/v) |
| Storage | -20°C |
| Purity | >95%bySDS-PAGE |
| ActivityDetermination | Clottingassay |
| ShelfLife(properlystored) | 12months |
Thedomainstructureofprothrombinisrepresented,where:GLA=regioncontainingγ-carboxyglutamicacidresidues,KRINGLE=regionsofinternalsequencehomology,CATALYTICDOMAIN=regioncontainingtheserineproteasecatalytictriad.ArrowsindicatethesiteswhichareproteolyticallycleavedbyfactorXaduringactivationofthezymogen.
SampleGelInformation:
| Gel | Novex4-12%Bis-Tris |
|---|---|
| Load | 1µgperlane;purifiedhumanprothrombin |
| Buffer | MOPS |
| Standard | SeeBluePlus2;Myosin(191kDa),PhosphorylaseB(97kDa),BSA(64kDa),GlutamicDehydrogenase(51kDa),AlcoholDehydrogenase(39kDa),CarbonicAnhydrase(28kDa),MyoglobinRed(19kDa),Lysozyme(14kDa) |
Overview:
ProthrombinisavitaminK-dependentplasmaproteinwhichissynthesizedintheliver(1).Priortosecretionintoplasma,prothrombinundergoespost-translationalmodificationbyavitaminK-dependentcarboxylasewhichconvertstenspecificglutamicacidresiduestoγ-carboxyglutamicacid(gla).Thetenglaresiduesarelocatedwithinthefirst40aminoacidsofthematureproteinandcontributetotheABIlityofprothrombintobindtonegativelychargedphospholipidmembranes.Prothrombincontainstworegionsofinternalhomologywhicharereferredtoas"kringle"structures.Theseregionsofconspicuoussecondarystructurearelocatedbetweenresidues40and270ofthematureplasmaproteinandreplacethegrowthfactordomainsfoundinseveralotherplasmaserineproteases.Thusfar,nofunctionhasbeenascribedtotheseregions,butthereissUSPicionthattheymayplayaroleinoneofseveralbinaryproteininteractionsinvolvingprothrombin.Thematuresinglechainproteincirculatesinplasmaasazymogenand,duringcoagulation,isproteolyticallyactivatedtothepotentserineproteaseα-thrombin.Thisproteolysisiscatalyzedbytheprothrombinaseenzymecomplex.Duringactivation,prothrombiniscleavedatArg271-Thr272(human)/Arg273-Thr274(bovine)andatArg320-Ser321(human)/Arg323-Ser324(bovine)toa"pro"fragment(fragment1.2)andthrombin,thelatterofwhichiscomposedoftwochainscovalentlylinkedbyadisulfidebond.Inthecaseofhumanprothrombin/thrombin,thereisanadditionalthrombinfeed-backcleavageatArg284-Thr285resultinginanadditional13aminoacidsbeingremovedfromthematurethrombin“A”chain.
HumanprothrombinispreparedfromfreshfrozenhumanplasmaasdescribedbyBajajandcoworkers(2).BovineprothrombinispreparedfromfreshbovineplasmausingamodificationoftheproceduredescribedbyOwenandcoworkers(3).Purifiedprothrombinissuppliedin50%(vol/vol)glycerol/H2Oandshouldbestoredat-20oC.PurityisdeterminedbySDS-PAGEanalysis,andactivityismeasuredbyclottingand/orchromogenicsubstrateassay,followingconversionofprothrombintothrombin.
Properties:
| Localization | Plasma | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Plasmaconcentration | 100µg/ml(1) | |||||||
| Molecularweight | 72,000(1,4,5). Fragments: ProthrombinFragment1-21,700 ProthrombinFragment2-12,866 ProthrombinFragment1.2-34,566 PrethrombinFragement1-49,900 PrethrombinFragment2-37,580 | |||||||
| Extinctioncoefficient |
| |||||||
| Isoelectricpoint | 4.7-4.9(human)(6) 4.4-4.9(bovine)(6) | |||||||
| Structure | singlechain,NH2-terminalgladomain,twokringleregions | |||||||
| Percentcarbohydrate | 8.2%(human)(4) 10.0%(bovine)(5) | |||||||
| Post-translationalmodifications | tenglaresidues(4,5) |
