ProductHighlights:
- DepletesribosomalRNA(rRNA)
- SequencingresultscontainentiretranscriptomeofcodingandnoncodingRNAspecies
- Goodforintactandpartiallydegradedsmallsamples–only1μgoftotalRNArequired
Theyeasttranscriptomeismorecomplexthanpreviouslythought.RNA-Seqofyeastisavaluableapproachformappingthetranscriptometocharacterizenovelandlowabundancetranscripts.TheRibo-ZeroGoldrRNARemovalKit(Yeast)offersinformativesequencingresultsbyremovingunwantedrRNAbeforesequencing.
GenecoverageisenhancedfollowingdepletionbyRibo-ZeroGold(Yeast).Subsequentlibraryconstructionandsequencingproducesreadsfocusedoninformativegenomicregions.
OverviewoftheRibo-Zeroprocess
VirtuallyallrRNAisdepletedin2hours.
Step1:Washthemagneticbeads
Step2:TreatsampleswithrRNARemovalSolution
Step3:RemoverRNA
Step4:PurifyrRNA-depletedsamples,andproceedwithlibrarypreparation
RelatedInformation
rRNARemovalKitSelectionGuide
Ribo-ZeroKitSpeciesCompatibility
Ribo-ZeroKitFAQs
ebiomall.com
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这里有关于miRNA专题报道,可以看看
氯仿萃取RNA
异丙醇沉淀RNA
酒精清洗
准备RNA用的试剂:70%乙醇(用DEPC处理后的水稀释新开封的无水乙醇),DEPC处理后的水,新开封的三氯甲烷等,
容器:玻璃试剂瓶需要180度,8个小时以上烘烤
Eppendorf管和“枪头”:RNase-free的管子和“枪头”(可以直接买到);或者普通的ep管和“枪头”,但是需要DEPC水浸泡后,高温灭菌(121度,20-40分钟)。
如果需要使用研钵和药品匙,研钵和药品匙也是需要180度,8小时以上的烘烤。
还需要没开封的手套,提取RNA时,尽量勤换手套,少说话,尽量不要对着样品吹气。
Trizol法和试剂盒提取组织中的RNA,哪个方法更可靠和精确呢?谢谢!
RNAi技术的原理与应用(一).ppt(218.5k)
--本来,看好丹麦Exiqon公司,Qiagen的两个试剂盒,无奈经费有限,这两个盒子很不错,价格也不菲,有米的兄弟姐妹可以买。
--另外查询到国产上海诺伦公司的血液(血清/血浆)总RNA抽提试剂盒--广州这边用的人不多,不知道上海那边的兄弟姐妹有什么经验?
---还有,北京康为世纪公司的游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂,货号:CW2281,也比较便宜,但是俺心中也没有底,请大家给点意见。
---已经订购了LIFETECHNOLOGY的TrizolLS专门提取体液RNA的试剂(100毫升2000元人民币,也不菲),准备预试验看看提取RNA的质量。(Lifetechnology公司的AM1556也不错,但是也不便宜,每个盒子40次/2590元)
----但是还是希望有试剂盒,比较简单,快捷,最重要的是样本量太大,要分离400份左右的血清。
1、RNA提取为什么用异丙醇,而且是等体积的?
2、为什么用氯仿,RNA为什么在上清中,中间和下层分别有什么?
3、RNA提取最后为什么用75%乙醇洗,而且为什么使用的是75%乙醇而不用无水乙醇来洗。还有有人建议用完75%乙醇后用无水乙醇洗,会使水分快速蒸发,可行吗?
谢谢大家啦,帮帮忙。
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