Yeast Bacteria Cell Lysis Buffer for PCR
Name | Yeast Bacteria Cell Lysis Buffer for PCR |
Cat. # | Y2020 $16.00 (50 rxns) How to pay with ![]() Also can buy from : ![]() ![]() |
Product Description | This buffer provides a fast and easy way to lyse cells. It starts with a single colony or a loop of patched cells to make template for PCR reactions. The PCR reaction can be used as templates for homologous recombination and identification of colonies. This technique can also be used to determine insertion/deletion size and/or orientation in the genome when used for identification of homologous recombination integration. This product is for research use only. |
Product Component | lysis buffer 1 ml for 50x samples. |
Storage / Shipping | Ship at room temperature.Store at 4°C. |
Shelf Life | 24 months |
Manual | ![]() |
![]() | Exosome Isolation | Purity > 95% |
![]() | Protein Extraction | 1 min total protein, 40 min membrane protein |
![]() | 3D Cell Culture Gel | 30% < mkt=""> |
![]() | PCR Kits | 50% < mkt=""> |
![]() | Beta-Hexosaminidase Activity Colorimetric Assay | Fast and sensitive, High-throughput |
![]() | Endotoxin-Free Plasmid Kits | maxi, midi and mini-prep |
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荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物,从而可进行绝对定量或者相对定量。
在科学研究中细胞培养等技术已是相当成熟,可对细胞的状态完全无保留的呈现给研究者是一直以来的难点。不过,现在一种新的成像技术的出现,给研究者们带来了曙光,那就是全息成像技术,前期这种技术大多应用在摄影方面,目前瑞典Phiab公司采用这种全息技术新开发出HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统,成功将这种高新技术应用到生命科学领域。
那这位新晋之主能为我们带来哪些惊喜呢?
1,长期、非侵入性细胞检测
M4是采用物理干涉成像技术,实现了对细胞非侵入、无标记性的观察,最大程度地体现细胞的真实状态,并可以排除实验处理的假阳性。在系统的分析软件中,可以对观察细胞实现3D重建,并对图片添加伪彩,增加细胞与背景的对比度,让你实验图片焕然多彩,不再只是黑或白。
2,细胞追踪
M4可以对细胞进行长时间延时拍摄,实现细胞边培养边拍摄,自动记录细胞的运动性。目前在许多科学研究中,细胞运动性,细胞迁移率是判断细胞敏感性的重要指标,在M4系统中不仅可以获得细胞长时间的形态上的直观图片,同时,分析软件中的Trackcells可以给予单细胞,多细胞的运动轨迹,迁移方向,迁移距离等多种数据,避免了你在实验之后的数据统计和数据分析过程,真可谓是省时省力。
3,数量统计
M4分析系统中采用细胞分割识别的方法,可以进行多种统计方法的细胞识别。(也可以进行手动调节哦!)根据采集图像区域与培养皿体积的相关性,对整个培养皿的细胞数量进行统计。除此之外,系统会自动生成任一细胞参数的数量统计柱形图,比如细胞体积的柱状图即不同细胞体积下的细胞数量分布。
4,形态学分析
形态学分析是M4系统中相当强大的功能。无论是实时成像还是延时成像,对图片中每个细胞的各个形态参数都有记录,如:体积、面积、最大厚度、平均厚度、周长、不规则度等。软件中Analyzecell可以对细胞参数之间的相互关系及细胞的分布情况直接输出散点图,研究者同时可以对散点图进行标记,记录实验所需的实验分析区域。并对每个区域又仅进行细胞形态学及统计学分析。该功能对细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等领域有很好的应用。
5,数据输出
M4不仅可以输出图片也可以对延时拍摄图片制作成视频进行输出,更加直观的对细胞形态及细胞活动进行观察,为你的科研汇报更添佐证。
HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统利用全息技术将细胞的每个点都几录下来,每个全息图中包含了图像中的全部数据,对于科研要求越来越严格的研究人员来讲,这无疑是细胞生物学的一个新的里程碑。
HoloMonitorTMM4激光全息成像及分析系统已经应用到了许多生命科学研究方面,如肿瘤侵袭与转移、细胞耐药性、纳米微阵列、混合纳米聚合物胶束、细胞周期、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、神经细胞观察等。目前研究者仍在挖掘M4的更多技术,更多应用、更多创新。
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源(荧光染料或荧光标记的探针,看你用什么策略来做定量PCR)
报价要看你需要服务商提供什么服务,如果你只提供实验材料,要求服务商做以上全部工作,只检测一个指标(一个基因的表达水平变化),价格大约每个样品350-500元,多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛,所以你按1000块一组样品预算吧。
(2)操作多份样品时,应先配制反应混合液并分装,减少操作,避免污染,同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染,移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的,吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染,使用一次性手套,EP管与吸头应一次性使用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心,吸样要缓慢,防止样品进入移液器内;吸样时尽量一次性完成,忌多次抽吸,以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻,以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存,防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验,既可验证LAMP反应的准确性,又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理,尽量避免开盖检测,开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测,有效防止污染发生。展开
同一温度下,首先通过M-MLV反转录酶产生靶标核酸(RNA)的一个双链DNA拷贝,然后利用T7RNA多聚酶从该DNA拷贝上产生多个(100~1000个)RNA拷贝;每一个RNA拷贝再从反转录开始进入下一个扩增循环;还可以加入荧光探针(分子信标),带有荧光标记的探针和这些RNA拷贝特异结合,产生荧光。该荧光信号可由实时荧光PCR仪实时捕获,直观反映扩增循环情况。
SAT检测技术的优势
→先进的恒温扩增技术
核酸扩增在一个温度下进行(42℃),无需热循环。
→领先的RNA检测技术
SAT技术直接以病原体特异性RNA为扩增靶标,以扩增产物RNA为检测靶标,在实际应用中更显优势意义。
→更高的检测灵敏度和准确性
SAT技术的扩增效率极高,15~30分钟即可将模板扩增109倍,检测灵敏度和准确性远高于其他核酸检测技术。扩增时间短,效率高。
→有效减少假阴性结果
SAT技术采用M-MLV逆转录酶和T7RNA多聚酶进行核酸扩增,相对于其它核酸扩增技术,反应抑制物更少,有效减少假阴性结果。
→有效的解决了扩增产物的污染问题
由于扩增产物为RNA,环境中极易降解,从而大幅度提高检测结果的可靠性。
→大大降低了核酸扩增实验室的要求
C代表的是cycle,循环数目,T代表的是threshold,阈值。
所以表达量越少的话,需要越多的循环才能扩增出来。也就是CT值越高








