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Wheaton/2mL Ext RB CryoElite, Nat Cap Patch/2mL Ext RB CryoElite/W985850
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Wheaton/2mL Ext RB CryoElite, Nat Cap Patch/2mL Ext RB CryoElite/W985850
品牌 / 
Wheaton
货号 / 
W985850
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Description
  • Exacting round bottom cryogenic vial allows for up to 17,000 MAX RCF (xG)
  • Unrivaled cap seal exceeds DOT and IATA regulations ensuring ultimate protection of samples during transportation and demanding freeze-thaw handling
  • Made from low binding, cryogenic grade virgin polyproplene
  • Lot certified RNase/DNase and Endotoxin Free providing assurance of product integrity
  • External threaded screw cap can be easily removed with one hand
  • Writing Patch
Specs
Specs
SKUW985850
MaterialPlastic
Cryogenic CategoryCryovials
Bottle / Vial StyleVials
Writing Patch?Yes
Package StyleVial And Cap
Cap ColorNatural
Bottom StyleRound
Cap Closure StyleExternally Threaded
Plastic MaterialPolypropylene (PP)
Capacity (mL or dr)2mL or 0.5dr
Capacity/Vol (mL)2
Capacity (mL or oz)2mL or 0.07oz
Diameter (mm)12
Height (mm)49
Closure StyleExternally Threaded
Prod Lit
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The ribonuclease protection assay (RPA) is a highly sensitive and specific method for the detection of mRNA species. The assay was made possible by the discove 查看更多>
Sucrose Density FractionationLEVEL II Figure 14.2 Sucrose gradient distribution of RNA Materials 10% and 40% (w/v) Sucrose 80.02 M sodium acetate, pH 5.1, cont 查看更多>
DNA ultrapurificationThe success of DNA purification can have profound consequences on the success or failure of any injection effort. This summary of techniqu 查看更多>
Using siRNA for gene silencing is a rapidly evolving tool in molecular biology. There are several methods for preparing siRNA, such as chemical synthesis, in v 查看更多>
真核细胞的mRAN是单顺反子,其最显著的特征是具有5‘'端帽子结构和3'端的poly A的结构,此poly A结构为mRNA的提取提供了有效的途径。 查看更多>
PolyATtract® mRNA Isolation SystemsThe PolyATtract® mRNA Isolation Systems utilize Promega"s MagneSphere® technology to eliminate the need for olig 查看更多>
全血中含有有核白细胞,因此从血液中抽提 RNA 比较方便,但是红细胞富含核糖核酸酶,所以从血液中分离 RNA 奋其持殊的难度。因此若能先将有核白细胞与红细胞分离开来,从血液中抽提 RNA 更易成功。下述方法是酸-酚. 胍法•硫氰酸胍吋裂解细胞,并有效地灭活核糖核酸酶。 查看更多>
原理酵母核酸中RNA含量较多,DNA含量则少于2%。RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,有此可得粗RNA制品。 查看更多>
Isolation of DNA from Mouse Tail Biopsies1. Obtain tail biopsies from 2 to 3 week old mice: Hold mouse firmly at base of tail with one hand, with the other cut 查看更多>
与 rRNA, 5SRNA, 5.8 SRNA 和 tRNA 相比,大多数真核生物的 mRNA 在其 3' 端带有 poly(A) 尾巴。因此,mRNA 能用 oligo(dT)-纤维素亲和层析法从细胞总 RNA 中分离 (Edmonds et al. 1971; Aviv and Leder 1972)。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。 查看更多>
Pichia pastoris is a methylotropic yeast used to express high amounts of protein. Secreted expression is achieved with a cleavalable faktor. To yield high expr 查看更多>
虽然 FDD 利用了真核 mRNA 的多聚腺苷酸 [poly(A)+] 位点,但并不推荐使用 poly(A)+RNA,因为在反转录反应中可能污染寡核苷酸,并因此增加假阳性的概率。所以建议使用总 RNA 做 FDD 分析。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 查看更多>
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想请问各位大神~哪个厂家的真菌RNA提取的试剂盒性价比高点呀~~本人毕业论文,想做基因表达的~~查了一下天根RNAprepPure植物总RNA提取试剂盒,跟生工的酵母总RNA快速抽提试剂盒与真菌总RNA快速抽提试剂盒,就想在这三个里面选~~但天根的比较贵呀~~生工的效果有不知道如何~?想问一下各位有木有用过这几个试剂盒的?那样好一点呀~~求回复~~~~谢谢各位了~
《rna干扰》ppt课件123
zkk4042021-08-02
我自己看了几十篇文献后做的。应用方面主要是病毒学,有用你就顶一下。

