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请教有没有人知道哪里可以做数字PCR(dd-PCR)的公司，急求！

跪谢！

数字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR，数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。向左转|向右转

环境是人类赖以生存的自然条件，包括水、土壤、空气等物质。环境中的变化会对人类的日常生活造成潜移默化的影响。
水质分析
水是生命之源，清洁的环境水质是社会可持续发展的重要目标。
>水质常规指标检测解决方案
> 化学污染物指标测试
空气质量监测
生命离不开空气。保障空气质量安全，维护公共健康是政府和个人都关心的问题。赛默飞通过先进的空气质量监测技术，操作简便和性能可靠的监测仪器，高效稳定的系统，能开展气体检测和温室气体分析。
> 环境空气质量自动系统
> 大气复合污染（灰霾）监测解决方案
> 污染源烟气连续自动监测解决方案
> 汞监测解决方案
> 温室气体解决方案
> 在线环境及流程监控
> 气溶胶及气体组分在线离子色谱监测系统
辐射测量与安全
赛默飞是全球最重要的辐射测量和安全仪器供应商之一，产品应用于核电站、国土安全、军队、辐射管理部门、环保和医疗机构、应急响应等众多领域和机构。
> 便携式多功能辐射巡测系列产品
> 分布式网络辐射监测软件系统
> 长寿命放射性核素监测
土壤和固体废弃物
土壤及固体废弃物监测是环境监测中未来的重点领域。环境污染物可在土壤中长期积累，造成持久性污染。在未来几十年内城市化进程中，固体废弃物污染造成的环境污染将是多数城市都无法回避的问题。
> 欧盟环保指令-RoHS指令和无卤分析
> 持久性有机污染物分析
> 样品前处理
服务中国空气检测40年，专利EPA认证PM2.5监测产品遍布各大城市。 保障食品安全的重要手段是在食用之前，对食物从原材料、生产到出厂都经过严格的检测和管理。优异的实验室集成服务还可高效率大批量处理样本，以低成本运营，并在保证产品质量符合法规要求的基础上，提升产量和效益。
应对食品安全领域各项挑战
> 环境污染物
> 微生物检测
> 非法添加剂
> 农药、兽药残留
> 转基因
> 重金属
> 食品原产地与等级区分
> 食品重属鉴别
> 食品掺杂分析
> 危害分析与关键控制点管理
> 食品中非目标物筛查……
食品安全检测方法屡获“技术创新大奖”
食品安全快速响应中心快速响应15个食品安全危机事件。 赛默飞致力于生命科学领域的技术创新，带来更好的科学成果。
生命科学是研究生命现象、生命活动的本质、特征和发生、发展规律，以及各种生物之间和生物与环境之间相互关系的科学。
遗传分析
从金级标准的Sanger测序到简单、可扩展的Ion Torrent二代测序，优化的应用、优质的耗材以及简化的解决方案实现快速、准确且经济的结果。
基因检测与功能分析
汇集核酸分析领域的顶级品牌，包括定量PCR、数字PCR技术、克隆、反转录与基因调控产品，RNA研究领域的翘楚产品。
蛋白质功能分析
包括创新化学试剂、高效分离产品、领先色谱质谱技术，以及蛋白质组学数据处理软件，能更有信心地面对蛋白质研究的挑战。
细胞培养与分析
Ion Torrent测序仪在超过90份同行出版物被引用，是出版物中引用频率较高的台式测序。
医疗健康
研制各种专业诊断的仪器和试剂，实验室常规设备和耗材，以及各种医学研究用的先进平台与产品、
病理诊断
从常规病理检测，到数字病理分析，再到分子病理诊断。针对病理 实验室特殊环境需求及高负荷工作需求，一流的仪器设备耗材，流程设计及工作优化方案，帮助病理工作者更安全，高效地完成诊断，同 时提高诊断准确率。
感染诊断
涵盖各类型培养基、血培养系统、微生物鉴定、 药敏检测，以及降钙素原检测、PCR、qPCR、测序等系列产品，可帮助临床医生作出早期感染诊断、控制感染、指导抗生素合理使用、监测治疗和疾病 预后。
过敏诊断
过敏原自身免疫疾病诊断设备与试剂采用抗原包被技术、高特异性和高稳定性，被誉为过敏原检测的金标准。
移植诊断
通过移植前对受体/供体的组织相容性抗原（HLA）的配型、相关特异性抗体以及非HLA因素的一系列检测，为移植前 准确筛选供体、移植后有效预防抗体介导性排斥反应提供科学准确的依据，提高移植手术成功率。
转化医学研究
在转化医学领域，产品和技术广泛应用于从细胞到蛋白组学，再到基因组学的研究，加速生物标记物用于伴随诊断及个体化医疗 医药产业是一个国家国民经济的重要组成部分，与国民生命健康和生活质量等利益密切相关。
赛默飞专注制药生产的每个环节。　　
> 研究阶段
- 基础研究 靶标发现 药物设计
- 基因功能分析
- 蛋白质分析
- 细胞培养分析
- 化合物分析和筛选
> 技术市场化阶段
- 预临床研究 一期临床 两期临床 三期临床
- 临床前评价
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> 生产上市阶段
- 药物生产 药物上市 四期临床
- 大规模生产
- 过程控制
- 质检和质控
- 大规模临床试验
中医药现代化整体解决方案
中医药是中华文明长期发展中积累下的宝贵财富，其有效的实践和丰富的知识中蕴含了深厚的科学内涵。
生物仿制药解决方案
在快速发展的生物仿制药领域，用简单、可靠的解决方案，提供安全的产品，最大限度缩短上市所需时间。 除医疗、生物制药、食品安全和环境还有法医行业外，赛默飞的产品与技术也在众多工业行业得到广泛应用，服务生活及工业制造的方方面面，满足各行各业的需求。
石油化工
从石化上游的原油开采、输送、炼油和乙烯生产，到下游合成材料、精细化工、橡胶加工等完整的产业体系，解决石油化工行业各业务环节中的实际问题。
> 石油炼制 > 天然气加工
> 石油产品分析 > 精细化工
> 化石生产 > 生物柴油
> 化工产品
钢铁
从材料处理到金属加工再到最终产品监控，在线及实验室的严苛金属分析，改善工作流程，提供优异的元素分析产品和服务。
> 原料处理 > 冷轧
> 炼钢 >钢加工
> 热轧 > 中心监测站
水泥
独一无二的创新技术为整个水泥加工流程提供了综合解决方案，兼顾原材料、能耗、替代性燃料使用和添加剂优化。其中具 有可靠、耐用、紧密和高性价比的分析技术，可为从小型水泥生产厂，到大规模生产研磨站的众多客户提供服务。综合的化学和包括游离氧化钙在内的物想分析， 在线确保更优的简仓控制。
能源
科学家和工程师对前沿能源相关重要材料的化学、结构和性能间相互作用实现控制。
> 燃料电池
> 发电厂
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机电
伴随微电子和半导体器件制作尺寸的越来越小，使用元素和化合物种类的不断增加，由此产生了一系列复杂的材料问题，为材料工程师带来了更严峻的挑战。对于这一蓬勃发展的行业，市场上并不存在有一项能够完全满足所有相关材料分析的技术。
材料
材料科学家和工程师研究和开发先进的涂料和涂层、陶瓷和玻璃、纸张和油墨等众多材料，实现对包括塑模、文物、印刷、光学部件、汽车组件等在内应用的提升。

