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Cell Technology/JC1/100/JC100
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Cell Technology/JC1/100/JC100
品牌 / 
Cell Technology
货号 / 
JC100
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Key Benefits

  • Cell permeability allow direct measurement of apoptosis and mitochondrial potential in live cells.
  • Applications – Cells can be analyzed by Flow Cytometry, Fluorescent plate reader or Fluorescent microscopy.
  • Incubate for 15 minutes, wash and measure.
  • Add this reagent directly to live cells in your media of choice.

Additional information

Kit Size

100

Detection of the mitochondrial permeability transition event provides an early indication of the initiation of cellular apoptosis. This process is typically defined as a collapse in the electrochemical gradient across the mitochondrial membrane, as measured by the change in the membrane potential (YD). Loss of mitochondrial (YD) is indicative of apoptosis and can be detected by a unique fluorescent cationic dye, 5,5′,6,6′-tetrachloro-1,1′,3,3′-tetraethyl- benzamidazolocarbocyanin iodide, commonly known as JC-1. This dye has been incorporated into the user-friendly kit for the simple and reproducible detection of the membrane potential (YD) event in apoptotic cells. The kit has been formatted for use on Flow cytometers, Fluorescent plate readers and Fluorescent Microscopes

mitocondril_membran_a_b_1Fig (A). Jurkat cells were cultured with DMSO for 2 hours. Cells were then stained with JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit for 15 minutes and analyzed by flow cytometry.

mitocondril_membran_a_b_2_1Fig (B). urkat cells were cultured with staurosporine for 2 hours. Cell were then stained with JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit for 15 minutes and analyzed by flow cytometry.

Document Title
JC1Protocol
JC1 Datasheet
msds.JC100
TitleFileLinkAuthor(s)JournalYear; Edition:Pages
http://www.jem.org/cgi/content/full/199/4/547http://www.jem.org/cgi/content/full/199/4/547
Defects in Cell Growth Regulation by C 18:0-Ceramide and Longevity Assurance Gene 1 (LAG1) in Human Head and Neck Squamous Cell Carcinomas (HNSCC)Serap Koybasi, Can E. Senkal, Kamala Sundararaj, et alJBC Papers in PressPublished on August 17, 2004 as Manuscript M406920200
Effects of a series of organosulfur compounds on mitotic arrest and induction of apoptosis in colon cancer cellshttp://mct.aacrjournals.org/cgi/content/full/4/9/1388Danhua Xiao, John T. Pinto, Gregg G. Gundersen & Bernard WeinsteinMol Cancer Ther2005;4:1388-1398
Adrenergic receptor-stimulated apoptosis in adult cardiac myocytes involves MMP-2-mediated disruption of β1 integrin signaling and mitochondrial pathwayhttp://ajpcell.physiology.org/cgi/content/abstract/290/1/C254Bindu Menon,Mahipal Singh, Robert Ross, Jennifer N. Johnson and Krishna SinghAm J Physiol Cell Physiol290: C254-C261, 2006. First published September 7, 2005
SGLT-1-mediated glucose uptake protects intestinal epithelial cells against LPS-induced apoptosis and barrier defects: a novel cellular rescue mechanism?http://www.fasebj.org/cgi/content/abstract/19/13/1822Linda C. H. Yu Andrew N. Flynn, Jerrold R. Turner and Andre G. BuretThe FASEB Journal2005;19:1822-1835
Ceramide induces mitochondrial abnormalities in insulin-secreting INS-1 cells: Potential mechanisms underlying ceramide-mediated metabolic dysfunction of the β cellhttp://www.springerlink.com/content/t3g0p313518r2747/R. Veluthakal, R. Palanivel Y. Zhao, P. McDonald, S. Gruber and A. KowluruApoptosis JournalVol 10/No 4, Aug 2005
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Resveratrol-caused apoptosis of human prostate carcinoma LNCaP cells is mediated via modulation of phosphatidylinositol 3"-kinase/Akt pathway and Bcl-2 family proteinshttp://mct.aacrjournals.org/cgi/content/abstract/5/5/1335Moammir H. Aziz,Minakshi Nihal, Vivian X. Fu, David F.Jarrard and N AhmadMol Cancer Ther2006;5:1335-1341
Reference
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Part#ReagentTemperature
Part# 4001Lyophilized JC-1 DyeStore at 2-8C
Part# 300210X Assay BufferStore at 2-8C

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2018-07-16
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PCR-RFLP法1)提取细胞总DNA方法同前。2)PCR扩增引物的设计1.引物长度一般为15~30bp,G+C含量应在45%~55%之间。2.应避免连续出现4个以上的单一碱基。3.不能含有自身互补序列。4.两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体。5.与非特异扩增序列的同源性应小于70%, 查看更多>
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优点
1、多种染料及淬灭基团自由选择。
2、专利的ZENTM或TAOTM双重淬灭
基团探针设计:
·更低的背景荧光
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PrimeTimeqPCR探针灵敏度高,可靠性大,可用于多重或数字PCR。
淬灭基团染料有多种选择(如下图),与常见的qPCR平台兼容。