RNAi技术的原理与应用(一).ppt(218.5k)
RNA干扰的成功与困惑123
到处游走的雨2017-10-03
http://www.bioon.com/biology/Special/RNAi/Index.shtml
这里有关于miRNA专题报道,可以看看
序列特异性RNA测序文库构建时,当RNA被逆转录后,为什么需要先合成CDNA,再连接头,最后再降解掉二次合成的cDNA呢?为什么不能直接逆转录后加接头?希望资深人士帮忙解答疑问。谢谢!
此方法出自以下文章High-ThroughputIlluminaStrand-SpecificRNASequencingLibraryPreparation(ColdSpringHarborProtocol)
E.Z.N.A. Total RNA Kit I
步骤
A. 真核细胞和组织
自己需要的材料:
β-巯基乙醇、70%乙醇(DEPC水配置)、除RNase的枪头和EP管。
材料的最佳量
想得到最佳的产量和好的Hibind RNA柱的纯化效果,选用正确的细胞和组织量是最重要的。Hibind RNA柱的最大处理量是可变的,根据细胞和组织的类型。最大的结合能力是100ug的RNA。TRK裂解缓冲液的最大裂解能力是1*107个细胞或30mg的组织。
细胞的步骤
1. 用500ul的TRK裂解缓冲液裂解细胞(≤1*107),使细胞团松散,轻轻弹EP管或者用枪头吹旋,再用漩涡振荡混匀。
a) 使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β-巯基乙醇。
b) 如果是单层的组织培养细胞(成纤维细胞,内皮细胞等),可以直接在细胞培养器里裂解细胞。完全吸去培养基后直接加TRK裂解缓冲液至细胞中。加700ul的TRK到T35细颈瓶或250px的培养皿中,更小的培养器加500ul的TRK。将液体布满整个器皿表面,确保细胞裂解完全。将裂解产物转移至1.5mlEP管中。
c) 如果细胞是悬液培养,收集细胞(≤1,500rpm or 400*g)*5min,弃上清,加入TRK裂解液,漩涡振荡混匀,转移到1.5ml EP管中,进行步骤2。
2. 匀浆化裂解产物
“裂解和匀浆化样品”-第四页有详细的说明,如果细胞≤1*105,漩涡振荡1min。不完全使样品匀浆化会显著的减少RNA的产量还容易造成柱子堵塞。
a) 用匀浆器30 s,使样品匀浆化。
b) 用钝的针头的注射器(0.9mm直径),至少吹打5次是样品匀浆化。注射器要除RNase。
3. 将匀浆后的裂解产物转移至Homogenization Spin Column中,离心,≥1,4000*g, 3min,室温。将离心收集的流出液转移到新的EP管中。转到总RNA分离中第4步。
组织的步骤:
1. 用500ul的TRK裂解缓冲液裂解细胞(≤30mg),使用前每1ml TRK裂解缓冲液加入20ul的β-巯基乙醇。
500ulTRK裂解液最大裂解能力30mg,难破碎的组织大于20mg就用700ul的TRK裂解液。当组织量超出建议的最大量时,也不要超过40mg。
组织样品匀浆化参照第四页选择一种方法只用,除非是使用液氮,
2. 离心,≥1,5000*g, 5min, 室温。
3. 转移上清至,Homogenization Spin Column中,离心,≥1,3000*g, 3min,室温。将离心收集的流出液转移到新的EP管中。
总RNA分离:
4. 在裂解产物中加入50%体积(250ul-350ul)的无水乙醇(96%-100%)混匀,漩涡振荡20s。
5. 样品转移到Hibind RNA Mini column上,离心管的最大容量为750ul,加完乙醇后可能会形成沉淀。所以要充分振荡将所有的混合液加入到柱子上。室温离心,10,000*g,0.5-1min。弃去流出液(透过柱子流出到离心管里的液体)。
6. 将柱子放在一个新的2ml收集管中,加上300ul RNA wash buffer I。室温离心,10,000*g, 0.5-1min。同样弃掉流出液。
7. DNase I 消化(选择性)
在我的实验中没有做这一步。
8. 将柱子再放到一个新的2ml收集管中,加入400ul RNA wash buffer I, 室温离心,10,000*g, 30s,弃流出液。
9. 将柱子放到2ml收集管中,加入500ul RNA wash buffer II(乙醇稀释过的),室温离心,10,000*g, 30s,弃流出液。注意:使用前RNA wash buffer II 必须要用无水乙醇稀释(48ml),按照标签上的说明。
10. 用500ul RNA wash buffer II洗涤一次柱子,同上一步骤一样。室温离心,10,000*g, 30s,弃流出液。然后在空收集管中,以最大转速离心柱子,≥12,000*g, 2min, 室温,使的HiBind 基质完全干燥。
11. 转移柱子到一个新的1.5ml的Ep管中,(试剂盒中没有提供),加入50-100ul的DEPC水洗脱柱子(试剂盒中提供)。确保水直接加到了柱子的基质上。10,000*, 1min, 室温。如果RNA的总量大于30ug,可以进行二次洗脱。
注意:可以选择性地,用大一点的体积洗脱RNA。如果进行二次洗脱,总RNA的量会增加,但是浓度会降低,因为80%以上的RNA会在第一次时被回收。在加柱子前将水加热到65℃并室温孵育柱子5min会增加产量。
一场灾难正在悄悄的酝酿,人不知鬼不觉地来临.十四时二十八分,这个恐怖的时间,一场灭顶之灾从天而降,以四川省汶川为震中心的8.0级地震吞噬了人们美好的梦,这场地震摧毁了人们的家园,殃及了多个省市和地区,顿时,电力中断,交通瘫痪,山体崩塌,河水泛滥,灾区人民陷入了水深火热之中,汶川,这个在地图上鲜为人知的地方,人们很少谈起的地方,在一瞬间成为海内外人民关注的焦点,也就是那时,人们便发扬爱的精神,向灾区人民伸出援助之手,国务院在第一时间下达命令,派出国内的搜救精英赶往灾区,以“众志成城,抗震救灾”为口号,“时间就是生命,灾情就是命令”为主要目标,争分夺秒的抢救灾民,
前段时间做了一批大鼠模型,提了大鼠血液和淋巴细胞还有肺组织的RNA。量太大了只能选择试剂盒,方便,速度快。Qiagen的效果的确好可是太太贵了,要是像我这样提上百分样品的RNA估计老板不大破产,也得小破产了。比较一下后选择了OMEGA公司得RNA提取试剂盒。
下面是我自己翻译得中文说明书,大家批判着看吧,起码起个借鉴作用。有需要的就看看吧。版主也给加点分哦!:D:I
还有一些具体实验操作中自己总结的经验,不要着急整理好了就会发上来和大家一起分享。:D:D