荧光定量PCR数据如下表，想通过GraphPadPrism5软件构建柱状图，但不知道是将2-△△Ct数据导入GraphPadPrism5软件，还是将Mean和SD导入GraphPadPrism5软件中。请大神赐教。另外Mean和SD是求的△△Ct的还是2-△△Ct的？

跑到还有半小时的时候，跳出一个对话框：“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”，最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线，请各位大神帮忙解释一下。

PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下，DNA聚合酶依赖的酶促合成反应，扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。
数字PCR(Digital PCR)仪器　　伯乐生命bio-rad QX200 微滴式数字PCR (ddPCR) 系统可对DNA或RNA分子进行绝对定量分析，适用于 EvaGreen 或基于探针的数字PCR应用领域。　　QX200 Droplet数字PCR(Digital PCR) 系统的应用领域：　　癌症生物标志物研究和拷贝数变异分析　　以卓越的灵敏度和准确度测量癌症突变的变异程度、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。　　病原体检测　　精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析，从而检测和监测病原体。　　与新一代测序 无缝对接　　无需使用标准曲线，直接对 NGS 库执行绝对定量分析。　　基因表达分析　　可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性极佳的检测。　　环境监测　　使用 QX200 系统可测试多种环境样品，例如土壤和水。　　食品检测　　采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。向左转|向右转

1单位（U）Taq DNA 聚合酶力定义74°C、30钟内性化马哈鱼精DNA作模板/引物10nmol脱氧核苷酸掺入酸容物质所需酶量图" class="ikqb_img_alink">

请教园友：

一般做mRNA表达的时候，需要注意提取的RNA中是否有DNA污染，或者通过设计跨内含子的引物来解决。那么，检测MmiRNA的时候，需要注意RNA中DNA污染的问题么？

在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。向左转|向右转

求助各位大侠，最近做的荧光定量PCR，标准曲线稀释一直不好，请教各位，

采用的标准品是自己提的细胞基因组，浓度最高从125ng/uL，5倍稀释，到最低0.2ng/uL，问题如下：

1.最后一个浓度做出来的扩增曲线重复性非常差，而且与前一个浓度梯度CT值差值约为5左右，稀释过程与前几个浓度时操作一致。

2.待测样品中目标基因若含量高，则重复性尚可，若含量略低，Ct值在30及以上，重复性也很差。

说明，

1、每个标准曲线浓度的稀释操作均一致，涡旋混匀时间>15s

2、所用移液枪无问题，枪头为低吸附枪头

3、操作移液枪无问题

实验不顺，甚是不爽，各位大侠出手解救

在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digital PCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。

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