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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北京义翘神州科技有限公司(Sino Biological Inc.)在发布的人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)供应信息，浏览与人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)相关的产品或在搜索更多与人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
浙江圣氏生物科技有限公司在发布的葛根提取物 现货供应葛根素10%供应信息，浏览与葛根提取物 现货供应葛根素10%相关的产品或在搜索更多与葛根提取物 现货供应葛根素10%相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率 查看更多
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2021-07-19
北京君诺德生物技术有限公司在发布的10*红细胞裂解液供应信息，浏览与10*红细胞裂解液相关的产品或在搜索更多与10*红细胞裂解液相关的内容。 查看更多
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Home-made Taq Polymerase PurificationI also have the bacteria containing the clone. It appears to produce lots of Taq and is quite stable.The proceedure takes 查看更多
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大黄提取物是由西安四叶草生物科技有限公司代理或销售的SYC品牌的试剂，产品来源于西安。西安四叶草生物科技有限公司是中国最权威的大黄提取物试剂销售服务商之一，在西安等地方销售大黄提取物试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业大黄提取物仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的大黄提取物产品 查看更多
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2018-12-26
一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)1 mM PMSF (蛋白酶抑制 查看更多
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2018-02-02
西安青芷生物技术有限公司在发布的白术提取物 厂家现货 青芷生物供应信息，浏览与白术提取物 厂家现货 青芷生物相关的产品或在搜索更多与白术提取物 厂家现货 青芷生物相关的内容。 查看更多
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2021-08-05
北京维通达生物技术有限公司在发布的组织\细胞裂解试剂盒供应信息，浏览与组织\细胞裂解试剂盒相关的产品或在搜索更多与组织\细胞裂解试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-07-31
西安昌岳生物科技有限公司在发布的绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料供应信息，浏览与绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料相关的产品或在搜索更多与绿原酸50%绿咖啡豆提取物 抗氧化 保健品原料相关的内容。 查看更多
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2021-07-28
苍术提取物是由西安草根生物工程有限公司代理或销售的草根品牌的试剂，产品来源于西安。西安草根生物工程有限公司是中国最权威的苍术提取物试剂销售服务商之一，在西安等地方销售苍术提取物试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业苍术提取物仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的苍术提取物产品 查看更多
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Preparation of Dialysis tubing1) Boil the tubing on a sitr plate (preferably in the hood) in a 4L volume of 2% (w/v) sodium bicarbonate and 1mM EDTA pH 8.02) R 查看更多
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【求助】DNA 提取的一个问题 核酸基因技术讨论版论坛123
liu7412162021-07-20
DNA提取加细胞裂解液的量是固定的吗?有的书上说加50μl,有的加500μl,不知为什么,请指教!谢谢!
求助白细胞的提取方法 细胞生物学123
峥嵘岁月71cd2021-07-21
如果要培养，用淋巴细胞分离液。如果只是用于检测，用红细胞裂解液
磷酸酶活性测定123
greenfish19742021-08-02
我是新手，请问如何检测的活性。请各位大侠指导，谢了
我的邮箱：maoyuanqing@citiz.net
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求助!蛋白质提取物像果冻样的东东!!!正常吗?_问答详情_细胞裂解和...123
liuhl2021-08-05
各位大侠:俺在提取细胞总蛋白时，蛋白质提取出像果冻一样的东西，俺的步骤如下:
1细胞用冷PBS洗两遍，离心，去除上清；
2加50～100ul三去污细胞裂解液；
3加PMSF，AP各1ul;
4用100ulTIp头吹打数次；
5置冰上15分钟
612000rpm,15min,4度
7取上清。这时，上清呈黏液状，用枪头吸时会将细胞碎片一起吸出。拉丝度很长，测蛋白浓度显示有，各位，这是怎么回事？做WB会影响结果吗？这种蛋白质在保存过程中会容易降解吗?
有的资料上显示第四步，不是用Tip头吹打，而是将EP管在桌上猛敲击几下，这个方法我也试过，但是结果蛋白浓度很低，没有出现上述现象，这是怎么回事呀?
1细胞用冷PBS洗两遍，离心，去除上清；
2加50～100ul三去污细胞裂解液；
3加PMSF，AP各1ul;
4用100ulTIp头吹打数次；
5置冰上15分钟
612000rpm,15min,4度
7取上清。这时，上清呈黏液状，用枪头吸时会将细胞碎片一起吸出。拉丝度很长，测蛋白浓度显示有，各位，这是怎么回事？做WB会影响结果吗？这种蛋白质在保存过程中会容易降解吗?
有的资料上显示第四步，不是用Tip头吹打，而是将EP管在桌上猛敲击几下，这个方法我也试过，但是结果蛋白浓度很低，没有出现上述现象，这是怎么回事呀?
