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Signalchem/WNK1 siRNA Set I/50 nmol/W02-911-50
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Signalchem/WNK1 siRNA Set I/50 nmol/W02-911-50
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Signalchem
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W02-911-50
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Overview:

WNK1 is a member of the WNK subfamily of serine/threonine protein kinases that is a key regulator of blood pressure by controlling the transport of sodium and chloride ions. Mutations in WNK1 have been associated with pseudohypoaldosteronism type II and hereditary sensory neuropathy type II. WNK1 is a regulator of blood pressure and deficiency of this protein in mice lowers the blood pressure (1). WNK1 can regulate the Ca(2+) sensing and the subsequent Ca(2+)-dependent interactions mediated by synaptotagmin C2 domains and WNK1 exhibits additive CFTR inhibition (2).

Gene Aliases:

HSAN2; HSN2; KDP; KIAA0344; MGC163339; MGC163341; p65; PRKWNK1; PSK

Genbank Number:

NM_018979

References:

1. Zambrowicz, B. P. et.al: Wnk1 kinase deficiency lowers blood pressure in mice: a gene-trap screen to identify potential targets for therapeutic intervention. Proc. Nat. Acad. Sci. 100: 14109-14114, 2003. 2. Lee, B.-H. et.al: WNK1 phosphorylates synaptotagmin 2 and modulates its membrane binding. Molec. Cell 15: 741-751, 2004.

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mRNA 显示蛋白的纯化和逆转录实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/them... 查看更多>
Post-transcriptional gene silencing (PTGS), which was initially considered a bizarre phenomenon limited to petunias and a few other plant species, is now one o 查看更多>
本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多>
原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。 查看更多>
• Isolate total RNA and native protein from the same sample • Enrich for small RNAs (<200 nt) • Ideal for assessing siRNA or miRNA express 查看更多>
Preparation of Poly A+ RNA and Northern AnalysisProcedure (Pharmacia #27-9255-01) Use RNase-free tips and reagents and wear gloves1) Remove organs from six C57 查看更多>
Author: Zuyuan QianSource: Contributed by Zuyuan QianAbstract: This is the standard and complete Northern blotting protocol including preparation of RNA gel , 查看更多>
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 查看更多>
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称,作为病毒的一种,噬菌体具有病毒特有的一些特性:个体微小;不具有完整细胞结构;只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因,但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身的生长和增殖。 查看更多>
在提取过程的第一阶段细胞的 RNA 酶应尽快灭活。一旦内源的 RNA 酶被破坏,RNA 受损的可能就大大降低,而纯化的过程就可以按合适的速度进行。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多>
Northern BlottingAdapted from Molecular Cloning (Maniatis), Current Protocols in Molecular Biology, and J. Yost Lab (UMN) Objective:Northern blotting allows de 查看更多>
We routinely produce dsRNA by in vitro transcription of a PCR generated DNA template containing the T7 promoter sequence on both ends (I. Primer Designed dsRNA 查看更多>
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上海恒远是卖试剂盒的,但是不知道有没有你说的这个试剂盒,你可以打电话问问
RNA干扰的成功与困惑123
到处游走的雨2017-10-03
http://www.bioon.com/biology/Special/RNAi/Index.shtml
这里有关于miRNA专题报道,可以看看
TRIZOL裂解细胞
氯仿萃取RNA
异丙醇沉淀RNA
酒精清洗
大鼠颗粒细胞的提取和细胞中RNA的抽提
总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
RIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。
无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIPURE试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIPURE抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。
TRIpure试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。
序列特异性RNA测序文库构建时,当RNA被逆转录后,为什么需要先合成CDNA,再连接头,最后再降解掉二次合成的cDNA呢?为什么不能直接逆转录后加接头?希望资深人士帮忙解答疑问。谢谢!
此方法出自以下文章High-ThroughputIlluminaStrand-SpecificRNASequencingLibraryPreparation(ColdSpringHarborProtocol)

求助:最近要提取血浆中的RNA,不知道用哪种试剂好,查了好多资料,有用Trizol,TrizolLS,RNAisoBlood和天根。但我从没做过,求各位大神给点意见。提取的RNA用于qPCR。

我在提一种植物的RNA用的是上海华舜生物公司的TRIZOL按照他上面的说明书,我应该用System4那种方法,可是里面要用到RNA沉淀试剂,不知道是什么东西,试剂盒只有一瓶,是RNAexReagent。其它的就没有了。不知道那东西是什么,要自己配吗?RNA沉淀试剂是什么东西?
rn2502试剂盒提取rna还需要哪些试剂
准备RNA用的试剂:70%乙醇(用DEPC处理后的水稀释新开封的无水乙醇),DEPC处理后的水,新开封的三氯甲烷等,
容器:玻璃试剂瓶需要180度,8个小时以上烘烤
Eppendorf管和“枪头”:RNase-free的管子和“枪头”(可以直接买到);或者普通的ep管和“枪头”,但是需要DEPC水浸泡后,高温灭菌(121度,20-40分钟)。
如果需要使用研钵和药品匙,研钵和药品匙也是需要180度,8小时以上的烘烤。
还需要没开封的手套,提取RNA时,尽量勤换手套,少说话,尽量不要对着样品吹气。

RNA提取对于科研人员来说并不陌生,但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上,现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要,为什么往往提取的RNA却容易失败呢?

RNA提取失败的主要现象有三个:提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟怎样才能确保RNA提取的成功率呢?

首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用抑制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差。

其次,选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,进一步丰富了TakaraRNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统,无需苯酚氯仿抽提等步骤,简单快捷。组织或细胞裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。

对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以轻松解决这个问题。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、真菌提取高纯度的TotalRNA,适用范围广泛。按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂


Jou讲义rnal123
忠诚的粉丝萌萌2017-10-03
尔梅洛于1998式发表论文,公布关RNA干扰机制发现发现基础,RNA干扰技术近迅速兴起,其前景普遍看RNA能够充信使,传递DNA(脱氧核糖核酸)遗传信息,其用于蛋白质产合研究显示,向物体内注入微RNA片段,干扰物体本身RNA信使功能,导致相应蛋白质合,关闭特定基科家认,采用RNA干扰技术直接源让致病基沉默,许更效治疗某些疾病 种技术初曾用研究植物蠕虫等,科家发现哺乳物细胞效例,美哈佛医院科家已经功利用RNA干扰技术治愈实验鼠肝炎目前,RNA干扰治疗技术快速进入体试验阶段些公司资助用项技术治疗黄斑变性、乙肝等疾病试验 尚几难题首先科家没找种便快捷使RNA干扰能患者体内效部位进行其科家确定种疗否影响目标基外其基引发副作
RNA提取中各种试剂的作用 123
guojing郭晶2021-07-25

Trizol法和试剂盒提取组织中的RNA,哪个方法更可靠和精确呢?谢谢!

TRIpure 试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。乙醇沉淀能析出中间层的DNA,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白。共纯化DNA对于样品间标准化RNA的产量十分有用。 无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure 试剂操作上的简单性允许同时处理多个的样品。所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染。故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆。如果是用于PCR,当两条引物位于单一外显子内时,建议用扩增级的DNase I来处理抽提的总RNA。并用溴化乙啶染色,可见许多介于7 kb和15 kb之间不连续的高分子量条带(mRNA和hnRNA成分),两条优势核糖体~5 kb (28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之间 (tRNA, 5S)。当抽提的RNA用TE稀释时其A260/A280比值≥1.8。 TRIpure 试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的RNA琼脂糖凝胶电泳A260/A280比值≥1.8。

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