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Signalchem/PKN3/PRK3, Active/5 ug/P69-10G-05
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Signalchem
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P69-10G-05
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Overview:

PKN3 or PRK3 is a serine/threonine protein kinase which can associate with RHOA in a GTP-dependent manner. PKN3 can also interact with GRAF and GRAF2 via the SH3 domains and phosphorylate these proteins. PKN3 is a mediator of malignant growth of human prostate cancer cells and functions downstream of activated PI3K. PKN3 is upregulated in human tumor cells but not in surrounding nontumorigenic tissues. Inducible knockdown of PKN3 expression inhibited metastasis in a mouse prostate tumor model.

Gene Aliases:

RP11-545E17.1

Genbank Number:

NM_013355

References:

1. Shibata, H. et al: PKN-beta interacts with the SH3 domains of Graf and a novel Graf related protein, Graf2, which are GTPase activating proteins for Rho family. J. Biochem. 130: 23-31, 2001.2. Leenders, F. et al: PKN3 is required for malignant prostate cell growth downstream of activated PI 3-kinase. EMBO J. 23: 3303-3313, 2004.

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分子酶专栏之等温扩增酶与原核DNA聚合酶 一.经典的原核DNA聚合酶在细菌中,三种DNA聚合酶Pol I、Pol II、Pol III共同作用,实现DNA的复制。这三种酶具有相同的5’-3’的延伸活性,只是延伸的速率不同。同时它们都具有3’-5’方向的核酸外切酶活性,这保证了DNA复制过程中的保真性,也就是所谓的矫正活性(proofreading)。除此之外,DNA Pol I还具有5’-3’方向的核酸外切酶活性。这个活性很重要,它可以... 查看更多>
生物谷: RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单改变Mg2+浓度、退火温度能解 查看更多>
酶的酶活性为了进一步验证检测方法的可行性,选择两种商品化T4DNA聚合酶进行检测,商品化T4DNA聚合酶1为NEB-T4DNAPolymerase,商品化T4DNA聚合酶2为Enzymatics-T4DNA... 查看更多>
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Several forms of post-translational modification regulate protein activities. Recently, protein methylation by CARM1 (coactivator-associated arginine methyltr 查看更多>
复旦大学生化与分子生物学实验室教授撰写碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实 查看更多>
As with many cell-surface receptors, activation of the EGF receptor can result in receptor internalization through receptor-mediated endocytosis, desensitizing 查看更多>
利用聚合酶链式反应(PCR),任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸,可在连接处产生所需要的读码框架或酶切位点。用该技术并不需要知道待亚克隆的DNA的核苷酸序列,只需要知道两小段伸展于片段两俩的区段作为扩增反应的引物结合区。 查看更多>
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首先,原核生物DNA聚合酶分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ.Ⅰ主要是起修复的作用(比如光修复),还有就是把RNA引物切除后的空隙填补起来,Ⅱ是参与原核生物SOS修复的酶,Ⅲ是原核生物在DNA延长中起主要作用的酶.
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
大家谁用过Invitrogen的platinumpfxDNA聚合酶?保真性是否如宣传的那样
我用来扩增一个1.1kb的基因,用TAKARA的EXtaq和其他的总是出现突变不知道这个酶能不能完全保真,另外末端是否加A
最近忽然对我们平常用的DNA聚合酶发生研究兴趣,想问下园子里面有没有谁实验室有那些个hot-start、Pfu之类的DNA聚合酶的重组质粒载体?这些酶的活性或是保真性应该强于我们平时使用的Taq酶,谁要是很幸运的找老外讨到了这些重组的质粒载体,PM我,谈谈交换的条件,呵呵!
哪里能买到BstDNA聚合酶!哪里的更好用一点?请大家帮忙!
RT说得概括一点考试简答用~!
DNA聚合酶是DNA复制时起作用的酶。DNA复制酶这个说法很少见。
我要P一个3kb左右的目的基因,需要一个保真性高的酶,因为后面要测序,而且我的两个引物的GC含量相差也很大,还需要一个载体连接去进行筛选,这个载体要4kb以上的,因为要和我的目的基因大小相差大一点的,而且这个载体上还要有多个切割位点,好让我切割下来,与最终的质粒相连。
最近,我看了很多这方面的资料,但是我对这个方面不是很了解,所以现在搞得头昏眼花的,不知道该选什么酶和载体,希望大家多多帮忙
在此十分感谢
端粒酶 123
shineck62014-07-18
看到原核生物DNA复制结束时,引物水解后用DNA聚合酶1补充留下的空白链。但是真核生物是水解引物后要通过端粒酶先合成一段后再用DNA聚合酶修补…不太明白为什么真核生物不能直接用DNA聚合酶修补水解引物之后留下的空白呢?端粒酶与DNA聚合酶有什么区别呢?
TaqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶,该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以活性程度很低的鲑鱼精子DNA为模板,dNTP的浓度为0.7~0.8mmol/L时,用不同浓度Mg2+进行PCR反应10min,测定结果为Mgcl2浓度在2.0mmol/L时该酶催化活性最高,此浓度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性,Mg2+过高就抑制酶活性,当Mgcl2浓度在10mmol/L时可抑制40~50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离的Mg2+浓度,因而Mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整,优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5~1.0mmol/L。适当浓度的KCl能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50~60%,其最适浓度为50mmol/L,高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。
二者的区别在于作用的底物:DNA连接酶与DNA聚合酶都是形成磷酸二酯键。但DNA连接酶连接的是DNA片段(比如冈崎片段);DNA聚合酶是将单个脱氧核糖核苷酸按顺序连接到DNA链上。向左转|向右转
DNA聚合酶作用于DNA复制时,用于连接两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键以及碱基互补配对时的氢键。
DNA连接酶作用于基因工程,用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
聚合酶的聚合酶分类 123
小超制作6352017-11-05

可分为以下几个类群:(1)依赖DNA的DNA聚合酶;(2)依赖RNA的DNA聚合酶;(3)依赖DNA的RNA聚合酶;(4)依赖RNA的RNA聚合酶。前两者是DNA聚合酶,它使DNA复制链按模板顺序延长。如在原核生物中仅就大肠杆菌中已被发现的就有三种(分别简称为PolⅠ,PolⅡ和PolⅢ等);DNA聚合酶只能在有引物的基础上,即在DNA或RNA引物的3′-OH延伸,这DNA的合成方向记为5′→3′。换言之DNA聚合酶催化反应除底物(αNTP)外,还需要Mg2+ 、模板DNA和引物,迄今细胞内尚无发现可从单体起始DNA的合成。同样,上述(3)和(4)是催化RNA生物合成反应中最主要的RNA合成酶,它们以四种三磷酸核糖核苷(NTP)为底物,并需有DNA模板以及Mn2 及Mg2 的存在下,在前一个核苷酸3′-OH与下一个核苷酸的5′-P聚合形成3′,5′-磷酸二酯键,其新生链的方向也是5′→3′。RNA聚合酶也大量存在于原核和真核生物的细胞中。如大肠杆菌RNA聚合酶分子量4.8×105,由5条多肽链组成,分别命名为α,α,β,β′,和γ,全酶可用α2ββ′λ表示。真核生物RNA聚合酶分子大于5×105,由10~12个大小不等亚基组成。聚合酶除作为自然界生命活动中不可缺少的组分外,在实验室中大多用作生命科学研究的工具酶类之一。向左转|向右转