有哪位知道哪种细胞裂解液比较好,需要保持细胞内蛋白活性 实验...123
1伤蔡112017-10-03
ripa裂解液对核蛋白的提取好点。加到细胞培养皿里面，摇15分钟，然后刮下来吸出来，是做western的话加Loading buffer 再95°煮10分钟。
裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。
裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞，可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。
【求助】提取单个核细胞要加红细胞裂解液吗 细胞技术讨论版...123
度妈真伟大922017-10-03
可以用温和的红细胞裂解液，和外周血一样，裂解液不会对单个核细胞有影响，HY StemCell是一家为干细胞研究服务的知名公司，有各种生化试剂供客户选择，可以查询各大品牌红细胞裂解液，供参考
请教请问碧云天的细胞裂解液提膜蛋白谁用过– 960问答123
仔爱鬼840122017-10-03
裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂.这两种方法（包括SDS 和溶菌酶处理等）提取纯化DNA中常用的方法.机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性.机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
一、机械裂解法主要有以下两中：
1．热休克（Thermal shock）,既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成（freezing and thawing）,.原理：由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2．超声波处理（Ultrasonication）既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法（在提核酸时联合使用）
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种：（1）利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞；（2）溶解蛋白；（3）蛋白变性使其稳定；（4）抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸；如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用：
50 mM Tris-HCl pH 7.4（缓冲体系）,150 mM NaCl（等渗体系）,1 mM PMSF （强大的蛋白酶抑制剂）,1 mM EDTA（变性剂和稳定剂）,5 μg/ml Aprotinin（蛋白酶抑制剂）,5 μg/ml Leupeptin（蛋白酶抑制剂）,1% Triton x-100（破坏细胞）,1% Sodium deoxycholate（中度变性剂和蛋白溶解剂）,0.1% SDS（强变性剂和蛋白溶解剂）.7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解）,蛋白酶K等.
基因组DNA提取中细胞裂解液怎么配制_问答详情_细胞裂解和提取物_...123
血刺裁决04K2021-07-27
用SDS裂解，RNA酶降解，在过柱，后洗脱
【求助】线粒体蛋白提取蛋白中遇到的困惑 细胞技术讨论版...123
ccy_sna2021-08-01
我想问一下我提出大鼠脑线粒体后提线粒体蛋白的方法：用常规细胞裂解液【7mmol/L尿素（urea）、2mmol/L硫脲(thiourea)、4％CHAPS、10mmol/L硫苏糖醇（DTT）、pharmalyte（载体两性电介质就是IPG的buffer）pH3-10(1:50稀释)】60－100ul，吹打并振荡使蛋白尽量溶解。12000g离心10min。收集上清即为蛋白质提取物。
这样可不可以？
另还有几个问题：1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
这样可不可以？
另还有几个问题：1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
【求助】细胞裂解液能否用于组织提取总蛋白 蛋白质和糖学...123
廖小明83jE2017-10-03
不是用的试剂盒吗？
细菌总DNA提取中,细胞裂解液怎么配制啊？ 123
操TA1b02017-10-03
细胞裂解液的主要目的：1.利用去污剂破坏脂质双分子层，破裂细胞；2. 溶解蛋白；3. 蛋白变性使其稳定；4. 抑制蛋白酶活性 推荐RIPA buffer:
. 50 mM Tris-HCl pH 7.4 缓冲体系 · 150 mM NaCl 等渗体系
· 1 mM PMSF 强大的蛋白酶抑制剂 · 1 mM EDTA 变性剂和稳定剂
· 5 µg/ml Aprotinin 蛋白酶抑制剂 · 5 µg/ml Leupeptin 蛋白酶抑制剂 · 1% Triton x-100 破坏细胞
·1% Sodium deoxycholate 中度变性剂和蛋白溶解剂 ·0.1% SDS 强变性剂和蛋白溶解剂
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
http://wenku.baidu.com/link?url=wSb7SK6U6DwRWnh4oq2PWLhYpcVp1BZQA42ybzcNGDB0xXR1HJCmuREp-ikc--tOmNYvKu-vRHAHjFz_D0eB3IZ_uEYz1AAU9X4BkluWIZW
. 50 mM Tris-HCl pH 7.4 缓冲体系 · 150 mM NaCl 等渗体系
· 1 mM PMSF 强大的蛋白酶抑制剂 · 1 mM EDTA 变性剂和稳定剂
· 5 µg/ml Aprotinin 蛋白酶抑制剂 · 5 µg/ml Leupeptin 蛋白酶抑制剂 · 1% Triton x-100 破坏细胞
·1% Sodium deoxycholate 中度变性剂和蛋白溶解剂 ·0.1% SDS 强变性剂和蛋白溶解剂
组织裂解液和细胞裂解液如何配制
http://wenku.baidu.com/link?url=wSb7SK6U6DwRWnh4oq2PWLhYpcVp1BZQA42ybzcNGDB0xXR1HJCmuREp-ikc--tOmNYvKu-vRHAHjFz_D0eB3IZ_uEYz1AAU9X4BkluWIZW
细胞裂解后对细胞表面蛋白有什么影响蚂蚁淘_问答详情_细胞裂解和...123
晗小颜茨爬252021-07-31
细胞癌变后，细胞膜表面的糖蛋白会减少。甲胎蛋白是一种，糖蛋白。这种长蛋白主要来自于胎儿的干细胞，常人体内极少，而且甲胎蛋白一般是用来检测肝癌的。 当肝细胞发生癌变时，恢复了产生这种蛋白质的功能，而且随着病情恶化它在血清中的含量会急剧增加，甲胎蛋白就成了诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标，所以要如果说细胞癌变后，产生甲胎蛋白并不是非常的严谨。因为它只是作为肝癌的一个指标罢了。而抗原的表示范围比较大。所以这里是使用的抗原而不是甲胎蛋白。
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