OMEGArna提取试剂盒中文说明.doc(34.0k)
TRIZOL裂解细胞
氯仿萃取RNA
异丙醇沉淀RNA
酒精清洗

求助:最近要提取血浆中的RNA,不知道用哪种试剂好,查了好多资料,有用Trizol,TrizolLS,RNAisoBlood和天根。但我从没做过,求各位大神给点意见。提取的RNA用于qPCR。

RNA提取对于科研人员来说并不陌生,但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上,现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要,为什么往往提取的RNA却容易失败呢?

RNA提取失败的主要现象有三个:提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟怎样才能确保RNA提取的成功率呢?

首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用抑制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差。

其次,选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,进一步丰富了TakaraRNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统,无需苯酚氯仿抽提等步骤,简单快捷。组织或细胞裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。

对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以轻松解决这个问题。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、真菌提取高纯度的TotalRNA,适用范围广泛。按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂


RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。基因沉默,主要有转录前水平的基因沉默(TGS)和转录后水平的基因沉默(PTGS)两类:TGS是指由于DNA修饰或染色体异染色质化等原因使基因不能正常转录;PTGS是启动了细胞质内靶mRNA序列特异性的降解机制。有时转基因会同时导致TGS和PTGS。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,(长度超过三十的dsRNA会引起干扰素毒性)所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。
可以用TRIZOL或者plant trizol,从植物组织中提取RNA需要克服几个困难:
1.破碎和裂解植物细胞壁。
2.抑制rna酶
3.去除植物多糖和多酚。树脂 淀粉和纤维材料。
4.去除许多高等植物组织尤其是成熟组织能产生某些水溶性的次级代谢产物,这些次级代谢产物很容易与RNA结合并与RNA共同被抽提出来而阻碍具有生物活性的RNA分离。
除了干扰RNA分离之外,植物多糖和多酚及次级代谢产物还能明显抑制下游RNA反应如转录和PCR.
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