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双淬灭基团探针提高检测灵敏度
使用ZEN或者TAODouble-Quenched探针减少背景干扰,提高检测灵敏度。独有的内部淬火剂总是位于5’端荧光基团后9个碱基与3’端IowaBlack®淬灭剂一起作用最大化探针性能(如下图)。

与传统方法相比,可以将背景噪音降低4倍(如下图A)和信号值提高大约30%(如下图B),ZENDouble-Quenched探针给出更优的表现。

对于长探针同样高效适用
对于40碱基的长探针也可以有效淬灭,这意味着在探针设计上有更多选择,比如富含AT的区域。

希望对有需要的朋友有帮助,IDT探针合成,2073904839qq.com,www.nanodigmbio.com,
ABI7500与伯乐CFX96的对比123
刘鹏KRrj52017-10-03
伯乐的不错,实验目前用的就是这块,产品质量可以
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧光检测设备可实时监测扩增情况。该扩增法具有简单、快速、准确、易检测、适用面广等优点。迪澳转基因快速检测箱,配置了高通量恒温荧光检测仪DEAOU-308C、转基因快速检测试剂、植物基因组核酸提取试剂及必备的实验耗材。为客户提供了精确高效、功能全面、经济实用的转基因检测手段。

组织用Trizol法提取总RNA浓度、纯度都很好,但逆转录后跑PCR,CT值偏高,内参的在22-27之间,目的基因在30-36之间,不知道是怎么回事,如何来解决,求高手赐教。我用的Takara的试剂盒

如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
分子生物学实验报告123
louise36532021-07-23
前天我做pXJ41-p21质粒扩增,所用的新霉素终浓度是60μg/ml。但经过培养过夜后,昨天下午都未出现菌落,不知是不是新霉素浓度过高?还是感受态细菌的问题?刚开始摸索,未设空白对照。请教各位高手,是何原因?
以下是质粒质粒扩增步骤:
1.取400μlLB液先置于37℃水浴30分钟
2.100μlJM109(存于-80℃)于冰上解冻
3.解冻后加入50ngDNA质粒(对照只加感受态细胞)冰浴30分钟(计时)
4.42℃水浴90秒
5.冰浴2分钟
6.加入400μlLB液
7.37℃恒温摇床200rpm摇匀1小时
8.取200μl平均分布(旋转平皿)于培养基上,倒扣培养皿37℃过夜

跑到还有半小时的时候,跳出一个对话框:“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”,最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线,请各位大神帮忙解释一下。

你这个结论并不对。两步法,三步法并没有本质区别,信号的读取都是在每一个延长结束后读取。定量PCR一开始的时候也是三步法的。

两步法,是因为设计引物的时候把退火温度设为酶的工作温度,而且定量PCR的产物都很短,需要的时候都短,所以两步法更方便。三步法的话,花的时间长,不利于快速实验。
我明年就毕业了,可是论文还没投,快急的不行了,做的实时荧光绝对定量PCR,跑标曲带样用的Bio-RadIQ5机子,可是结果出来不知道分析的是哪个指标(ct,ctmean,sq,sqmean,logsq),不会处理数据,求高人指点啊,拜托了拜托了,好人好报啊
实时荧光定量PCR即
Real time PCR(也称实时定量PCR)
定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术,即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量,并据此推断目的基因的初始量,不需要取出PCR产物进行分离。目前实时定量PCR作为一个极有效的实验方法,已被广泛地应用于分子生物学研究的各个领域。
实时荧光定量PCR 技术的主要应用:
1. DNA 或RNA 的绝对定量分析:包括病原微生物或病毒含量的检测,转基因动植物转基因拷贝数的检测,RNAi 基因失活率的检测等
2. 基因表达差异分析:例如比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差异(如药物处理、物理处理、化学处理等 ),特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的确证
3. 基因分型:例如SNP 检测,甲基化检测等
Realtime PCR 常用的两种方法分别为:Sybr green(荧光染料掺入法) 和Taqman probe (探针法)
SYBR green
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
此方法适用:
1、灵敏度高:使用SYBR可使荧光效果增强到1000倍以上
2、通用性好,不需要设计探针,方法简便,省时,价格低廉。
3、通用型方法,在国内外科研中普遍使用。
4、高通量大规模的定量PCR检测
5、专一性要求不高的定量PCR检测。
Taqman Probe
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步
此方法适用:
1、具有高适应性和可靠性,实验结果稳定重复性好,特异性更高。
2、适用于扩增序列专一的体系的检测。
3、样品中靶基因含量过低的定量PCR检测。
4、靶基因的特异序列较短,无论怎样优化引物设计条件都不能解决。
5、存在与靶基因同源的序列,在PCR中容易出现非特异性扩增,对特异性要求较高的定量。
6、广泛用于人类传染病的诊断和病原定量,在动物病原体基因的检测,畜禽产品的检验检疫,生物制品的鉴定。
各位高手不知有没有谁用过数字PCR技术,主要是用于检测肿瘤组织或DNA样品中的位点突变和等位基因不平衡。
数字PCR基本原理如下:



想请教大神们,怎样设计INT引物、MB-red探针以及MB-green探针